基于譜效結合對雞血藤不同部位藥效成分的研究.pdf

1、目的:
　　“辨狀論質”是根據(jù)中藥材外觀性狀所表現(xiàn)出來的特征，判斷中藥的真?zhèn)蝺?yōu)劣，是中藥經(jīng)驗鑒別的精髓?！氨鏍钫撡|”的實質是中藥的外觀性狀與內在質量具有相關性。中藥外觀性狀不僅是藥材的外形特點，也是藥材內部組織結構及其內含化學成分的外在表現(xiàn)。雞血藤主要由木質部及韌皮部組成，木質部淡紅色或棕色;韌皮部有樹脂狀分泌物呈紅棕色至黑棕色，與木質部相同排列呈數(shù)個同心或偏心性圓環(huán)。傳統(tǒng)經(jīng)驗對中藥雞血藤的質量評價認為含樹脂的偏心性環(huán)紋數(shù)需3～8

2、圈以上，即偏心性環(huán)紋3圈以上，但雞血藤的這種“辨狀論質”是否有科學依據(jù)？其藥效成分是什么？木質部與韌皮部的化學成分有何異同？
　　本研究擬利用譜效結合的分析方法，找出雞血藤中的藥效成分，并進一步對雞血藤中的木質部及韌皮部分別進行組織化學成分的分析，以明確藥效成分兩者間的含量分布情況;對不同圈數(shù)的雞血藤黃酮部位的藥效成分進行含量測定，以建立藥材外形特征與內在質量的相關性。
　　方法:
　　1.雞血藤總黃酮、木質部及韌皮部

3、黃酮部位化學成分定性分析
　　采用LC-ESI-MS法對雞血藤總黃酮、木質部及韌皮部黃酮部位進行定性分析，通過黃酮類化合物的裂解規(guī)律，綜合保留時間、MS數(shù)據(jù)及參考文獻報道數(shù)據(jù)，對各個色譜峰進行結構鑒定，并對木質部、韌皮部黃酮部位化學成分進行對比分析。
　　2.雞血藤黃酮部位對復合血虛模型小鼠補血作用研究
　　建立小鼠復合血虛模型，給予高、中、低劑量雞血藤黃酮部位藥物治療，測定小鼠外周血像血細胞及制作脾、腎臟病理切片，觀

4、察所分離的雞血藤黃酮部位對復合血虛模型小鼠的補血作用及脾、腎臟的保護作用。
　　3.雞血藤黃酮部位譜效相關分析
　　測定多個批次雞血藤黃酮部位HPLC圖譜，分別采用灰色關聯(lián)分析和皮爾遜相關分析方法，分析HPLC特征峰所代表的化學成分對補血作用的關聯(lián)度和相關性，以找出其補血作用的藥效成分。
　　4.雞血藤木質部、韌皮部黃酮部位的HPLC圖譜對比研究及藥效成分在雞血藤不同組織中含量分布差異的研究
　　4.1木質部、韌

5、皮部黃酮部位的藥效成分分布規(guī)律研究
　　取多個南領藥材種植基地雞血藤藥材，對木質部、韌皮部黃酮部位中藥效成分進行含量測定，并比較藥效成分在兩者間的含量分布規(guī)律。
　　4.2不同圈數(shù)雞血藤黃酮部位的藥效成分分布規(guī)律研究
　　篩選不同圈數(shù)的雞血藤切片，對黃酮部位中藥效成分進行含量測定，并分析藥效成分在不同圈數(shù)雞血藤中的含量分布差異。
　　結果:
　　1.雞血藤木質部及韌皮部黃酮部位化學成分定性分析
　　建

6、立了一個LC-ESI-MS對雞血藤黃酮部位化學成分進行定性分析的方法，從雞血藤黃酮部位中分離23個化合物，共推斷出黃酮類化合物10個，并對10個化合物質譜裂解方式進行解析。韌皮部中所檢測到的21個化合物在木質部中均可以檢測到，但是各個成分的離子峰相對強度在兩個部位中不相同，說明其在兩者間的化學成分與含量有一定的差別。
　　2.雞血藤黃酮部位對復合血虛模型小鼠補血作用研究
　　給予雞血藤黃酮部位高、中、低劑量后，模型小鼠RBC

7、、HGB、HCT數(shù)量均上升，且與模型組比較具有極顯著差異(P＜0.01)。HE病理切片結果表明，與空白組比較，模型組發(fā)生與造血相關臟器的炎癥病變，給予雞血藤黃酮部位藥物治療后，脾、腎臟的炎癥及組織損傷情況有所改善。
　　3.雞血藤黃酮部位對復合血虛模型小鼠補血作用及其譜效相關分析
　　選取有較大關聯(lián)性或相關性較好的成分為雞血藤黃酮部位補血作用的藥效成分。雞血藤黃酮部位中抑制復合血虛模型小鼠外周血像中RBC、HGB、HCT含量

8、降低的藥效成分主要是1、2（兒茶素）、4（表兒茶素）、5（大豆苷）、8、6、10(芒柄花昔)、12(8-甲雷杜辛-7β-葡萄糖苷)、14(芒柄花素)號峰，雞血藤黃酮部位發(fā)揮補血藥效的是其化學成分群的共同作用。
　　4.雞血藤藥效成分在不同組織中含量分布差異
　　4.1木質部、韌皮部黃酮部位的藥效成分分布規(guī)律研究
　　結果顯示，5種成分在木質部中的含量高于韌皮部中的含量，特別是芒柄花素、芒柄花苷、大豆苷;兒茶素、表兒茶素

9、在木質部、韌皮部中含量雖存在差異，但在兩者之間的含量差異相對較小。
　　4.2不同圈數(shù)雞血藤黃酮部位的藥效成分的分布規(guī)律研究
　　2圈～5圈的雞血藤黃酮部位中，5種藥效成分含量與藥材切片的圈數(shù)均呈正相關性。圈數(shù)越多，藥效成分的含量越高。
　　結論:
　　本實驗對雞血藤黃酮部位化學成分進行LC-ESI-MS分離、鑒定，較為全面地分析雞血藤黃酮部位的化學成分組成;對所分離雞血藤黃酮部位進行藥效實驗，證實其具有明顯的補