不結(jié)球白菜Ogura細(xì)胞質(zhì)雄性不育系的細(xì)胞學(xué)、配合力和分子標(biāo)記研究.pdf

1、以不結(jié)球白菜（Brassica rapa ssp.chinensis）胞質(zhì)雄性不育系S2108A和Y3611A及其保持系S2108B和Y3611B為試驗(yàn)材料，對花器官和花藥進(jìn)行形態(tài)及細(xì)胞學(xué)觀察，以闡明其敗育的時(shí)期、方式；對其進(jìn)行配合力分析及雜種優(yōu)勢差異性比較，目的是闡明不育系組合和保持系組合之間是否存在雜種優(yōu)勢差異及配合力和遺傳力差異；對兩系基因組DNA進(jìn)行AFLP分析，旨在篩選不育基因的分子標(biāo)記。主要研究結(jié)果如下：
　　 1不

2、結(jié)球白菜Ogura細(xì)胞質(zhì)雄性不育花器官形態(tài)及敗育細(xì)胞學(xué)的研究
　　 兩套不育系和保持系之間在花器官的多個(gè)性狀上差異極顯著，而兩個(gè)不育系S2108A和Y3611A之間除花蕾大小、雌蕊長和花瓣長有差異外，其它均不顯著，說明從不同不育源轉(zhuǎn)育來的兩個(gè)不育系在花器官外形上差異不大；兩個(gè)不育系花藥敗育表現(xiàn)均起始于四分體時(shí)期，且由于絨氈層的液泡化和徑向膨大，擠壓四分體小孢子導(dǎo)致敗育，表明敗育與絨氈層的不正常發(fā)育有關(guān)。此外，與Y3611A不同，

3、在不育系S2108A中還存在另一種敗育形式，絨氈層細(xì)胞壁發(fā)生融合，成為緊貼藥室壁的類似于變形型絨氈層的周原質(zhì)團(tuán)，部分細(xì)胞質(zhì)流入藥室腔，包裹粘連四分體小孢子，成為染色很深的不連續(xù)團(tuán)塊狀物，花藥敗育；兩不育系花藥發(fā)育存在花粉囊數(shù)目的變異，且花粉囊發(fā)育時(shí)期不同步，個(gè)別花粉囊較正常花粉囊發(fā)育推遲，在不育系Y3611A中還有巨型花粉囊的現(xiàn)象。
　　 2不結(jié)球白菜Ogura細(xì)胞質(zhì)雄性不育的配合力及雜種優(yōu)勢分析
　　 以不結(jié)球白菜雄性

4、不育系S2108A（B1）和Y3611A（B3）及其相應(yīng)的保持系S2108B（B2）和Y3611B（B4）為母本，以5個(gè)高代自交系（A1～A5）為父本，配制雜交組合，測定了不育系和保持系所配雜交組合在株高、開展度、最大葉片的葉長和葉寬、葉柄長、葉柄寬、葉片數(shù)和單株重8個(gè)性狀方面的雜種優(yōu)勢、特殊配合力效應(yīng)值，以及9個(gè)親本材料的一般配合力效應(yīng)值。結(jié)果表明：不結(jié)球白菜主要園藝性狀的雜種優(yōu)勢（正向或負(fù)向）都較明顯；雜種優(yōu)勢效應(yīng)值在葉片長和葉柄長

5、兩性狀上，沒有因母本不同而表現(xiàn)明顯的趨勢性差異；在株高等其余的6個(gè)性狀上，保持系所配組合具有較大的正效應(yīng)值，而不育系組合的雜種優(yōu)勢負(fù)效應(yīng)值較大；葉片數(shù)、葉柄寬和單株重3個(gè)指標(biāo)在多個(gè)組合中具有雜種優(yōu)勢負(fù)效應(yīng)，葉柄長和株高兩性狀在多個(gè)組合中都具有正超顯性效應(yīng)值；母本B1、B2一般配合力效應(yīng)值以負(fù)效應(yīng)為主，B3、B4在多個(gè)性狀上表現(xiàn)正效應(yīng)。
　　 3不結(jié)球白菜Ogura細(xì)胞質(zhì)雄性不育基因組的AFLP分析
　　 采AFLP（Am

6、plified fragment length polymorphism）技術(shù)對不結(jié)球白菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育系Y3611A及其相應(yīng)的保持系Y3611B基因組DNA進(jìn)行多態(tài)性比較，篩選了64對AFLP選擇性引物Pst I-NNN+Mse I-NNN組合，有61對引物組合在兩系間擴(kuò)增出5185條帶。使用選擇性引物組合AAG/CGC、AAC/GAC和ACA/GAC在不育系材料中擴(kuò)增到3個(gè)特異片斷，對特異片段進(jìn)行克隆、測序，其序列全長分別為187b