prrs診斷與預(yù)防

1、,,,,,,PRRS診斷與預(yù)防,,豬呼吸道疾病綜合征 --藍(lán)耳病毒的危害,免疫抑制，豬抵抗力下降流產(chǎn)率升高，產(chǎn)活仔數(shù)減少仔豬、小豬、母豬、種公豬死淘率升高種(公、母)豬繁殖力降低仔豬、生長(zhǎng)肥育豬生長(zhǎng)緩慢或停滯,,,,,,,,,,病 原 因 子流感病毒、副黏病毒豬瘟病毒蘭耳病偽狂犬病鏈球菌病豬傳染性胸膜肺炎豬噬血桿菌豬圓環(huán)病毒豬副紅細(xì)胞體病,,,PRRS 概 況,感染母豬流產(chǎn)、

2、死胎、弱仔斷奶仔豬呼吸道癥狀及死亡母豬產(chǎn)仔數(shù)和受胎率降低，小豬發(fā)育不良、生產(chǎn)性能及免疫力降低等尚無(wú)有效對(duì)策分布廣泛,,,,PRRS 概 況,已發(fā)現(xiàn)有PRRSV的國(guó)家： 美洲：美國(guó) （1987）、加拿大（1987） 歐洲：荷蘭（1991）、英國(guó)、捷克、波蘭、 斯洛文尼亞、丹麥、德國(guó)、西班牙 亞洲：日本（1994）、南韓、菲律賓、

3、 中國(guó)臺(tái)灣和大陸,,,,PRRS 概 況,美國(guó)： 陽(yáng)性群 個(gè)體陽(yáng)性率 1987年： 臨床上發(fā)現(xiàn) 1985年： 3．8％ 9。6％ 1986年： 40％ 20．8％ 1987年： 37．5％ 32．4％ 1988年： 63．9％ 47．6％ 1989年： 83．3％ 51．7％ 199

4、0年： 18個(gè)州87個(gè)農(nóng)場(chǎng)豬群陽(yáng)性率達(dá)82．7％。 目 前： 40-50%豬群感染歐州：目前有50%以上豬群感染,,1999~2003年豬繁殖與呼吸綜合征抗體檢測(cè)結(jié)果,,2003年83.3％ 豬場(chǎng)陽(yáng)性率,2003年：55.8％（陽(yáng)性場(chǎng)：64.8％） 樣品陽(yáng)性率,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,1996年來(lái)PRRS在我國(guó)的分布,,,,,,,一、豬繁殖和呼吸綜

5、合征診斷,,臨床癥狀 病理變化 病毒分離 病毒抗原檢測(cè) 病毒抗體檢測(cè),,,PRRS診斷--(1)臨床癥狀,1. 繁殖豬群： 急性發(fā)病期死亡、厭食、發(fā)熱。無(wú)乳癥、昏睡、皮膚變色。發(fā)病5％～50％。 持續(xù)4～5個(gè)月，配種后22～109天流產(chǎn)，早產(chǎn)和產(chǎn)期延遲。仔常出現(xiàn)一窩內(nèi)有死胎、木乃尹化胎兒，組織自溶胎兒、弱仔和健康仔。母豬還可出現(xiàn)延遲發(fā)情、持續(xù)性不發(fā)情。2. 仔豬呼吸道癥狀：仔豬斷乳

6、前后發(fā)病率和死亡率升高，仔豬精神不振，“八”字腿站姿，生后1周內(nèi)死亡，呼吸困難，咳嗽、厭食，皮膚損傷變蘭，結(jié)膜炎，眼窩水腫，新生豬臍帶出血，淤血紅腫.3. 公豬：癥狀與母豬相同；性欲降低、精子數(shù)量和活力降低。4. 其它：健康狀況不佳可持續(xù)整個(gè)育成期，零星發(fā)生死亡。對(duì)育成豬的影響難以估計(jì)。 Don等（1996）報(bào)道在PRRS暴發(fā)期間和之后出生的仔豬肺部病變發(fā)生率從 30％增加到 70％，仔豬年生產(chǎn)能力降低5％

