血小板衍生膜微粒促人臍帶血造血干細(xì)胞增殖的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：研究血小板衍生膜微粒(PMPs)的制備方法，并探討PMPs對(duì)人臍帶血造血干細(xì)胞增殖能力的影響。 方法：分別采用不同濃度的凝血酶激活血小板釋放出PMPs，采剛流式細(xì)胞儀檢測(cè)PMPs的釋放量，確定凝血酶最佳實(shí)驗(yàn)濃度。應(yīng)用掃描電鏡觀察凝血酶激活血小板后PMPs的釋放隋況。采用Ficoll分離人臍帶血單個(gè)核細(xì)胞(MNCs)，在含有不同濃度PMPs或血小板的甲基纖維素半固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)7天，觀察人臍帶血粒一巨噬祖細(xì)胞集落(CFU-G

2、M)形成情況，并用流式細(xì)胞儀檢測(cè)在含P胛s的無(wú)血清培養(yǎng)體系中培養(yǎng)7天后人臍帶血MNCs的CD34抗原表達(dá)的情況。 結(jié)果：用2.0 U/ml、1.5 U/ml、1.0 U/ml和0.5 U/ml凝血酶激活血小板后的PMPs釋放率分別為：28.7﹪、47.7﹪、50.1﹪和43.9﹪；CFU-GM產(chǎn)率與PMPs呈劑量依賴關(guān)系，PMPs為10μg/ml、50μg/ml、100μg/ml和血小板為200×10<'9>/L時(shí)的CFU-GM

3、產(chǎn)率(個(gè)/2×10<'5>MNCs)分別為：119.8±32.2、142.94±45.2、180.84±85.1和136.5±43,6，50μg/ml、100μg/ml PMPs和200×10<'9>/L血小板組的集落產(chǎn)率與空白對(duì)照組(103.0±24.8)相比，P值均<0.05；而10νμg/ml PMPs組的集落產(chǎn)率略高于空白對(duì)照組，但兩者無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P值>0.05。無(wú)血清培養(yǎng)7天后，50μg/ml PMPs組CD34抗原表達(dá)率為