骨髓造血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查賀

1、骨髓造血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查,主講人 賀立山,大綱,概論正常骨髓象分析組織化學(xué)染色常見血液病血液學(xué)特點,第一講 概論,血細(xì)胞的生成造血細(xì)胞的命名造血細(xì)胞發(fā)育的一般規(guī)律各系造血細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特點造血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查的臨床應(yīng)用骨髓穿刺的適應(yīng)癥與禁忌癥骨髓涂片檢查的基本步驟和內(nèi)容,,一、血細(xì)胞的生成,二、造血細(xì)胞的命名,三、造血細(xì)胞發(fā)育的一般規(guī)律,一般胞體 大→小胞漿 少→多胞核 大→小染色質(zhì)

2、 疏松→密集核仁 清楚 → 模糊 → 消失核漿比 大→小,特殊巨核細(xì)胞胞體小→大,四、各系造血細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特點,粒系 紅系淋巴單核巨核細(xì)胞,五、骨髓造血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查的應(yīng)用,血液病的診斷與鑒別診斷血液病的療效觀察非血液病的輔助診斷脂質(zhì)代謝病的診斷查找某些感染性疾病的病原體提高某些疾病的診斷率,六、骨髓穿刺的適應(yīng)癥與禁忌癥,適應(yīng)癥各種血細(xì)胞的數(shù)量異常。原因不明的肝、脾、淋巴結(jié)腫大。原

3、因不明的發(fā)熱、惡病質(zhì)。協(xié)助查找某些病原體或特殊細(xì)胞。再障、白血病等的療效觀察。了解淋巴瘤的病變范圍，協(xié)助分期。禁忌癥 血友病是唯一的絕對禁忌癥。穿刺部位有感染灶。生命體征不穩(wěn)定，生命垂?；颊?。,七、骨髓涂片檢查的基本步驟,肉眼觀：涂片情況骨髓小粒、脂肪滴染色瑞氏染色特殊染色低陪鏡觀察有核細(xì)胞增生情況巨核細(xì)胞計數(shù)尋找特殊細(xì)胞或病原體造血島數(shù)量及分布情況,油鏡觀察細(xì)胞形態(tài)及分類造血島細(xì)胞成分特殊細(xì)

4、胞的辨認(rèn)巨核細(xì)胞分類計數(shù)特殊染色的陽性率及積分提出形態(tài)學(xué)診斷意見肯定診斷符合診斷提示診斷無診斷,第二講 正常骨髓象分析,取材、涂片、染色情況有核細(xì)胞增生程度粒、紅比值各系細(xì)胞數(shù)量、分布及形態(tài)。粒系紅系淋巴、單核、漿細(xì)胞及其它非造血細(xì)胞。,寄生蟲及其他特殊細(xì)胞巨核細(xì)胞及血小板組織化學(xué)染色血象描述診斷意見,一、骨髓增生程度劃分,骨髓增生程度劃分（目測法）,增生極度活躍,,增生明顯活躍,,骨髓增生活躍,,增

5、生減低,,增生極度減低,二、粒系/紅系比值,正常參考值 2～4/1粒、紅比值的分析結(jié)合有核細(xì)胞增生度綜合分析臨床意義增高：粒系增多和/或紅系減少減低：粒系減少和/或紅系增多,三、粒系（正常）,總數(shù)：約60%分布：從原始到成熟呈塔形分布。原始+早幼粒＜5%。以下每階段以5%遞增。干狀、分葉核粒細(xì)胞各占20%左右。嗜酸＜5%，嗜堿＜2%。形態(tài) ：正常。,三、粒系（異常）,數(shù)量：增多；粒系白血病、感染、炎癥、中毒等。

6、減少：非粒系白血病、白細(xì)胞減少癥、粒細(xì)胞缺乏癥、再障、MDS、溶貧、大出血等。分布：原始+早幼?！杭毙园籽?，MDS，中、晚幼粒細(xì)胞↑：慢粒，重癥感染，類白反應(yīng)等。干狀、分葉核↑：感染，慢中粒，皮質(zhì)醇↑癥等。形態(tài) ：感染：顆粒增粗，增多，中毒顆粒，細(xì)胞退行性變。巨幼貧：核過分葉，巨幼樣變，退行性變。NALL：顆粒增粗，auer小體。MDS：顆?！颉?，分布不均， auer小體，核分葉障。,四、紅系（正常）,總數(shù)：約

7、20％分布原始＋早幼＜5%中幼＜10%晚幼＜15%形態(tài)：圓形，單核，位于中央。,四、紅系（異常）,數(shù)量增多：增生性貧血、MDS、紅白血病、真紅減少：白血病、純紅再障、MDS、感染、類白反應(yīng)等分布缺鐵貧：中晚幼增多巨幼貧：早中幼增多形態(tài)缺鐵貧：胞體小，漿量少，邊緣不整，漿發(fā)育落后于核發(fā)育，成熟細(xì)胞體積小，中央淡染區(qū)擴大。巨幼貧：胞體大，漿量多，核染色質(zhì)疏松，核發(fā)育落后于漿發(fā)育，成熟細(xì)胞體積增大，中央淡染區(qū)消失。

