球孢白僵菌對家蠶安全性研究.pdf

1、家蠶是世界上最重要的資源昆蟲之一，而由球孢白僵菌引起的家蠶白僵病是影響蠶業(yè)生產的重要因素之一。球孢白僵菌是一種最常見的蟲生真菌，因其寄主范圍廣范，易于大量生產，現(xiàn)已開發(fā)為真菌殺蟲劑在害蟲生物防治中廣泛使用。由于人們一直擔心大面積使用（特別是在桑蠶養(yǎng)殖區(qū)）白僵菌防治害蟲會對蠶業(yè)帶來危害，因此查明家蠶白僵病來源和傳播途徑對于控制蠶病流行至關重要。
　　 本研究對皖西南潛山縣和皖南涇縣的病蠶、蠶室及其周邊桑園、農田及松林進行了調查采樣

2、。應用ISSR分子標記分別對采集的126株球孢白僵菌進行聚類分析和主坐標分析，并且對它們及用于防治松毛蟲的菌株進行種群遺傳結構分析，同時還將兩地采集的家蠶和松毛蟲分離株對家蠶的毒力進行生物測定。
　　 結果：表明，兩個地區(qū)的球孢白僵菌種群均為異質性明顯的種群。
　　 對于在潛山縣蠶區(qū)采集的77株白僵菌菌株的遺傳多樣性研究結果發(fā)現(xiàn)：篩選出來的10個ISSR引物共擴增出99條帶，多態(tài)位點百分率高達87.9％。UPGMA聚類分

3、析表明，該白僵菌種群為異質性明顯的種群，77株白僵菌可分為6個類群；主坐標分析將家蠶分離株所在的第二類群進一步劃分為兩個亞群，其中僅主病源第Ⅱ-1類群和次病源第Ⅳ類群引起家蠶的地方性白僵病；遺傳距離和遺傳分化分析也表現(xiàn)出相同結果。用于防治松毛蟲的菌株及在附近松毛蟲種群中自然流行的土著菌株與Ⅱ-1和Ⅳ的親緣關系較遠，它們不是家蠶白僵病的病源。另外，在潛山蠶室附近引起螳螂類群流行病的類群也與蠶病類群無關。
　　 對于在涇縣章渡蠶區(qū)采

4、集的49株白僵菌菌株的遺傳多樣性分析表明，10個ISSR引物共擴增出96條帶，多態(tài)位點百分率達70.8％。UPGMA聚類分析和主坐標分析結果表明，該白僵菌種群也是異質性明顯的種群，49株白僵菌可嚴格按照寄主分為三大類群，各類群體內菌株的遺傳相似性較高，而各類群之間遺傳相似性很低。遺傳距離和遺傳分化分析表明，家蠶分離株亞種群與松毛蟲亞種群以及附近其他僵蟲亞種群相對獨立。兩者間遺傳距離較遠，基因流較小，產生高度的遺傳分化，說明它們不僅與當時

5、的家蠶白僵病無關，而且也不會與家蠶病原株發(fā)生基因交換以致引起寄主范圍的變化或對家蠶致病性的增強。
　　 采用兩種方法對家蠶進行生物測定的結果表明，家蠶分離株處理蠶體后對家蠶14d的累積死亡率達到了87.5％-100％，而松毛蟲分離株處理蠶體后對家蠶14d的累積死亡率僅為12.5％-27.5％。使用松毛蟲分離株使家蠶死亡25％的LC25、LD25和LT50分別為使用家蠶分離株使家蠶死亡75％的LC75、LD75和LT75的1327

6、、1378和1.5倍。這進一步說明在蠶區(qū)使用由松毛蟲分離株研制的白僵菌殺蟲劑防治松毛蟲對蠶業(yè)是安全的。
　　 兩個地區(qū)家蠶白僵病病源比較分析表明，兩個白僵菌種群皆為異質種群，但潛山地區(qū)蠶病亞種群是多源的，而涇縣地區(qū)蠶病亞種群是單源的。涇縣蠶病亞種群和潛山的蠶病優(yōu)勢亞種群具有典型的地方性：只在蠶室內循環(huán)侵染家蠶，引起其低頻常在性的地方性白僵病；而潛山的非優(yōu)勢亞種群可以在蠶室外的某些轉主寄主中傳播。在潛山和涇縣當?shù)亓餍械耐林捉┚?/p>

7、株和兩個白僵菌生產菌株以及在周圍環(huán)境中流行的螳螂分離株對桑蠶業(yè)均是安全的。
　　 兩個地區(qū)白僵菌種群的遺傳結構分析表明，潛山白僵菌種群以及家蠶白僵病病源亞種群的遺傳異質性均高于涇縣章渡種群。潛山種群，尤其是家蠶白僵病病源亞種群的基因流弱、遺傳分化大，變異主要由各亞種群間的變異以及蠶病亞種群的各小群體間的變異造成；而涇縣的種群和亞種群基因流強、遺傳分化小，變異主要由亞種群內的變異以及蠶病亞種群的各小群體內的變異造成。這種差異與兩地