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文檔簡介
1、本論文以紹興鴨為研究對象,重點(diǎn)研究了日糧中添加不同種類脂肪酸(fattyacids)對其生產(chǎn)性能、血清指標(biāo)、肉質(zhì)pH及脂肪酸組成,蛋黃脂肪酸組成的影響;探討了日糧中不同種類脂肪酸對脂質(zhì)代謝相關(guān)基因表達(dá)水平上的影響;根據(jù)鴨原代肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞分離培養(yǎng)方法,研究了日糧多不飽和脂肪酸單體對體外肝細(xì)胞增殖及細(xì)胞周期的影響,并直接研究亞油酸(LA)、二十碳五烯酸(EPA)單體對肝細(xì)胞脂類代謝基因的影響,為研究紹興鴨脂肪代謝和調(diào)控機(jī)理提供依據(jù)。
2、 1.日糧不同種類脂肪酸對紹興鴨生產(chǎn)性能、血清指標(biāo)的影響
為了研究日糧不同種類的脂肪酸對紹興鴨生產(chǎn)性能、血清指標(biāo)的影響,本試驗(yàn)將264只17周齡健康、體重相近的蛋鴨隨機(jī)分成4組,每組66只(含3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)22只)進(jìn)行飼養(yǎng)試驗(yàn)。對照組飼喂基礎(chǔ)日糧,試驗(yàn)組分為魚油組(含3%魚油),葵花籽油組(含2.5%葵花籽油),高脂組(含3%棕櫚油+2%牛油)。結(jié)果表明:除了魚油組能夠提高產(chǎn)蛋率,其他各組都不能顯著改變紹興鴨的生產(chǎn)
3、性能;與對照組相比,魚油組顯著降低血清TG和TC含量(P<0.05),SOD活性在各實(shí)驗(yàn)組都有不同程度的升高,高脂組MDA含量顯著高于其他各組(P<0.05),肝組織切片觀察發(fā)現(xiàn),高脂組飼料導(dǎo)致紹興鴨肝細(xì)胞內(nèi)的脂肪富集。
2.日糧不同種類脂肪酸對紹興鴨肌肉脂肪酸組成和蛋品質(zhì)的影響
為了研究日糧不同種類的脂肪酸對紹興鴨肉質(zhì)pH、肌肉脂肪沉積及脂肪酸組成的影響。本試驗(yàn)將264只17周齡健康、體重相近的蛋鴨隨機(jī)分成
4、4組,每組66只(含3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)22只)進(jìn)行飼養(yǎng)試驗(yàn)。對照組飼喂基礎(chǔ)日糧,試驗(yàn)組分為魚油組(含3%魚油),葵花籽油組(含2.5%葵花籽油),高脂組(含3%棕櫚油+2%牛油)。結(jié)果表明:pH值在48h以內(nèi)逐漸降低,pH值從6.55降低到5.5。隨著飼料中脂肪含量的增加,肌肉中的脂肪沉積量也增加,兩者存在正相關(guān),肌肉和蛋黃中的n-3PUFA總量在魚油組最高,而n-6PUFA總量在葵花籽油含量最高,脂肪酸含量的變化充分反映了日糧的脂肪酸
5、組成。魚油組顯著降低了肌肉和蛋黃中n-6/n-3 PUFA的比值(P<0.01),在肌肉中n-3 PUFA主要以沉積EPA為主,而在蛋黃中主要以沉積DHA為主。
3.日糧不同種類脂肪酸對脂類代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響
本試驗(yàn)利用Q-PCR技術(shù)研究不同種類脂肪酸對紹興鴨脂類代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響。結(jié)果表明:與對照組相比,添加脂肪酸后ACC、FAS、SR-1、SCD等脂肪合成相關(guān)基因的mRNA表達(dá)水平大都顯著降低(p
6、<0.05),除了高脂組SCD基因的表達(dá)量沒有顯著變化;脂肪氧化基因PPAR-α和ACOX的mRNA表達(dá)水平則顯著升高(p<0.05);脂類轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)基因L-FABP mRNA表達(dá)水平增加(p<0.05),ApoB mRNA表達(dá)水平L-FABP基因變化趨勢則相反,再添加脂肪酸后mRNA表達(dá)水平降低。
