不結球白菜雄性不育新種質P70-203的研究及雜交種指紋圖譜鑒定.pdf

1、不結球白菜（Brassica capmestris ssp.chinensis Makino）又稱小白菜、青菜，北方稱油菜，起源于中國，是十字花科蕓薹種（Brassica capmestris L.）的1個亞種。近年來，不僅北方大量引種栽培，東南亞、日本、美國及歐洲一些國家也廣泛引種，已逐漸成為世界性的蔬菜。本研究一方面對不結球白菜新種質細胞質雄性不育系P70-203與其回交父本的植物學特性進行比較分析，另一方面用分子標記技術對不結球白

2、菜雄性不育系P70-203細胞質類型進行鑒定，及雜種一代及進行了純度鑒定。加快不結球白菜育種進程，為其進一步應用提供了分子依據。
　　 1.不結球白菜細胞質雄性不育系P70-203是本所在育種過程中發(fā)現的半不育株，后經回交選育而成。本研究對其植物學特性進行觀察測定，結果表明：不育系P70-203生長整齊，植株健壯，幼苗生長正常，不表現黃化，且不育性穩(wěn)定，不育率不育度均為100％；其花朵開放正常、雌蕊功能健全、雄蕊退化、無花藥；蜜

3、腺發(fā)育良好、花蜜多、正常能吸引蜜蜂等昆蟲正常采蜜傳粉；具有優(yōu)良的植物學性狀。以上研究為配制更多優(yōu)良雜種一代，推廣不育系P70-203的應用范圍奠定基礎。
　　 2.根據OguraCMS、PolimaCMS的不育性狀相關的線粒體基因序列設計特異引物，對不結球白菜雄性不育系新種質P70-203及其保持系P60-27-1進行PCR分析。研究結果表明，Polima引物P3/P4，P5/P6在不育系與可育系中均無擴增條帶；Ogura引物P

4、1/P2在不育系中擴增出750bp的特異片段，但可育系中無擴增條帶。將擴增的特異條帶回收并測序，將得到的測序結果在NCBI中進行Blastn同源性比較，結果與青花菜Ogura細胞質雄性不育同源性等均達到99％。從分子角度初步推測：該雄性不育系新種質P70-203具有Ogura細胞質。
　　 3.采用RAPD、SRAP、SSR三種標記技術，對不結球白菜雜交一代08-1-61及雙親進行指紋圖譜鑒定。對160個RAPD引物、132對S

5、RAP引物篩選、87對SSR引物篩選結果表明：1條RAPD引物、1對SRAP引物在雜交種擴增雙親的互補特征帶，有效地鑒別雙親和雜種F1；2條RAPD引物、1對SRAP引物為偏母型；1條RAPD與1對SRAP引物為偏父型；未篩選出呈多態(tài)性的SSR引物。三種標記比較分析，RAPD標記擴增圖譜條帶較為豐富，其成本低，操作簡便，但重復性較差；SSR標記重復性最好，但多態(tài)性最低，成本高；SRAP標記擴增圖譜條帶最豐富，多態(tài)性高，重復性好，是種子指