7、～ 20％。但是大多數(shù)育成豬群可能感染PRRS而無(wú)臨床癥狀。,,臨床癥狀多數(shù)豬場(chǎng)表現(xiàn)PRRSV的亞臨床感染或慢性感染PRRSV侵襲的保育舍仔豬繼發(fā)細(xì)菌或并發(fā)病毒感染則出現(xiàn) 咳嗽、呼吸急促者增多 肺炎?、局限性肺炎? 腹瀉率升高(20%) 萎縮性鼻炎?、鏈球菌病? 、流感嚴(yán)重性增加,豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS),,早產(chǎn)的1日仔豬,早產(chǎn)的一日齡仔豬,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,

8、,,,,,,,,,,,,,,,,,放線桿菌胸膜肺炎,支原體肺炎,,,PRRS診斷--(2)病理變化,1.肺: 小葉區(qū)域變紅。大面積肺炎，呈間質(zhì)性肺炎，主要局限于肺泡內(nèi)，肺泡間隔增厚，含大量巨噬細(xì)胞、少量淋巴細(xì)胞和2型肺細(xì)胞增生。肺泡腔充滿炎性細(xì)胞和壞死細(xì)胞碎片。肺泡巨噬細(xì)胞減少（從90%減少到35%）。2.流產(chǎn)胎兒：動(dòng)脈炎、心肌炎和腦炎（血管周圍出現(xiàn)巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)）。3.其它：仔豬、育肥豬眼瞼水腫，仔豬皮下水腫，體表淋巴結(jié)腫

9、大，心包積液、水腫。有的流產(chǎn)胎兒和死胎也出現(xiàn)皮下水腫和心包積液。,,豬繁殖與呼吸綜合征,病理變化 新生仔豬及保育舍仔豬肺臟呈現(xiàn)：輕度至重度、多灶性至彌漫性、棕褐色斑點(diǎn)病變， 不塌陷，有彈性間質(zhì)性肺炎，單核細(xì)胞、肥大和增生的2型肺細(xì)胞、,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,豬繁殖與呼吸綜合征,臨床診斷14天內(nèi)，出現(xiàn)如下3個(gè)指標(biāo)：流產(chǎn)或/和早產(chǎn) ? 8%死產(chǎn)胎兒 ? 20% 產(chǎn)仔數(shù)

10、出生后1周內(nèi)仔豬死亡率 ? 25%,,,,PRRS診斷--(3) 病毒分離,動(dòng)脈炎病毒科(LDV, EAV, SHFV) 球形, 45-83nm (25-35nm) 囊膜 不穩(wěn)定,,一、病毒特性：,PRRS病毒分類,歐洲型 PRRSV 美洲型 PRRSV Vary genomically (genotype) Partly cross-reaction serol

11、ogically 突變 重組,,,,,PRRS病毒血清型和基因型,歐洲型 PRRSV: 歐洲； 加拿大；日本 美洲型 PRRSV： 美洲；丹麥、斯洛文尼亞；亞洲,美洲型毒株基因亞型PRRSV野毒株在有限區(qū)域或時(shí)間內(nèi)很容易發(fā)生基因變異或重組基因亞型有多少？

12、 據(jù)GP5基因序列，美洲株至少分為6個(gè)基因亞型 Andreyev等（1997） 日本1991~1999年分離的37個(gè)野毒株分成了14個(gè)不同基因組。 Itou等(2001),同一

13、年份具有不同型毒株; 同一農(nóng)場(chǎng)有不同型毒株Dee等（2001）在一個(gè)有PRRSV慢性感染的1750頭母豬的種豬場(chǎng)，經(jīng)過(guò)對(duì)不同時(shí)期仔豬血清內(nèi)PRRSV基因檢測(cè)和病毒分離，發(fā)現(xiàn)該場(chǎng)PRRSV有A、B、C 3個(gè)基因亞型，不同基因亞型PRRSV ORF5基因差異為5.8%~11%，同一基因亞型內(nèi)毒株基因同源性為98.%~99%主導(dǎo)基因亞型？ 如 1-3-2-1 RFLP類型，為日本主要流行毒株歐洲型毒株和美州型毒株間的重組概率比同型毒

14、株間的重組概率小1萬(wàn)倍（Van Vugt等，2001） 。,PRRS病毒結(jié)構(gòu)蛋白,,,,,,,,GP5,RNAN,GP2,GP3,GP4,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,M,,,,,,,,,,,,,,,,,ORF2,ORF3,ORF4,ORF5,ORF6,,ORF7,,,,,,,ORF2,ORF3,ORF4,ORF5,ORF6,ORF7,,An,,An,,,,,,,,,ORF1ab,ORF1ab,,,,An,,,,,1

