山羊Myf5基因的克隆與組織表達(dá).pdf

1、本研究以培育品種南江黃羊?yàn)樵囼?yàn)材料,以其他物種Myf5基因序列為基礎(chǔ),克隆出南江黃羊生肌決定因子5(Myf5)基因的全編碼區(qū)序列;采用SYBR-greenⅠ定量PCR技術(shù)研究了南江黃羊在生后0d、15d、30d、60d、90d、120d等6個(gè)時(shí)間點(diǎn)_Myf5基因性別之間表達(dá)差異、組織表達(dá)差異和同一組織在不同時(shí)間點(diǎn)的發(fā)育性變化。結(jié)果表明:
　　 (1)克隆得到南江黃羊Myf5基因的CDS全序列,長度為768bp,編碼255個(gè)氨基酸

2、,A、G、T和C四種堿基含量分別為23.44％、26.95％、19.01％和30.60％。南江黃羊Myf5基因的核苷酸、氨基酸與牛、人、小鼠的一致性分別為98％、91％、86％。
　　 (2)生物信息學(xué)分析表明Myf5基因的氨基酸序列整個(gè)序列中具有明顯的親水性區(qū)域。翻譯后修飾主要為磷酸化,二級(jí)結(jié)構(gòu)以無規(guī)卷曲為主,其次為α-螺旋,β-折疊最少。
　　 (3)在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的各個(gè)組織中都檢測到Myf5基因的表達(dá),但相對(duì)表達(dá)量存

3、在一定的差異。在母羊中,0d時(shí),背最長肌的表達(dá)量最高,15d、30d和90d時(shí)臀中肌的表達(dá)量最高,60d時(shí),臀股二頭的表達(dá)量最高,120d時(shí),臂三頭肌的表達(dá)量最高;在公羊中,除90d時(shí)背最長肌的表達(dá)量最高外,其他時(shí)間點(diǎn)都是臀中肌的表達(dá)量最高。
　　 (4)Myf5基因在南江黃羊各肌肉組織中都有表達(dá)的優(yōu)勢時(shí)間點(diǎn),在肌肉中的表達(dá)規(guī)律都表現(xiàn)先上調(diào)后下降的趨勢。在公羊中,除臀中肌外,其他各組織Myf5基因表達(dá)量達(dá)到最高點(diǎn)的時(shí)間均早于母羊