野生型和栽培型土三七總酚酸的含量比較

1、<p>　　野生型和栽培型土三七總酚酸的含量比較</p><p>　　作者：付煜榮 張紅芬 張小紅 </p><p>　　【摘要】 河北省科學(xué)技術(shù)研究與發(fā)展指導(dǎo)計劃項目（編號：06276431）；河北省教育廳科學(xué)研究計劃項目（編號：2004403）【摘要】 目的：比較張家口產(chǎn)野生型和人工栽培型土三七藥材中總酚酸的含量，并分析兩者是否有顯著性差異。方法：采用分光光度法，以沒食子酸

2、為對照品，以0.6%FeCl30.9%K3[Fe(CN)6]（1∶0.9）混合溶液為顯色劑，在720 nm波長處進(jìn)行測定。結(jié)果：總酚酸分析的線性范圍為0.228μg·mL-1～1.14μg·mL-1（r=0.9993），平均回收率為96.6%，RSD為1.9%（n=6）。野生型土三七中總酚酸含量為78.3 mg·g-1,RSD為5.5%（n=5）。人工栽培型土三七中總酚酸含量為82.4 mg·g

3、-1，RSD為2.5%（n=5）。結(jié)論：野生型土三七和人工栽培型土三七中總酚酸含量無顯著性差異。 </p><p>　　【關(guān)鍵詞】 景天三七 總酚酸 分光光度法</p><p>　　【ABSTRACT】 Objective:To analyze the content of total phenolic acid in wild and planted type Sedum Aizoo

4、n L.which were collected from Zhangjiakou.Methods:Total phenolic acid was analyzed by spectrophotometry at 720nm.The colourdeveloping agent was the mixture solution of 0.6% FeCl3 0.9% K3[Fe(CN)6](1∶0.9). Results: Calib

5、ration curve was constructed in the range of 0.228μg·mL-1～1.14 μg·mL-1 (r=0.9993)for total phenolic acid.The average recovery was 96.6% for total phenolic acid and the RSD of t</p><p>　　【KEY WORDS】

6、 Sedum Aizoon L.,Total Phenolic Acid,Spectrophotometry</p><p>　　土三七（Sedum Aizoon L.）為景天科景天屬植物，別名景天三七、費菜、血散、養(yǎng)心草；性平，味甘，微酸，無毒，有涼血止血、散瘀、消炎、安神、鎮(zhèn)痛等作用。該藥含有沒食子酸等多種酚酸和谷甾醇等成分[1,2]，試驗證明，能縮短動物的凝血時間，對金黃色葡萄球菌和綠膿桿菌均有抑制作用。

7、本品還有明顯的促進(jìn)血液循環(huán)、化瘀降壓作用,可防治心臟病、高血壓、高血脂、血管硬化等。我們測定了野生型和人工栽培型土三七中總酚酸的含量，并比較了其含量差異。</p><p><b>　　1 材料與方法</b></p><p><b>　　1.1 儀器</b></p><p>　　721分光光度儀（上海），A/D分析天平（

8、1/10萬，日本），萬分之一天平（上海）。</p><p><b>　　1.2 試藥</b></p><p>　　野生土三七采自河北省張家口市區(qū)，由王德富老師鑒定。人工栽培型土三七由野生型土三七的葉經(jīng)組織培養(yǎng)，再移入土壤栽培而成[3]。沒食子酸對照品購自中國生物制品檢定所。其余試劑均為分析純，試驗用水為二次去離子水。</p><p><

9、b>　　1.2 實驗方法</b></p><p>　　1.2.1 分析方法</p><p>　　取適量待測樣品置于25mL比色管，加無水乙醇至5mL，加0.3%十二烷基磺酸鈉2mL及0.6% FeCl30.9% K3[Fe(CN)6]（1∶0.9）混合溶液1mL，混勻，在暗處放置5min，加0.1mol·mL-1 HCl至刻度，混勻，在暗處放置20min。

10、 用721分光光度計，以顯色劑為空白，在720nm波長處測定吸光度A，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算含量[4,5]。</p><p>　　1.2.2 對照品溶液制備及標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制</p><p>　　取一定量沒食子酸對照品，精密稱定，用乙醇溶解，定容，配成22.8μg·mL-1沒食子酸儲備液。 分別取對照品溶液0.25mL，0.50mL，0.75mL，1.00mL，1.25mL，1.50m

11、L置于25mL容量瓶，同“1.2.1分析方法”項下進(jìn)行顯色和測定，記錄吸光度A，以A為縱坐標(biāo)，以含量C為橫坐標(biāo)，作圖，得沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，得回歸方程為：A=0.5579C+0.0888，r =0.9993（C：μg·mL-1）。結(jié)果表明沒食子酸含量在0.228μg·mL-1～1.14μg·mL-1范圍內(nèi)，呈現(xiàn)良好線性關(guān)系。</p><p>　　1.2.3 供試液的制備

12、</p><p>　　將野生型和人工栽培型土三七干燥粉碎，取粉末各0.2g，精密稱定，分別加入15mL水浸泡過夜，于沸水浴中提取三次（40min，30min，10min）。吸取上清液，合并三次提取液，定容至50.00mL，搖勻備用。</p><p>　　2008年10月付煜榮等：野生型和栽培型土三七總酚酸的含量比較第5期2008年10月河北北方學(xué)院學(xué)報（醫(yī)學(xué)版）第5期</p>