15、5.1kb,GP2 GP3 GP4 GP5 M N,771bp 765bp 537bp 603bp 525bp 372bp,750bp 798bp 552bp 606bp 522bp 387bp,GP2 GP3 GP4

16、 GP5 M N,,,,,,,,,,,,,,,An,An,An,An,AnAnAn,mRNA1234567,,,PRRSV VR2332 LV,ORFs and Sub-genome mRNA of PRRSV,,,PRRS診斷--(3) 病毒分離,二、病料 肺臟、腦、心、血清三、細(xì)胞 Marc145、CL2621、PMA四

17、、鑒定方法 血清學(xué)：IFA, SN 分子生物學(xué)：RT-PCR， DIG-Prob問(wèn)題： 疫苗病毒株的干擾 病料問(wèn)題 (死胎的自溶等),,,,PRRS診斷--(3) 病毒抗原檢查,免疫組化法（McAb-SDOW17,SR30---FA 免疫金、銀、過(guò)氧化物酶 組織冰凍切片， PMA 原位雜交法 (DIG-Pro

18、b,福爾馬林固定切片) RT-PCR RT-PCR-RFLP,,,,PRRS診斷--(4) 病毒抗體檢測(cè),免疫過(guò)氧化物酶單層試驗(yàn) （IPMA） 間接熒光抗體（IFA）試驗(yàn) ELISA SN問(wèn)題：疫苗病毒抗體的干擾,,,,,,,,,,,,,,,二、PRRSV免疫,細(xì)胞免疫 二次感染 持續(xù)感染,方法 產(chǎn)生時(shí)間(天) 高峰期(天) 維持時(shí)間(天) IFA 9

19、-11 28-35 158 IPMA 5-9 35-42 324 ELISA 9-13 28-42 137 SN 9-28 70-77 356,體

20、液免疫,,,,,,,,PRRSV 在 豬 體 內(nèi) 的 分 布,,,,,PRRSV infection of immune cells for PRRSV replication,______________________________________ Permissive Virus title TCID50--

21、------------------------------------------------------------------------------------------巨噬細(xì)胞 肺 macrophages subpopulation ++++ > 107 Spleen macrophsge

22、 +++ 106-107 Brain nicroglis ++++ 107 Monocytes alone +/-

23、 <104 MM-CSF ++ 104 adherence to endothelial ++ 104淋巴細(xì)胞 B-cells

24、 - <104 T-cells - <104_______________________________________________________

25、______________________________________,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,Stem cell Monblast PromoncytesCirculating單核細(xì)胞Migrating單核細(xì)胞,,,,,,,骨髓血液巨噬細(xì)胞,Interlukine-3G

26、ranulocyte/macrophageColony stimulating factor Macrophage colony Stimulating factor,單 核 巨 噬 細(xì) 胞 系 統(tǒng),,,,,,抗 體 反 應(yīng),方法 產(chǎn)生時(shí)間(天) 高峰期(天) 維持時(shí)間(天)間接免疫熒光 9-11 28-35

27、 158 IPMA 5-9 35-42 324 ELISA 9-13 28-42 137 中和試驗(yàn) 9-28 70-77

28、 356,PRRSV與其它病原體的相互作用,臨床資料數(shù)據(jù)表明，很多病原體與PRRSV同時(shí)存在于一個(gè)豬群或豬體。通常，由PRRSV單獨(dú)感染造成的臨床病理，僅表現(xiàn)為間質(zhì)性肺炎，但臨床上PRRSV引起的病理變化比較嚴(yán)重，說(shuō)明PRRSV與其它病原體可能存在相互協(xié)同作用。,PRRSV與其它病原的關(guān)系,PRRSV增強(qiáng)豬對(duì)下列病原的易感性傳染性胸膜肺炎放線桿菌（APP）巴氏桿菌（MP）鏈球菌（SS?）豬霍亂沙門氏菌（S. Cholerasui

