-80℃冰凍保存血小板的實驗研究.pdf

1、目的:明確血小板冰凍保存后功能指標的變化，了解低溫對血小板的結(jié)構(gòu)、功能和性質(zhì)的影響，建立理想的冰凍保存條件和方法，優(yōu)化低溫冰凍保存血小板的技術(shù)，并為臨床急需應(yīng)用冰凍血小板的治療及搶救提供理論依據(jù)和實驗數(shù)據(jù)。 方法:采集健康人新鮮血進行離心，制作富含血小板的血漿（PRP），采用全自動血細胞分析儀檢測并比較冰凍保存前后血小板數(shù)量PLT，PCT，MPV，P—LCR，PDW； PH試紙測PH值：相關(guān)功能檢測，血小板聚集儀測聚集功能；流式

2、細胞儀測CD62p（活化功能）將分離的血小板分別加入保護劑二甲基亞砜（5%DMSO）后迅速置于—80℃低溫冰箱保存。血小板的采集到冰凍在6小時內(nèi)完成，對保存到期的血小板進行復(fù)蘇，復(fù)蘇溫度37—42℃，快速復(fù)蘇，然后對Plt、MPV、PDW、PCT、P—LCR、PH值血小板CD62p表達、相關(guān)功能如聚集，活化功能（用血小板聚集儀測定血小板聚集功能、用流式細胞儀測定血小板的活化功能指標CD62p）進行檢測，然后對冰凍前后指標進行配對資料t檢

3、驗。 結(jié)果:血小板計數(shù)（Plt）、血小板平均體積（MPV）、血小板體積分布寬度（PDW）、血小板壓積（PCT）、大血小板比例（P—LCR）、血小板PH值、血小板CD62p表達率、血小板聚集率（PAG）和聚集率單位時間的變化（Slope）冰凍前后對比均無統(tǒng)計學意義。 結(jié)論:血小板加終濃度為5%DMSO，在—80℃條件下冰凍保存一個月，血小板數(shù)量、形態(tài)、物理及化學性質(zhì)等保持較好且較穩(wěn)定，此技術(shù)條件可用于長期儲備血小板資源，解