13、<p><b>　　2 結(jié)果</b></p><p><b>　　2.1 含量分析</b></p><p>　　取各提取液50μL，同“1.2.1分析方法”項下進(jìn)行顯色和測定，并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算總酚酸含量，結(jié)果見表1。表1 樣品測定結(jié)果注:t檢驗，與野生型土三七相比*P&gt;0.05</p><p&

14、gt;　　2.2 精密度試驗</p><p>　　取0.2g栽培型土三七粉末，精密稱定，按“1.2.3供試液的制備”項下進(jìn)行提取，同“1.2.1分析方法”項下進(jìn)行顯色和測定，記錄吸光度A，吸光度A的RSD為0.17%（n＝6）。</p><p>　　2.3 重現(xiàn)性試驗</p><p>　　取0.2g同一批藥材5 份，精密稱定，按“1.2.3供試液的制備”項下進(jìn)行

15、提取，同“1.2.1分析方法”項下進(jìn)行顯色和測定，記錄吸光度A，經(jīng)數(shù)據(jù)處理，計算得樣品含量，RSD為2.5%（n＝5）。</p><p>　　2.4 穩(wěn)定性試驗</p><p>　　取一份人工栽培型土三七藥材，精密稱定，按“1.2.3供試液的制備”項下進(jìn)行提取，同“1.2.1分析方法” 項下進(jìn)行顯色和測定，每隔5min測定一次A。經(jīng)數(shù)據(jù)處理得總酚酸含量，含量的RSD為0.74%。結(jié)果表明

16、樣品在70min內(nèi)穩(wěn)定。</p><p>　　2.5 回收率試驗</p><p>　　取已知總酚酸含量的人工栽培型土三七6份，精密稱定，分別加入高、中、低量的沒食子酸對照品，按“1.2.3”項下制得供試液后，按“1.2.1”項下進(jìn)行顯色和含量測定，計算沒食子酸的回收率，平均回收率為96.6%，RSD為1.9%（n=6），結(jié)果見表2。表2 回收率測定結(jié)果（n=6）</p>

17、<p>　　序號樣品重（g）樣品含量（mg）加入量（mg）測得量（mg）回收率（%)XRSD（%)10.09828.2510.918.695.020.09918.3210.818.594.230.10088.468.0716.295.896.61.940.09948.348.5016.798.350.10058.446.0414.498.760.10008.406.5614.897.6</p><p>

18、<b>　　3 討論</b></p><p>　　3.1 土三七的營養(yǎng)及藥用價值較為廣泛，試驗證明，能縮短動物的凝血時間，對金黃色葡萄球菌和綠膿桿菌均有抑制作用。本品還可防治心臟病、高血壓、高血脂、血管硬化；用鮮全草燉豬心可治療神經(jīng)衰弱、失眠、煩躁不安等[6] 。此外，還可采用景天三七鮮草治療老年中風(fēng)，且種植容易、產(chǎn)量大、收益高、見效快，有廣闊的應(yīng)用前景，但是，目前研究較少，一定程度上限

19、制了它的應(yīng)用，故有待于進(jìn)一步深入探究。</p><p>　　3.2 本文分析了野生型和人工栽培型土三七的總酚酸含量，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，兩種來源藥材的均值無顯著性差異（P&gt;0.05）。</p><p>　　3.3 在試驗過程中發(fā)現(xiàn)，顯色劑不穩(wěn)定，放置時間超過一天已不能使用，應(yīng)在每次實驗前臨時配置，否則，對實驗結(jié)果會造成較大影響。</p><p>　　3.

20、4 有報道注射用丹參總酚酸對缺血性中風(fēng)瘀血阻絡(luò)證確有較好療效[7]，注射用丹參多酚酸鹽治療冠心病心絞痛（心血瘀阻證）[8]。有關(guān)土三七中總酚酸的藥理作用尚未見報道，有待于進(jìn)一步研究。本文測定栽培型可代替野生型土三七藥用，故可用栽培型土三七作后續(xù)研究。</p><p>　　土三七含多種有效化學(xué)成分，因此，對野生型和人工栽培型有效成分的比較，對于擴大其藥用價值,保護(hù)日趨減少的野生資源具有重要意義。</p>

21、;<p><b>　　【參考文獻(xiàn)】</b></p><p>　　1 國家醫(yī)藥管理局中草藥情報中心站.植物藥有效成分手冊[M].北京：人民衛(wèi)生出版社,1986.476</p><p>　　2 謝宗萬.中藥材品種論述·上冊[M].第2版.上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,1989.7980</p><p>　　3 芮和愷，顧慧芬，

22、忻曉君,等.四種藥用植物的組織培養(yǎng)簡報[J].中藥材，1987，10（5）：11</p><p>　　4 劉瑞玲，李維維，楊維嘉.丹參及其注射液中水溶性總酚酸的測定[J].藥物分析雜志，1983，3（3）：163</p><p>　　5 付煜榮，張萬明，陳桂敏,等.景天三七中沒食子酸和總分酸含量測定[J].中成藥，2006,28（7）：10161018</p><p&

23、gt;　　6 車蘇容,郭素華,竺葉青.景天三七的藥學(xué)研究進(jìn)展[J].福建中醫(yī)藥,2004,35(3)：5153</p><p>　　7 韓景獻(xiàn)，韓力.注射用丹參總酚酸治療缺血性中風(fēng)瘀血阻絡(luò)證臨床研究[J].天津中醫(yī)藥,2005,22(4):287</p><p>　　8 苗陽，高鑄燁，徐鳳芹,等.丹參多酚酸鹽治療冠心病心絞痛（心血瘀阻證)的臨床觀察[J].中藥研究與信息，2005，7(1