29、s）偽狂犬病毒（PRV）呼吸道冠狀病毒（PRCV）流感病毒（SIV）,,支原體與藍(lán)耳病毒的關(guān)系,支原體促進(jìn)藍(lán)耳病毒感染及加重感染的嚴(yán)重程度，延長(zhǎng)藍(lán)耳病毒持續(xù)感染的時(shí)間。,,,豬呼吸道疾病綜合征(PRDC) --支原體與藍(lán)耳病毒,兩種病原持續(xù)感染的豬場(chǎng)，肥育舍內(nèi)具有發(fā)生“13-15周齡墻”、“18-20周齡墻”(PRDC)的潛在危險(xiǎn)性 兩種病原對(duì)PRDC的發(fā)生具有協(xié)同和加強(qiáng)作用。,,,,,,,病

30、毒與病毒：Groschup等（1996）通過(guò)檢查豬群中歐洲型PRRSV、豬流感病毒（SIV）、豬呼吸道冠狀病毒（PRCV）及豬副粘病毒（PPMV）抗體水平，發(fā)現(xiàn)：PRRSV與豬呼吸道冠狀病毒、PRRSV與SIV亞型H1N1之間有重要聯(lián)系。日本、美國(guó)也發(fā)現(xiàn)：PRRSV與SIV間有協(xié)同關(guān)系。2. 病毒與細(xì)菌Zeman等（1996）分析了127個(gè)豬場(chǎng)的221個(gè)PRRSV病例中其它病原菌的感染情況，發(fā)現(xiàn)：58%病例存在嚴(yán)重肺部感染，

31、感染菌包括多殺性巴氏桿菌、沙門氏菌、鏈球菌、豬副嗜血桿菌等。,,Rovira等（2002）通過(guò)實(shí)驗(yàn)室感染試驗(yàn)，即將24頭5周齡豬分為4組，分別接種PRRSV、PCV-2、PRRSV+PCV-2及空白對(duì)照組。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，兩個(gè)病毒混合接種組豬病理變化明顯加重，PCV-2核酸量明顯高于PCV-2單接種感染豬，證明PRRSV感染可促進(jìn)PCV2增殖。Hans等（2001）用PCV-2和PRRSV人工感染豬試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)PCV2可加重PRRSV引起的支

32、主管肺炎病理變化。,加拿大和日本等國(guó)發(fā)現(xiàn)PRRSV感染豬群中有豬2型圓環(huán)病毒存在,二 次 感 染,放線菌 2型鏈球菌 嗜血桿菌 多殺性巴氏桿菌 偽狂犬病病毒 豬流感病毒,持 續(xù) 感 染,公豬： PRRSV-RNA demonstrated in the semen of boars at 92dpi when the serum ample wa

33、s negative母豬： Sea of pigs contains PRRSV-RNA at 210 days postfarrowing PRRSV isolated： at 157dpi after infection其它豬：SPF pigs , commingled with PRRSV-

34、seronegative pigs that exposed to PRRSV 22 weeks previously, had clinical signs of PRRSV infection,滅 活 疫 苗 免 疫 效 果,______________________________________

35、 免疫組 非免疫組---------------------------------------------------------母豬數(shù) 14 11仔豬總數(shù) 137 112每胎平均仔豬數(shù)

36、 9.7 10.18每胎平均健康仔豬數(shù) 7.6 0.9每胎平均弱仔豬數(shù) 1 2.7每胎平均木乃伊數(shù) 1.1 6.5___________________________________________________________________

37、_________,豬蘭耳病國(guó)際市場(chǎng)疫苗,,RespPRRS---德國(guó) Boehring Ingelheim, Inc. PrimePacPRRS---美國(guó)Schering-Plough Animal Health Suipravac---西班牙 Hipra 滅活疫苗---西班牙 CyBlue, Laboritorios Sobrino, S.A.,滅 活 疫 苗 免 疫 效 果,______________________

38、________________ 免疫組 非免疫組---------------------------------------------------------母豬數(shù) 14 11仔豬總數(shù)

39、 137 112每胎平均仔豬數(shù) 9.7 10.18每胎平均健康仔豬數(shù) 7.6 0.9每胎平均弱仔豬數(shù) 1 2.7每胎平均木乃伊數(shù) 1.1 6.5———————————

40、————————,美國(guó)（2002）報(bào)道：一個(gè)野毒株來(lái)源于RespPRRSV弱毒疫苗,PRRS活疫苗株是否變異或返強(qiáng)？,丹麥Nielsen等（2001）,活疫苗,,,,,,,懷孕3個(gè)月,,,,同源性99%以上,PRRSV免疫失?。坎《净蚨鄻有约耙鬃冃詰?yīng)予關(guān)注。,,,,,基因序列,,,,產(chǎn)仔,流產(chǎn),,,,,,,活 疫 苗,,1. 不能用于PRRS陰性豬場(chǎng) 2. 不能用于繁殖母豬

