血小板衍生膜微粒促血管生成的實驗研究.pdf

1、目的：應用血小板衍生膜微粒(PMPs)，通過體內(nèi)外實驗研究其對血管生成的影響，為臨床如何促進組織損傷的修復提供理論支持。如果能有效促進血管功能的恢復，將有重要的臨床意義。 方法：用凝血酶激活血小板釋放出PMPs，再經(jīng)高速離心分離出PMPs，用流式細胞儀(FCM)檢定PMPs，并用BCA法測定PMPs的蛋白含量；采用噻唑藍(MTT)實驗和FCM，觀察不同濃度的PMPs對建株人臍靜脈內(nèi)皮細胞ECV304增殖和凋亡的影響；將PMPs接

2、種于雞胚絨毛尿囊膜(CAM)上，觀察PMPs對CAM血管生成的影響。 結果：1.0U/ml凝血酶激活血小板后的PMPs釋放率為50.1％，經(jīng)高速離心后得到的PMPs純度大于99％。ECV304細胞的增殖與PMPs呈劑量依賴關系，在培養(yǎng)液中添加40μg/ml PMPs時，ECV304細胞增殖是空白對照組的1.8±0.3倍，與10μl/ml血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)組(增殖是空白對照組的1.9±0.5倍)相比，無統(tǒng)計學差異，(

3、p>0.05)；PMPs能抑制ECV304細胞的凋亡，40μg/ml PMPs組的細胞凋亡率為(3.9±0.4)％，明顯低于空白對照組的細胞凋亡率(9.4±0.5)％，p<0.05。VEGF(10μl/ml)對ECV304細胞的凋亡無明顯抑制作用，其凋亡率為(8.0±0.8)％。當將80μg/ml PMPs接種于CAM上，孵育72小時后，混合纖維素濾膜周圍可見到放射狀密集生長的血管網(wǎng)，血管分支數(shù)為112.5±11.31，血管面積為6.1