硫辛酸對(duì)氧化應(yīng)激育肥豬腸道結(jié)構(gòu)和功能的調(diào)控作用.pdf

1、氧化應(yīng)激是動(dòng)物機(jī)體內(nèi)氧化還原系統(tǒng)失衡的狀態(tài)，是導(dǎo)致人類和動(dòng)物綜合病癥的主要原因之一。敵草快（Diquat）為氧化還原型雙吡啶除草劑，屬中等毒性化合物。 Diquat進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)后，利用分子氧產(chǎn)生氧自由基和其它活性氧（reactive oxygen species，ROS），導(dǎo)致氧化應(yīng)激。硫辛酸（lipoic acid，LA）作為一種高效的抗氧化劑可以減少ROS的產(chǎn)生，減弱DNA的氧化損傷，抑制脂質(zhì)過氧化，并能很大程度地改善體內(nèi)抗氧化防御

2、系統(tǒng)，對(duì)氧化應(yīng)激引起的疾病有顯著的緩解作用。本文研究LA對(duì)Diquat引起的氧化應(yīng)激狀態(tài)下育肥豬生長(zhǎng)性能、血漿和腸道氧化還原狀態(tài)、腸道細(xì)胞凋亡、腸道損傷及消化功能的調(diào)控作用。選取24頭（70.64±3.61 kg）的健康大白閹公豬，按照2×2因子設(shè)計(jì)，隨機(jī)分為對(duì)照、LA、Diquat、LA+Diquat四組，每個(gè)組設(shè)6個(gè)重復(fù)，試驗(yàn)期29 d。LA添加劑量為800 mg/kg飼糧，飼喂貫穿試驗(yàn)全程，而一次性腹腔滴注 Diquat于試驗(yàn)第1

3、5 d進(jìn)行，無腹腔滴注 Diquat試豬滴注等量的生理鹽水。于試驗(yàn)第29 d對(duì)所有試豬前腔靜脈采血后電擊暈懸掛屠宰取樣。
　　（1）運(yùn)用試劑盒檢測(cè)血漿和腸道的抗氧化酶類指標(biāo)，Western blotting檢測(cè)熱休克蛋白70（HSP70）和凋亡標(biāo)志性蛋白Caspase-3的表達(dá)量。
　　試驗(yàn)結(jié)果表明Diquat極顯著降低了試豬生產(chǎn)性能、血漿與腸道抗氧化能力（P<0.01），極顯著升高了腸道HSP70和Caspase-3表達(dá)量

4、（P<0.01）；飼糧中添加LA使ADFI顯著增加（P<0.05）、ADG極顯著升高（P<0.01），使育肥豬腸道MnSOD極顯著升高（P<0.01），對(duì)血漿和腸道其它抗氧化指標(biāo)的影響均差異不顯著（P>0.05），使育肥豬腸道HSP70表達(dá)量顯著降低（P<0.05），Caspase-3表達(dá)量有降低的趨勢(shì)（P=0.052）；在應(yīng)激狀態(tài)下，飼糧中添加 LA使 ADFI和ADG極顯著增加（P<0.01），使育肥豬血漿SOD顯著升高（P<0.0

5、5），使育肥豬腸道SOD、MnSOD極顯著升高（P<0.01）。
　?。?）運(yùn)用試劑盒檢測(cè)血漿和腸道氧化損傷標(biāo)志物的含量以及空腸食糜消化酶的活性，蘇木精-伊紅（HE）染色后運(yùn)用圖像分析軟件觀察腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)并測(cè)定絨毛高度、隱窩深度，并計(jì)算絨毛高度/隱窩深度（V/C）比值，熒光定量PCR法檢測(cè)閉合蛋白（Occludin）和緊密結(jié)合蛋白（zonula occludens protein-1，ZO-1）轉(zhuǎn)錄水平的相對(duì)表達(dá)量。
　　試

6、驗(yàn)結(jié)果表明：Diquat極顯著升高了試豬血漿和腸道丙二醛（MDA）、蛋白質(zhì)羰基（PCO）和8-羥基鳥苷（8-OHdG）的含量（P<0.01），極顯著降低了十二指腸、空腸及回腸絨毛高度、隱窩深度（P<0.01），極顯著增大了十二指腸和空腸 V/ C（P<0.01），顯著增大了回腸 V/ C（P<0.05），極顯著降低了空腸Occludin和ZO-1 mRNA相對(duì)表達(dá)豐度（P<0.01），極顯著降低了空腸食糜中淀粉酶、胰蛋白酶以及脂肪酶的活

7、性（P<0.01）；飼糧中添加 LA對(duì)試豬血漿和腸道 MDA、 PCO和8-OHdG含量的影響均差異不顯著，對(duì)十二指腸、空腸和回腸的絨毛高度、隱窩深度以及 V/ C的影響均差異不顯著，對(duì)空腸 Occludin和ZO-1 mRNA相對(duì)表達(dá)豐度也無差異性影響，對(duì)空腸食糜中淀粉酶、胰蛋白酶以及脂肪酶活性的影響差異也均無顯著性；在應(yīng)激狀態(tài)下，飼糧中添加 LA使育肥豬血漿8-OHdG含量顯著降低（P<0.05），使育肥豬十二指腸絨毛高度、空腸絨毛

8、高度以及回腸隱窩深度顯著升高（P<0.05），空腸V/C顯著降低（P<0.05），回腸V/C極顯著降低（P<0.01），使育肥豬空腸 Occludin和 ZO-1 mRNA相對(duì)表達(dá)豐度顯著升高（P<0.05），使空腸食糜淀粉酶和胰蛋白酶的活性顯著提升（P<0.05）。
　　結(jié)論：Diquat導(dǎo)致了育肥豬嚴(yán)重的氧化應(yīng)激，并降低了育肥豬的生長(zhǎng)性能，造成了育肥豬腸道的細(xì)胞凋亡和腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的嚴(yán)重?fù)p傷并導(dǎo)致育肥豬消化功能的減弱，而飼糧中添