雞腺胃型IBV的分離、鑒定及部分生物學特性研究.pdf

1、本研究首先從河北疑似患傳染性腺胃炎(infectious proventriculitis，IP)的雞群中分離到5株病毒，通過血清學鑒定、對新城疫病毒(Newcastle disease virus，NDV)的干擾試驗及動物試驗等方法，初步確定分離病毒為傳染性支氣管炎病毒(infectious bronchitis virus，IBV)。病毒接種的雞胚尿囊液無直接血凝活性，經1％胰酶處理后的尿囊液能凝集雞紅細胞，其血凝活性可被IBV陽性

2、血清所抑制。分離毒均可干擾NDV在SPF胚內的增殖。
　　 用RT-PCR的方法成功地擴增了部分分離毒的膜蛋白基因(M基因)全長片段，測序獲得了2個分離毒株M基因的全長核苷酸序列：其M基因均由681nt的核苷酸組成，均編碼226個氨基酸。將其與GenBank中注冊的19株IBV的M基因核苷酸序列及推導的氨基酸序列進行比較、系統(tǒng)進化關系分析發(fā)現(xiàn)：2株腺胃型IBV分離毒之間的核苷酸序列同源性為100％，其相應的氨基酸序列同源性為10

3、0％；分離毒與19個參考毒株M基因核苷酸序列同源性為86.8％～93.0％，其相應的氨基酸序列同源性為87.5％～96.1％；其中2株腺胃型IBV分離毒株與腎型IBV BJ株、腺胃型IBV QX株和腎型IBV CK/CH/LSHHI/03 株的親緣關系較近；而與IBV CU-T2株的親緣關系最遠。
　　 病毒性腺胃炎在實驗室復制不易成功，故本研究進行了雞腺胃型 IBV和NDV對雞的協(xié)同致病試驗，通過臨床癥狀觀察及病理學檢查和病毒

4、抗原檢測，揭示病毒性腺胃炎的發(fā)病原因和致病機制。試驗所用病毒為腺胃炎IBV分離毒和NDV強毒株。通過2種病毒的混合感染，成功復制出了腺胃炎病例。各感染組雞均見發(fā)病、死亡，其中a組、c組、d組的雛雞致死率都超過了自然病例病料造模組；c組雞的致死率最高，而b組雞的致死率最低。結果表明，NDV的加入明顯增強了病毒性腺胃炎的致死率。
　　 病理學檢查結果表明，各感染組的病變性質基本相似：在感染早期，腺胃病變較輕；而到后期，腺胃病變逐漸顯

5、著，表現(xiàn)為腺胃腫大，壁增厚，腺胃固有層和（或）腺體內出現(xiàn)數(shù)量不等的淋巴細胞增生，而對照組雞腺胃沒有病理變化，說明腺胃是病毒性腺胃炎的一個重要的靶器官。但4種感染方式致腺胃大體病變和顯微病變的程度均不如自然病例病料造模組顯著。這可能是IP病例腫大腺胃的形成還有其他因素參與。
　　 本試驗最早可從感染后第1d雞的腺胃黏膜上皮細胞及復管腺上皮細胞中檢測到病毒抗原，在感染后第35d的腺胃中仍能檢測到病毒抗原，表明該腺胃型IBV和NDV均