41、 3. 不能用于種公豬,,警告,PRRS 的 控 制,,,1. 疫苗接種： 豬體盡早用PRRS疫苗免疫，并在接觸病毒前獲得免疫力，則效果很好。豬群免疫失敗的主要原因是其沒(méi)有足夠時(shí)間產(chǎn)生免疫力。2. 加強(qiáng)仔豬管理: 這是控制PRRS的關(guān)鍵之一。 45—60天隔離期、21—30天氣候適應(yīng)期；處理糞便，防止仔豬接觸PRRSV和其它病原體；繁育豬群要保持穩(wěn)定，以減少成年豬之間或成年豬與

42、其后代間PRRSV傳播；分群飼養(yǎng)，分群哺乳3. 加強(qiáng)檢疫 ，及時(shí)診斷,PRRS控制系統(tǒng)方法,第一步：加強(qiáng)檢疫，及時(shí)診斷第二步：加強(qiáng)仔豬管理第三步：保持豬群相對(duì)穩(wěn)定第四步：注意豬群流動(dòng)和疫苗接種,,PRRS控制系統(tǒng)方法,第一步：加強(qiáng)檢疫，及時(shí)診斷 集中了解生豬流動(dòng)區(qū)域該病血清學(xué)狀況，以便了解病毒傳入途徑。還要評(píng)價(jià)將來(lái)引進(jìn)豬只的狀態(tài)及其與后備繁殖豬的關(guān)系。第二步：加強(qiáng)仔豬管理 這是控制PRRS的

43、關(guān)鍵之一。當(dāng)擴(kuò)大仔豬群，特別是當(dāng)新生仔豬進(jìn)入感染豬場(chǎng)時(shí)，一定要有45—60天隔離期和21—30天氣候適應(yīng)期。在開(kāi)始30天，要進(jìn)行血清PRRS抗體檢測(cè)，在氣候適應(yīng)期，即要用疫苗。另外，要注意及時(shí)處理糞便，防止仔豬接觸PRRSV和其它病原體。,,第二步：加強(qiáng)仔豬管理 這是控制PRRS的關(guān)鍵之一。當(dāng)擴(kuò)大仔豬群，特別是當(dāng)新生仔豬進(jìn)入感染豬場(chǎng)時(shí)，一定要有45—60天隔離期和21—30天氣候適應(yīng)期。在開(kāi)始30天，要進(jìn)行血清PRRS抗體檢測(cè)

44、，在氣候適應(yīng)期，即要用疫苗。另外，要注意及時(shí)處理糞便，防止仔豬接觸PRRSV和其它病原體。,,第三步：保持豬群相對(duì)穩(wěn)定 繁育豬群要保持穩(wěn)定，以減少成年豬之間或成年豬與其后代間PRRSV傳播。分群飼養(yǎng)可便于豬群穩(wěn)定，保持豬群免疫對(duì)控制該病也很重要。我們應(yīng)認(rèn)識(shí)到該病有群體效應(yīng)，不僅僅會(huì)影響當(dāng)前生產(chǎn)，而且也會(huì)影響末來(lái)群體。當(dāng)然，如果哺乳期間豬存在毒血癥，那么分群飼養(yǎng)的作用就不大。第四步：注意豬群流動(dòng)和疫苗接種

45、 美國(guó)和日本已應(yīng)用PRRSV疫苗及改善管理措施（如分群哺乳）控制該病。他們認(rèn)為如果豬體盡早用PRRS疫苗免疫，并在接觸病毒前獲得免疫力，則效果很好。同時(shí)認(rèn)為豬群免疫失敗的主要原因是其沒(méi)有足夠時(shí)間產(chǎn)生免疫力。疫苗效果好壞，至少需觀察6個(gè)月。經(jīng)常改變使用不同型的疫苗，或豬群不穩(wěn)及仔豬來(lái)源不同等弊大利小。,,控制措施的爭(zhēng)議要奌。,PRRSV是抗體依懶病毒，免疫有害。使用弱毒疫苗會(huì)排毒。弱毒疫苗返強(qiáng)與否？弱毒與強(qiáng)毒的重組。,控制措施的爭(zhēng)

