人臍帶血間充質(zhì)干細胞移植治療骨性關節(jié)炎的實驗研究.pdf

1、目的：
　　利用間充質(zhì)干細胞多向分化的潛能，通過動物實驗分析大鼠骨性關節(jié)炎用人臍帶血間充質(zhì)干細胞移植治療的可行性及安全性，并探討其關節(jié)腔注射治療的價值，為臨床上此類疾病的治療提供實驗依據(jù)。
　　方法：
　　將無特定病原體SPF級雌性Wistar大鼠60只，體重100～150g，隨機分為4組：正常對照組、假手術組、模型對照組、干細胞組。采用改良Hulth法建立模型對照組、干細胞組，正常對照組不做任何處理，假手術組僅切開關

2、節(jié)囊，即逐層縫合傷口。術后傷肢不做固定，分籠飼養(yǎng)，自由活動。術后每天每只大鼠肌肉注射青霉素2萬U預防感染，注射3天。膝關節(jié)骨性關節(jié)炎的模型6周后可獲得。于術后第6周末開始，向干細胞組膝關節(jié)內(nèi)注射1.0×105人臍帶血間充質(zhì)干細胞，每周注射1次，連續(xù)注射4周；與干細胞組不同，模型對照組及假手術組注射等量生理鹽水，每周注射1次，連續(xù)注射4周；正常對照組不做任何治療。于最后一次注射2周后，麻醉下將全部大鼠行頸椎離斷處死，處死后立即解剖觀察膝關

3、節(jié)。取完整股骨內(nèi)側(cè)髁，常規(guī)脫鈣后，行石蠟包埋，5μm厚切片，每組取15張切片，常規(guī)脫蠟，行蘇木精-伊紅染色，于光學顯微鏡下進行觀察，進行Mankin評分。每組另取15張切片，用免疫組化的方法檢測各組軟骨中基質(zhì)金屬蛋白酶-1的表達強度。
　　結(jié)果:
　?。?）大體觀察結(jié)果：干細胞組關節(jié)軟骨退變程度輕于模型對照組，正常對照組及假手術組關節(jié)軟骨退變程度輕于干細胞組。
　?。?）HE染色組織學觀察結(jié)果：干細胞組Mankin評分