生防菌水劑和凍干粉劑的制備及保存技術(shù)研究.pdf

1、近年來(lái)，越來(lái)越多不同種屬的生防細(xì)菌在生物防治上發(fā)揮巨大的開(kāi)發(fā)潛力。但由于生防菌的保存受到各種環(huán)境因素的影響，給生物源農(nóng)藥的實(shí)際應(yīng)用帶來(lái)很大的不便。本文選擇了由本實(shí)驗(yàn)室分離篩選得到的幾株分別來(lái)自芽孢桿菌屬，假單胞菌屬和泛菌屬的生防菌為研究對(duì)象，對(duì)影響利用冷凍干燥方法制備不同屬生防菌粉劑存活率的相關(guān)因素進(jìn)行了研究，同時(shí)還對(duì)生防菌水劑使用和保存中的活菌濃度進(jìn)行了探討。
　　本文首先研究了在冷凍干燥方法中不同保護(hù)劑和再水化劑對(duì)生防菌成團(tuán)泛

2、菌菌株YT11保護(hù)作用的差異，以及不同保存溫度對(duì)YT11貯藏穩(wěn)定性和生防活力的影響，探討冷凍干燥方法制備生防菌粉劑的可行性。結(jié)果表明，5％蔗糖是最佳的保護(hù)劑，冷凍干燥后可以使YT11菌株在室溫25℃條件下存活率達(dá)90％以上。以5％蔗糖作保護(hù)劑時(shí)，5％脫脂奶粉為最佳的再水化劑，室溫25℃條件下復(fù)蘇再水化使YT11菌株復(fù)蘇率達(dá)100％。進(jìn)一步的貯藏試驗(yàn)結(jié)果表明，4℃貯存的冷凍干燥粉劑的活菌存活率顯著高于22℃下保存的活菌存活率。對(duì)保存24周

3、后的菌劑進(jìn)行溫室生防試驗(yàn)，結(jié)果顯示，4℃和22℃條件下保存的菌劑對(duì)番茄青枯病的防效分別達(dá)到71.57％和50.98％。證明了冷凍干燥方法可以制備有效生防菌YT11粉劑。
　　為了進(jìn)一步研究冷凍干燥方法對(duì)制備其他不同屬生防菌劑的可行性，本文又研究比較了不同冷凍干燥保護(hù)劑和再水化劑對(duì)生防菌株芽孢桿菌AR156、假單胞菌2R37和泛菌2Re40的保護(hù)作用及復(fù)蘇能力的差異，并對(duì)后期在室溫貯藏下各菌株冷凍干燥粉劑的存活穩(wěn)定性進(jìn)行了檢測(cè)。試驗(yàn)

4、結(jié)果顯示，不同的細(xì)菌與不同的保護(hù)劑之間存在一定的選擇配伍性。5％纖維二糖和5％D-半乳糖在冷凍干燥中分別對(duì)2R37和2Re40表現(xiàn)最好的保護(hù)效果，冷凍干燥后室溫25℃條件下檢測(cè)細(xì)菌存活率分別為98.01％和54.31％。AR156在保護(hù)劑5％蔗糖的作用下存活率接近100％。用10％的脫脂奶粉作再水化劑，室溫下水化生防菌粉劑可以使三個(gè)生防菌復(fù)蘇率達(dá)到最佳水平。在后期室溫保存中(25℃)，AR156冷凍干燥粉劑保存活力明顯好于2Re40和2

5、R37，保存12個(gè)月AR156存活率保持在50％以上，而2R37和2Re40粉劑活力只能維持3個(gè)月。
　　目前國(guó)內(nèi)的生防菌劑型中水劑還是最廣泛的劑型之一，影響生防菌水劑貨架期和生防效果的因素中，活菌濃度是最主要和基本的，因此本文還研究了不同濃度的3株生防菌芽孢桿菌AR156、泛菌YT11和假單胞菌ABc9對(duì)番茄青枯病的溫室防效測(cè)定，同時(shí)對(duì)保存36周后的水劑進(jìn)行了活性跟蹤和防效評(píng)價(jià)，研究了三株來(lái)自不同屬的生防細(xì)菌水劑生防作用的發(fā)揮及

6、水劑保存所需的最佳活菌濃度。試驗(yàn)結(jié)果表明，生防菌的防效與其使用的濃度在106-109CFU/ml范圍內(nèi)為正相關(guān)，使用的濃度高于109CFU/ml時(shí)，生防效果反而下降;當(dāng)AR156濃度為108CFU/ml，YT11濃度為108CFU/ml，ABe9濃度為109CFU/ml時(shí)對(duì)番茄青枯病的生防效果最佳，分別為63.06％，49.55％，52.25％。起始保存濃度越高生防菌存活率下降越快。AR156和ABe9的最佳起始保存濃度為109CFU/

7、ml，YT11的最佳起始保存濃度為108CFU/ml。
　　綜上所述，實(shí)驗(yàn)表明了以5％蔗糖為保護(hù)劑、5％脫脂奶粉為再水化劑制備成團(tuán)泛菌菌株YT11冷凍干燥粉劑，并于4℃貯存，可以成功制備保持有效生防效果的YT11生防菌劑。本研究還比較了來(lái)自三個(gè)不同屬的生防菌使用冷凍干燥方法制備粉劑對(duì)其存活率的影響，進(jìn)一步表明不同屬生防菌在對(duì)冷凍干燥的敏感性，以及使用的保護(hù)劑和再水化劑都存在一定的差異。本文還說(shuō)明生防菌的生防效果與使用的活菌濃度并不