46、議要奌。,PRRSV是抗體依懶病毒，免疫有害。使用弱毒疫苗會(huì)排毒。弱毒疫苗返強(qiáng)與否？弱毒與強(qiáng)毒的重組。,PRRS研究中的些新熱奌。,對(duì)其他動(dòng)物的攜帶和傳佈PRRSV的研究。早期的研究已證明野鴨可感染和攜帶PRRSV，近期美國(guó)學(xué)者(J.Brman)的研究證明：在用PRRSV標(biāo)準(zhǔn)參考毒株感染60頭豬舎中的20000頭蒼蠅，在距此豬舍0.4、0.8、1.3、1.7、1.9KM處，分別設(shè)制捕蠅奌，在豬感染后14天中，共捕獲蒼蠅182只，並

47、用PCR檢測(cè)到與感染的參考PRRSV一致的RNA(ORF5)，進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)又證明，這些帶毒蠅對(duì)豬有感染性。,PRRSV滅活疫苗對(duì)異源毒株的保護(hù)率差。,美國(guó)學(xué)者(H.Joo)的研究表明：在經(jīng)過(guò)滅活免疫過(guò)二次的母豬中，選用2頭姙娠100天和6頭姙娠80-90天時(shí)采用ORF5核苷酸序例同源性為82.1-84.4％的異源毒攻擊，結(jié)果8頭孕豬中7頭發(fā)生流產(chǎn)，共產(chǎn)死胎63只、活仔14只。而有趣的是經(jīng)多亇學(xué)者的研究證明，美洲株弱毒苗免疫的母豬，用同源

48、性僅為70％的歐洲株強(qiáng)毒攻擊卻能有效保護(hù)。這也許是PRRS弱毒苗為越來(lái)越多的養(yǎng)豬業(yè)主采用原因，,類疫苗毒株的流行值得關(guān)注。,韓國(guó)學(xué)者研究表明：在無(wú)癥狀的PRRS抗體陽(yáng)性豬場(chǎng)分離到的PRRSV經(jīng)基因檢測(cè)明顯有別於有癥狀豬場(chǎng)分離到的PRRSV野毒，而同疫苗株有高疫同源性，故稱之謂類疫苗株.用野株攻擊孕豬能引起流產(chǎn)和產(chǎn)死胎，而用類疫苗株攻擊則無(wú)害。目前筆者在國(guó)內(nèi)發(fā)現(xiàn)有此類似情況，雖未采用免疫措施，未見(jiàn)明顯PRRS固有的危害，但也發(fā)現(xiàn)此類豬場(chǎng)中

49、由于在有PRRS有癥狀的種豬場(chǎng)買種豬，而引發(fā)PRRS暴發(fā)的，值得同類豬引場(chǎng)以為鑒。,對(duì)PRRSV基因變異的研究更趨理性化。 早期的研究突出了基因的變異和可能發(fā)生重組的風(fēng)險(xiǎn)，現(xiàn)在的研究證明：所有RNA病毒聚合酶的誤配率都很大，如脊髓灰質(zhì)炎病毒的RNA聚合酶（RNA-RNA聚合酶）的誤配率約為4.5×10-4或約2200個(gè)堿基有一個(gè)錯(cuò)誤?？梢酝茢郟RRSV的15000堿基基因組中平均約有7個(gè)堿基誤配。作者還認(rèn)為：通常

50、突變點(diǎn)出現(xiàn)于密碼子的第三個(gè)堿基礎(chǔ)位置（所謂不穩(wěn)定位置），因此不能改變病毒的毒力或抗原性等重要的表型特征。,,AAA:,AAA:,AAA:,AAA:,病 毒 的 變 異,William L.Mengling（美國(guó)）通常突變不能改變病毒的毒力或抗原性等重要的表型特征，在1980年分離的一株P(guān)RRSV制備的疫苗，給豬提供的保護(hù)力，能抵抗10年后分離的高強(qiáng)毒株攻擊。另外有多個(gè)國(guó)家的學(xué)者研究證，美洲株弱毒疫苗能有效保護(hù)基因差異較大的歐洲株的攻擊。