4.亞油酸(LA)、二十碳五烯酸(EPA)對紹興鴨肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞增殖的影響及脂質(zhì)相關(guān)基因表達(dá)影響
大量研究發(fā)現(xiàn)LA和
7、EPA影響哺乳動物細(xì)胞增殖和脂類代謝基因的表達(dá),但是在水禽中少有報(bào)道,本實(shí)驗(yàn)在鴨肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基內(nèi)加入LA和EPA單體,結(jié)果發(fā)現(xiàn):LA和EPA單體在0-100μM的范圍內(nèi)可以促進(jìn)肝細(xì)胞的增殖并且存在一定的劑量依賴性關(guān)系,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期發(fā)現(xiàn),100μM LA和EPA促進(jìn)了G0/G1到S期的轉(zhuǎn)化,在LA組S期的細(xì)胞含量從7.8%增加到11.4%,而在EPA組S期的細(xì)胞含量從7.8%增加到10.5%。PPAR-α、ACOX、LPL、L
8、-FABP等脂類氧化相關(guān)基因的表達(dá)量也發(fā)生了變化,其中PPAR-α、ACOX、LPL基因在添加LA和EPA后顯著增加(P<0.05),但是L-FABP基因的表達(dá)量卻未發(fā)生變化。對于脂類合成相關(guān)基因SR-1、FAS、SCD基因的表達(dá)量顯著升高(P<0.05),ACC基因表達(dá)量在加入LA和EPA并未受到顯著影響。
5.紫蘇籽提取物對紹興鴨生產(chǎn)性能、血清生化指標(biāo)及脂類代謝相關(guān)基因的影響
紫蘇籽種子油中含有大量的不飽
9、和脂肪酸本實(shí)驗(yàn)選擇產(chǎn)蛋高峰期230只青殼Ⅱ號,隨機(jī)分為2個(gè)處理,每組5個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)23只。試驗(yàn)全期42d??瞻捉M喂給基礎(chǔ)日糧(不添加任何藥物),試驗(yàn)組在基礎(chǔ)日糧中添加200mg/kg紫蘇籽提取物。每天記錄產(chǎn)蛋率,蛋重,料蛋比,于42日后每組剖殺3只試驗(yàn)鴨,靜脈采血,分離血清,測定血清生化指標(biāo)。結(jié)果表明:添加200mg/kg紫蘇籽提取物可顯著降低血清TC含量,提高血清HDL含量和產(chǎn)蛋率(P<0.05),另外添加200mg/kg紫蘇籽提
10、取物在一定程度上可降低血清中TG含量(P>0.05)。添加200mg/kg紫蘇籽提取物后脂類合成相關(guān)基因SREBP-1、ACC、SCD、FAS、ApoB的表達(dá)量顯著降低,而脂類氧化相關(guān)基因PPARa和ACOX基因mRNA的表達(dá)量顯著升高(P<0.05),同樣L-FABP基因的表達(dá)量也升高。
綜上所述,飼養(yǎng)試驗(yàn)研究表明,日糧不同種類的脂肪酸對紹興鴨生產(chǎn)性能、血清指標(biāo)的產(chǎn)生不同程度的影響。肌肉和蛋黃中的脂肪酸含量的變化充分反映
11、了日糧的脂肪酸組成,其中n-3PUFA總量在魚油組最高,而n-6PUFA總量在葵花籽油含量最高。添加脂肪酸后ACC、FAS等脂肪合成相關(guān)基因的mRNA表達(dá)水平顯著降低;脂肪氧化基因PPAR-α和ACOX的mRNA表達(dá)水平升高。LA和EPA單體在0-100μM的范圍內(nèi)可以促進(jìn)鴨肝實(shí)質(zhì)肝細(xì)胞的增殖并且存在一定的劑量依賴性關(guān)系,并且促進(jìn)了脂類氧化合成相關(guān)基因的表達(dá)。添加200mg/kg紫蘇籽提取物可顯著降低紹興鴨血清TC含量,提高血清HDL含
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