不同品種桉葉有效部位及抗菌藥效研究.pdf

1、為探討不同品種桉葉有機(jī)溶劑萃取有效部位的抗菌活性、主要品種的安全性、對(duì)三黃肉仔雞的生產(chǎn)性能、免疫及抗氧化性能的影響,為其在畜禽生產(chǎn)中的推廣應(yīng)用提供研究基礎(chǔ)。本研究采用抗菌中藥體外藥敏試驗(yàn)的平皿打洞法和試管兩倍稀釋法比較不同品種、不同提取工藝處理的DH201-2、GL-12、GL-16、DH32-29、GL-9、U6六個(gè)品種桉葉對(duì)蠟狀芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、多殺性巴氏桿菌和副溶血性弧菌四種常見致病菌的體外抑制效果；采用兩相溶劑萃取法分離

2、篩選GL-9、U6品種桉葉不同有機(jī)溶劑萃取組分及各組分藥液對(duì)埃希氏大腸桿菌、蠟狀芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、腸炎沙門氏菌、多殺性巴氏桿菌、副溶血性弧菌、溶藻弧菌、霍亂弧菌的抑制效果；采用圓形濾紙徑向?qū)游龇z測(cè)各組分成分；并對(duì)各抗菌活性成分進(jìn)行逐一提取及體外藥物敏感性測(cè)定；通過正交試驗(yàn)探討抗菌有效部位最優(yōu)提取條件及影響因素；按照急性毒性試驗(yàn)要求測(cè)定GL-9、U6桉葉的半數(shù)致死量。選用150只1日齡三黃肉仔雞,公母各半,隨機(jī)分為5組,每組30

3、只,Ⅰ～Ⅲ組分別在基礎(chǔ)日糧上添加0.25％、0.5％、1％的U6桉葉粉,Ⅳ組在日糧中添加0.5％的雙黃連粉,Ⅴ為空白對(duì)照組,飼喂基礎(chǔ)日糧。每周測(cè)定體重、采食量,計(jì)算平均日增重、日采食量、料重比等生長性能指標(biāo)；并測(cè)定酸性磷酸酶ACP和堿性磷酸酶AKP活力,超氧化物歧化酶SOD、谷胱甘肽過氧化物酶GSH-PX活性及丙二醛MDA含量。結(jié)果顯示:
　　 1.不同品種桉葉水煎液、水煎萃取液、醇提液、醇提萃取物對(duì)4種供試菌株的體外抑菌效果各

4、不相同,其中各提取液對(duì)多殺性巴氏桿菌的抑菌效果最強(qiáng),抑菌圈直徑介于22.73～36.79mm間,遠(yuǎn)大于對(duì)照中藥雙黃連,抑菌圈直徑為13.21mm。
　　 2.各不同品種桉葉水煎液、水煎萃取液、醇提液、醇提萃取液的抑菌圈直徑分別在11.34～36.79mm、6.36～33.97mm、9.69～33.56mm、6.60～32.66mm之間,水煎液抑菌效果強(qiáng)于醇提液的效果,其次為兩者的相應(yīng)萃取物。
　　 3.GL-9、U6品種

5、桉葉水煎液抑菌直徑分別為15.35～34.40 mm、14.71～32.24mm,優(yōu)于其他四個(gè)品種。
　　 4.GL-9、U6品種桉葉水煎液萃取下層組分對(duì)埃希氏大腸桿菌、蠟狀芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、腸炎沙門氏菌、多殺性巴氏桿菌、副溶血性弧菌、溶藻弧菌、霍亂弧菌8種供試菌株均表現(xiàn)較強(qiáng)敏感性(抑菌圈直徑在10～15mm間),與水煎原液的抑菌效果相當(dāng),乙酸乙酯和正丁醇組分抗菌效果相對(duì)較弱,氯仿和石油醚組分均不表現(xiàn)抑菌效果?？梢奊L-

6、9、U6桉葉抗菌有效部位主要存在于萃取下層組分中。
　　 5.經(jīng)成分檢測(cè)發(fā)現(xiàn),GL-9、U6桉葉水煎液、乙酸乙酯萃取層、正丁醇萃取層含多種有效成分,分別為酚類、甾體、黃酮類、萜類、皂甙、氨基酸化合物,對(duì)這些活性成分進(jìn)行逐一提取,結(jié)果顯示所用提取方法均不能使其有效分離,且抑菌效果不及GL-9、U6桉葉水煎液,酚類和黃酮類化合物抗菌譜與水煎液表現(xiàn)一致。
　　 6.GL-9、U6桉葉不同提取條件試驗(yàn)結(jié)果顯示對(duì)GL-9桉葉抗菌效

7、果影響較大的因素為提取時(shí)間和提取溫度,對(duì)U6桉葉影響較大的為提取時(shí)間。
　　 7.GL-9桉葉的LD50為47.3696 g/kg,U6桉葉的LD50為68.7702 g/kg。
　　 8.日糧中添加U6桉葉粉對(duì)三黃肉仔雞生產(chǎn)性能和非特異性免疫無明顯影響；日糧中添加量0.5％時(shí)可顯著提高谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)活性,維持MDA含量較低水平,且對(duì)超氧化物歧化酶(SOD)無影響。
　　 可見,不同品種桉葉對(duì)

8、常見致病菌有體外抑菌作用,不同提取方式對(duì)其抑菌活性影響不大,水煎液抑菌效果優(yōu)于醇提液；GL-9、U6品種桉葉的抑菌效果優(yōu)于其他四個(gè)品種。GL-9、U6品種桉葉抗菌有效部位主要為萃取下層藥液組分,活性物質(zhì)主要為黃酮類和酚類化合物,對(duì)GL-9桉葉抗菌有效成分提取影響較大的因素為提取溫度和提取時(shí)間,對(duì)U6桉葉影響大的因素為提取時(shí)間。GL-9桉葉為小毒,U6桉葉為無毒。U6桉葉粉對(duì)三黃肉仔雞生產(chǎn)性能和非特異性免疫無明顯影響,但可提高其抗氧化能力