51、 實(shí)驗(yàn)證明強(qiáng)毒株與弱毒株在豬體內(nèi)的重組可能性不大，當(dāng)豬同時(shí)感染400000000 TCID50的減弱（疫苗）PRRS株和40 TCID50強(qiáng)毒株（感染后第七天第一次從血清檢出），強(qiáng)毒株在豬體內(nèi)成為優(yōu)勢(shì)或唯一的毒株。,PRRS的危害及防制對(duì)策,采用疫苗控制本病已盛行于國(guó)內(nèi)外，據(jù)美國(guó)農(nóng)業(yè)部同意發(fā)布的有關(guān)信息，該國(guó)53%的豬群使用PRRS疫苗，大型豬場(chǎng)70%應(yīng)用疫苗。在所使用的疫苗中，以弱毒疫苗居首位，高達(dá)65.5%。如同其它動(dòng)物弱毒苗一樣

52、，其遠(yuǎn)期生物安全評(píng)估不同的門派之間仍有歧議，但不應(yīng)阻礙該病弱毒苗的推廣應(yīng)用。 廣東省長(zhǎng)江集團(tuán)所屬豬場(chǎng)1.6萬(wàn)頭母豬使用奉賢獸醫(yī)站研制的PRRS弱毒疫苗，歷時(shí)三年，免疫廠近百萬(wàn)頭豬，控制了PRRS危害，未發(fā)現(xiàn)不安全因素。,病 毒 的 變 異,William L.Mengling（美國(guó)）通常突變不能改變病毒的毒力或抗原性等重要的表型特征，在1980年分離的一株P(guān)RRSV制備的疫苗，給豬提供的保護(hù)力，能抵抗10年后分離的高強(qiáng)毒株攻

53、擊。另外有多個(gè)國(guó)家的學(xué)者研究證，美洲株弱毒疫苗能有效保護(hù)基因差異較大的歐洲株的攻擊。 實(shí)驗(yàn)證明強(qiáng)毒株與弱毒株在豬體內(nèi)的重組可能性不大，當(dāng)豬同時(shí)感染400000000 TCID50的減弱（疫苗）PRRS株和40 TCID50強(qiáng)毒株（感染后第七天第一次從血清檢出），強(qiáng)毒株在豬體內(nèi)成為優(yōu)勢(shì)或唯一的毒株。,PRRS的危害及防制對(duì)策,采用疫苗控制本病已盛行于國(guó)內(nèi)外，據(jù)美國(guó)農(nóng)業(yè)部同意發(fā)布的有關(guān)信息，該國(guó)53%的豬群使用PRRS疫苗，大型豬場(chǎng)70%

54、應(yīng)用疫苗。在所使用的疫苗中，以弱毒疫苗居首位，高達(dá)65.5%。如同其它動(dòng)物弱毒苗一樣，其遠(yuǎn)期生物安全評(píng)估不同的門派之間仍有歧議，但不應(yīng)阻礙該病弱毒苗的推廣應(yīng)用。廣東省長(zhǎng)江集團(tuán)所屬豬場(chǎng)1.6萬(wàn)頭母豬使用奉賢獸醫(yī)站研制的PRRS弱毒疫苗，歷時(shí)三年，免疫廠近百萬(wàn)頭豬，控制了PRRS危害，未發(fā)現(xiàn)不安全因素。,疫苗的研究和應(yīng)用,美洲、歐洲和亞洲各國(guó)越來(lái)越多的獸醫(yī)學(xué)者推薦使用弱毒疫苗控制PRRSV對(duì)豬群的危害（商品名：美洲株弱毒疫苗 Ingelv

55、ac MLV，歐洲株弱毒疫苗 Porcilis PRRS）。采納此建議的養(yǎng)豬業(yè)主亦越來(lái)越多。雖然，在國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)上都有弱毒疫苗和滅活疫苗供應(yīng)，但是，一般認(rèn)為弱毒疫苗效果較佳，而滅活疫苗主要用于制備自家疫苗。,西班牙—美洲株免疫、歐洲株攻毒的試驗(yàn)結(jié)果,組 別 母豬數(shù) 平均產(chǎn)活數(shù) 死胎數(shù) 斷奶數(shù)

56、 （28日齡）空白對(duì)照 6 9.7 1.2 8.8攻毒對(duì)照 6 4.2 3.56 1.8免疫組 6 10 2.8 8.8,,,,奉賢區(qū)獸醫(yī)研究所PRRS弱毒疫

57、苗的免疫試驗(yàn)結(jié)果,接種劑量 試驗(yàn)頭數(shù) 抗體陽(yáng)性頭數(shù) 21日齡 28日齡 35日齡106.4TCID50/ml 50 35 50 50105.4TCID50/ml 50 36

