Ⅰ型鴨肝炎病毒抗體在產(chǎn)蛋鴨和雛鴨體內(nèi)的變化規(guī)律研究.pdf

1、Ⅰ型鴨病毒性鴨肝炎（duck hepatitis virus，DVH）是雛鴨的一種高度致死性的、傳播迅速的病毒性疾病。感染Ⅰ型鴨肝炎病毒（DHV-Ⅰ）的雛鴨發(fā)病率和死亡率很高，免疫接種是目前預(yù)防和控制鴨肝炎的主要手段。但是，DHV仍然時(shí)有發(fā)生，給養(yǎng)鴨業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。目前臨床上急需簡(jiǎn)便快捷的檢測(cè)鴨肝炎病毒抗體水平的檢測(cè)方法，作為DHV抗體監(jiān)測(cè)參考標(biāo)準(zhǔn)，指導(dǎo)養(yǎng)鴨生產(chǎn)。本研究旨在優(yōu)化本實(shí)驗(yàn)室已建立的DHV-Ⅰ抗體乳膠凝集試驗(yàn)方法，觀測(cè)

2、蛋鴨和雛鴨的DHV-Ⅰ抗體變化曲線。具體研究成果如下：
　　 1．采用差速超高速離心的方法純化病毒，用磷鎢酸負(fù)染電鏡觀察、鑒定，可見清晰完整的DHV-Ⅰ病毒粒子，有個(gè)別病毒的的核酸部分尚未降解，病毒粒子直徑約為20-40nm，核衣殼為對(duì)稱的二十面體。
　　 2．將經(jīng)過純化病毒滅活后用于致敏聚苯乙烯乳膠，優(yōu)化檢測(cè)DHV-Ⅰ抗體的LAT方法。血清抗體的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)為：用倍比稀釋的試驗(yàn)鴨血清與致敏后的乳膠進(jìn)行反應(yīng)，能夠在3-5分鐘

3、內(nèi)產(chǎn)生肉眼可見顆粒。
　　 3．用LAT方法觀察經(jīng)過四次鴨肝炎弱毒疫苗免疫的蛋鴨血清中的DHV-Ⅰ抗體，得到了高免蛋鴨隨時(shí)間變化的DHV-Ⅰ抗體變化曲線。研究發(fā)現(xiàn)第二次免疫后10天到第四次免疫后10天抗體水平較高，抗體效價(jià)維持在8以上，第四次免疫后20天抗體水平急劇下降至2左右。因此，如要獲得高免卵黃抗體，需對(duì)蛋鴨進(jìn)行多次免疫并適時(shí)檢測(cè)其抗體水平。
　　 4．用LAT方法監(jiān)測(cè)無母源抗體雛鴨的DHV-Ⅰ抗體變化，獲得了無母

4、源抗體雛鴨免疫后隨時(shí)間變化的DHV-Ⅰ抗體變化規(guī)律，研究發(fā)現(xiàn)，無母源抗體的雛鴨經(jīng)DHV-Ⅰ弱毒疫苗免疫后一個(gè)星期抗體水平達(dá)到最高，可達(dá)到7.1，之后略有下降，直到免疫后20天抗體效價(jià)維持在5左右，而注射卵黃抗體的雛鴨在注射抗體后的第3天抗體水平達(dá)到最高，可達(dá)7.7，免疫后7天抗體水平逐漸下降至5左右。因此，對(duì)人工主動(dòng)免疫和被動(dòng)免疫進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)DHV-Ⅰ弱毒疫苗免疫更適用于雛鴨早期免疫，而高免DHV-Ⅰ卵黃抗體則適用于DVH的治療和緊急預(yù)