冰凍機(jī)采血小板解凍致絮狀物析出情況分析與對(duì)策

1、<p>　　冰凍機(jī)采血小板解凍致絮狀物析出情況分析與對(duì)策</p><p>　　【摘要】目的 分析冰凍機(jī)采血小板解凍情況。方法 分析683U冰凍機(jī)采血小板解凍過程中出現(xiàn)絮狀物凝塊的原因。結(jié)果 血小板收集濃度不同，析出發(fā)生率的差異有顯著性；融化溫度、DMSO加入速度對(duì)血小板質(zhì)量有顯著影響；血小板采后震蕩可明顯降低冰凍機(jī)采血小板融化析出率。結(jié)論 冰凍血小板采集、制備、凍融等各個(gè)環(huán)節(jié)必須嚴(yán)格質(zhì)量控制，規(guī)范

2、操作規(guī)程以確保血小板質(zhì)量。 </p><p>　　【關(guān)鍵詞】冰凍機(jī)采血小板 解凍 絮狀物 </p><p>　　成分輸血已在臨床得到普及與推廣，血小板的輸注已成為治療各種血小板減少或血小板功能障礙等疾病的重要治療手段。冰凍機(jī)采血小板因其可大量?jī)?chǔ)備、有效期長(zhǎng)、止血效果理想等特點(diǎn)，成為臨床輸血不可或缺的采集手段。但冰凍機(jī)采血小板的制備技術(shù)要求高、操作嚴(yán)格，在解凍冰凍機(jī)采血小板時(shí)極易致使絮狀

3、物析出。筆者自2009年6月—2011年6月通過對(duì)683U冰凍機(jī)采血小板解凍致絮狀物析出情況進(jìn)行總結(jié)，分析析出原因及對(duì)策，淺議如下。 </p><p><b>　　1 一般資料 </b></p><p>　　1.1儀器試劑 血細(xì)胞分離機(jī)trima accel（科安比斯特公司），-80℃超低溫冷凍冰箱（SANYO）、澳斯幫PC1200i血小板振蕩儀、PH-IA恒溫循

4、環(huán)解凍箱、百級(jí)凈化臺(tái)、一次性注射器、二甲基亞砜（DMSO）、上海康德來(lái)集團(tuán)生產(chǎn)的加樣件。樣本來(lái)源：2009年6月—2011年6月采集的683U冰凍血小板。 </p><p>　　1.2血源篩選 血小板供者的選擇符合國(guó)家規(guī)定的《獻(xiàn)血者健康檢查標(biāo)準(zhǔn)》，血常規(guī)檢查各項(xiàng)正常：血紅蛋白男≥120g/L，女≥110g/L，血小板計(jì)數(shù)≥150×109/L，紅細(xì)胞壓積0.35－0.50，血小板形態(tài)和功能正常，體重≥5

5、0kg，ALT≤40IU，采血前72h禁服阿司匹林類藥物；機(jī)采血小板間隔時(shí)間≥1個(gè)月。 </p><p><b>　　2 方法和結(jié)果 </b></p><p>　　2.1機(jī)采血小板的制備應(yīng)用血細(xì)胞分離機(jī)trima accel采集。選擇合適的穿刺點(diǎn)，嚴(yán)格無(wú)菌操作并確保進(jìn)針順利。按照血細(xì)胞分離機(jī)的操作規(guī)程選擇體重、身高、性別、血小板計(jì)數(shù)、壓積、采血量等技術(shù)參數(shù)。保證機(jī)采

6、整個(gè)過程的順利，確保新鮮機(jī)采血小板的質(zhì)量。 </p><p>　　2.2機(jī)采血小板置于（22±2）℃血小板振蕩保存箱水平振蕩至血小板完全解聚，保存有效期內(nèi)在百級(jí)超凈工作臺(tái)內(nèi)按無(wú)菌操作要求以1ml/min速度緩慢加入DMSO，使最終濃度達(dá)到（5±1）%，并使DMSO與機(jī)采血小板懸液體充分混勻。加藥后的機(jī)采血小板迅速平放于-80℃的低溫冰箱內(nèi)凍存血用。 </p><p>　

7、　2.3冰凍保存機(jī)采血小板的解凍方法復(fù)融時(shí)，從-80℃的低溫冰箱內(nèi)凍存成制品的冰凍機(jī)采血小板，立即放置于40℃恒溫循環(huán)解凍箱中解凍，使機(jī)采冰凍血小板在5分鐘融化，觀察解凍機(jī)采冰凍血小板，正常應(yīng)為無(wú)溶血、無(wú)氣泡、無(wú)變色、無(wú)凝塊、均勻一致的混懸液。我們?cè)?83U冰凍機(jī)采血小板的解凍過程中，發(fā)現(xiàn)出現(xiàn)絮狀物析出有58U例，析出率8.5%。 </p><p><b>　　3 討論 </b></

8、p><p>　　根據(jù)冰凍機(jī)采血小板制備、保存、復(fù)融過程及機(jī)采血小板本身的特點(diǎn)，分析總結(jié)出現(xiàn)絮狀物析出的原因有：1）機(jī)采血小板獻(xiàn)血員本身因素。如機(jī)采前的飲食致脂肪血、因紅細(xì)胞混入出現(xiàn)血小板計(jì)數(shù)不準(zhǔn)確、血小板計(jì)數(shù)分布出現(xiàn)雙峰或多峰等，都是影響冰凍機(jī)采血小板溶解后是否出現(xiàn)絮狀物的原因；2）制備機(jī)采冰凍血小板過程中DMSO的濃度影響，有文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)5%濃度的DMSO可以較好的對(duì)冰凍血小板起到保護(hù)作用；3）制備冰凍機(jī)采血小板時(shí)加入

9、DMSO的速度和搖勻情況對(duì)絮狀物凝塊的影響，注射時(shí)注意保持勻速，并且過程中應(yīng)充分搖勻，避免因加藥速度過快致血漿蛋白變性；4）（22±2）℃血小板振蕩保存箱保存時(shí)間，發(fā)現(xiàn)保存時(shí)間越長(zhǎng)，冰凍機(jī)采血小板復(fù)融后越容易出現(xiàn)絮狀物凝塊；5）機(jī)采血小板存儲(chǔ)溫度和凍存中的袋與袋間的的放置也是影響冰凍機(jī)采血小板復(fù)融后絮狀物出現(xiàn)的因素，制備后的機(jī)采血小板保存溫度不高于-65℃，最好存放在-80℃的專用冰箱，袋與袋間就留有空隙，并加以平放，盡量減少

10、堆碼層數(shù)，使血小板盡快降溫至-80℃。使其快速通過冰點(diǎn)，徹底停止細(xì)胞代謝，瞬間達(dá)到冷凍效果，最大程度地保持細(xì)胞活性；6）解凍過程慢或水溫不穩(wěn)定都可導(dǎo)致冰晶形成而影響冰</p><p>　　總之，造成冰凍機(jī)采血小板解凍后絮狀物析出的原因是多方面的，通過對(duì)冰凍機(jī)采血小板的采集、制備、保存和解凍過程的觀察分析，筆者認(rèn)為DMSO的注入是關(guān)鍵。因此，加強(qiáng)該環(huán)節(jié)的監(jiān)控，增強(qiáng)員工的責(zé)任心，嚴(yán)格執(zhí)行操作規(guī)程，并提升技術(shù)操作的自動(dòng)