58、 50 50104.4TCID50/ml 50 36 25 10 對(duì) 照 50 36 18 2,,,,,PRRSV滅活疫苗,法國(guó)在一個(gè)3366頭經(jīng)產(chǎn)母豬的PRRSV感染場(chǎng)，采用PRRSV滅活疫

59、苗，結(jié)果試驗(yàn)組較對(duì)照組雖有所改善，但是不夠理想。,法國(guó)一PRRSV感染場(chǎng)采用PRRSV滅活疫苗的試驗(yàn)結(jié)果,對(duì)照 疫苗接種次數(shù) 0 2 3 4平均產(chǎn)活數(shù) 11.5 11.7 11.8 11.7死胎和

60、木乃伊 1.3 1.2 1.2 1.1斷奶仔豬數(shù) 9.78 9.84 9.94 10.04斷奶前死亡率 21.2% 21.6% 21.7% 18.8%,,,,,觀察結(jié)果,混合感染的控制,采用PRRS弱毒疫苗免疫 這是目前國(guó)內(nèi)外許多獸醫(yī)學(xué)者推薦的有效方

61、法。據(jù)加拿大獸醫(yī)專家實(shí)驗(yàn)證明，哺乳仔豬三周齡左右時(shí)接種PRRS弱毒疫苗對(duì)保育仔豬起到很顯著的效果。,加拿大采用PRRS弱毒疫苗接種三周齡仔豬的效果,組別 欄別 仔豬數(shù) 死亡率% 飼料轉(zhuǎn)化率 日增重g 藥費(fèi)$ A 1102 5.63 1.46 295 8.19 B 1065

62、 5.82 1.45 309 4.42 平均 1084 5.73 1.46 302 6.31 C 1097 1.55 1.41 336 1.01

63、 D 1087 3.23 1.51 350 3.96 E 1073 2.89 1.25 337 1.33 F 909 1.98 1.33 3

64、56 1.92 平均 1041 2.41 1.38 345 2.06,未接種疫苗,接種疫苗,,,,,免疫及免疫程序,免疫及抗體檢測(cè)： 細(xì)胞滅活苗、組織滅活苗、弱毒苗。 都處于試制階段，不穩(wěn)定的矛盾的較突出 ，抗體檢測(cè)有利于判別疫苗質(zhì)量?jī)?yōu)劣和免疫工作的好壞。 免疫程序（奉

65、賢弱毒苗）： 種豬：甲案，小型豬場(chǎng)每隔四個(gè)月一次。 乙案，大型場(chǎng)60—70胎齡一次免疫。,免 疫 及 免 疫 程 序,仔豬免疫程序： 甲案，三周齡斷奶，全進(jìn)全出保育者， 四至五周齡免疫。 乙案，三周齡首免，五周齡二免。緊急免疫： 1，全部種豬、后備種豬 。

66、 2，初生仔超前免疫（實(shí)施四周）。 3，二周齡首免，四周齡二免。,,豬圓環(huán)病毒病,豬圓環(huán)病毒分型：I型、II型豬圓環(huán)病毒致病性： 新生仔豬先天性震(1994) 斷奶后全身消耗性綜合征(1997),,,,臨 床 檢 測(cè) 設(shè) 計(jì) 方 案,臨床調(diào)查、癥狀觀察、病理解剖,觸片染色鏡檢,細(xì)菌分離培養(yǎng),藥敏試驗(yàn),基因檢測(cè),蘭耳病,圓環(huán)病毒,病毒分離培養(yǎng),,豬肺泡巨噬細(xì)胞,Marc145、P

67、K15,雞胚接種、觀察,HA、HI試驗(yàn),治療、消毒、免疫接種,,,,,,,,,,,,,,,,,臨床樣品檢測(cè)結(jié)果I ：ORF5 RT-PCR,M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 C,,,,RT-PCR-RFLP分析結(jié)果,MResp

68、Samplp1,,,,豬圓病毒2型 PCR檢測(cè)結(jié)果,M 1 2 3 4 5 C,,,,,臨 床 檢 測(cè) 初 步 結(jié) 果,蘭耳病 28/32鏈球菌+其它細(xì)菌 24/32豬圓環(huán)病毒 7/18血凝性病毒 1/10豬傳染性胸膜肺炎