8、MDS：胞體偏大，核漿發(fā)育不平衡，呈類巨幼樣變。核畸形，偏位，或脫核障礙。,五、淋巴細(xì)胞,數(shù)量：約20%分布：全部為成熟淋巴細(xì)胞，嬰幼兒偶可見到幼稚淋巴細(xì)胞。形態(tài)：正常。,六、單核細(xì)胞,正常不超過5%，全部為成熟型，原蟲感染、粒細(xì)胞缺乏恢復(fù)期，單核細(xì)胞增多，單核細(xì)胞白血病和MDS時單核細(xì)胞增多并且有大量原始、幼稚單核細(xì)胞出現(xiàn)。,七、其它細(xì)胞,漿細(xì)胞：＜2%，均為成熟型。再障時比例增多，多發(fā)性骨髓瘤時漿細(xì)胞比例增多并且有幼稚型漿細(xì)胞。

9、網(wǎng)狀細(xì)胞：＜1%，再障時比例相對增多。慢性感染時增多但形態(tài)正常。惡組時增多伴有異常網(wǎng)狀細(xì)胞出現(xiàn)。組織嗜堿細(xì)胞：再障時比例增多。,八、巨核細(xì)胞,巨核細(xì)胞胞體大，涂片中多位于片尾，檢查時以絕對值計數(shù)，通常每張涂片7～35個巨核細(xì)胞，成熟型約占50%，血小板呈簇分布。,九、寄生蟲與其他細(xì)胞,瘧原蟲、利多氏小體、高雪氏細(xì)胞、尼曼皮克氏細(xì)胞，成骨細(xì)胞，破骨細(xì)胞，里斯氏細(xì)胞，轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞等。,十、組織化學(xué)染色,后面將作為專題講授,十一、診斷意見,

10、可肯定診斷的疾病白血病多發(fā)性骨髓瘤支持診斷的疾病再障缺鐵貧巨幼貧MDSITP,可提供診斷線索的疾病溶血性貧血脾功能亢進(jìn)MPD可協(xié)助診斷的疾病瘧疾、黑熱病高雪氏病、尼曼皮克氏病骨髓轉(zhuǎn)移癌,典型骨髓報告單舉例,,第三講 組織化學(xué)染色,臨床意義鐵染色中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色。有關(guān)白血病的組織化學(xué)染色免疫組化染色,一、臨床意義,了解細(xì)胞功能鐵染色中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色（NAP）白血病細(xì)胞身份鑒定

11、標(biāo)記酶染色標(biāo)記抗原染色（免疫組化）,二、鐵染色,骨髓中鐵的存在形式幼紅細(xì)胞外鐵幼紅細(xì)胞內(nèi)鐵臨床意義缺鐵貧鐵粒幼細(xì)胞貧血慢性炎性貧血,三、中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色,陽性判斷：根據(jù)著色深淺的程度判斷，有5個級別積分方式；陽性率：計數(shù)100個中性粒細(xì)胞，計算其陽性細(xì)胞百分比，即為陽性率。積分：所有陽性細(xì)胞的“+”號之和即為NAP積分。臨床意義↑：細(xì)菌感染、再障、淋巴細(xì)胞白血病、慢中粒白血病?！翰《靖腥?、MDS、PN

12、H、髓性白血病,陰性反應(yīng)（ － ）：胞漿淡紅色,,弱陽性反應(yīng)（+）： 胞漿有淡灰色，無或有細(xì)小顆粒沉淀,陽性反應(yīng)（+）：,胞漿灰黑色，并有較粗的宗黑色顆粒,陽性反應(yīng)（++）：,強陽性反應(yīng)（+++）：,胞漿宗黑色顆粒，但顆粒間清晰可辯。,超強陽性反應(yīng)（++++）：,胞漿充滿黑色顆粒， 顆粒密不可分。,四、有關(guān)白血病的標(biāo)記酶染色,過氧化物酶染色糖原染色非特異性脂酶染色氟化鈉抑制氟化鈉不抑制,

13、（一）過氧化物酶染色POX,,,（二）糖原染色PAS,,（三）非特異性脂酶染色NAE,,急性單核細(xì)胞白血病NAE染色,（四）NAE染色氟化鈉抑制試驗,單核細(xì)胞陽性程度強，但被氟化鈉抑制。原粒細(xì)胞陽性程度較弱，但不被氟化鈉抑制。,ALL與ANLL的鑒別,急粒與急單的鑒別,五、免疫組化染色,利用單克隆和免疫熒光標(biāo)記技術(shù)，檢測白血病細(xì)胞表面或細(xì)胞漿的特異性抗原，進(jìn)而鑒定其身份，用于白血病的免疫分型。,特異性標(biāo)記抗原,髓系有：CD13、CD1

14、4、CD15、CD32、CD33、CD65、CD91、CD156、CD161等淋巴有：T淋巴：CD2、CD3、CD4、CD7、CD8B淋巴：CD19、CD20、CD22NK細(xì)胞：CD16、CD56干細(xì)胞：CD34、CD96,免疫組化的應(yīng)用,1、白血病的免疫分型,2、用于AL微小殘留病灶的檢測,白血病病人完全緩解后骨髓細(xì)胞中出現(xiàn)CD19、CD22、CD10、CD7、CD5、CD34、CD37等單抗陽性細(xì)胞伴有TbT+則可認(rèn)定微

15、小殘留病灶存在。,第四講 常見血液病血液學(xué)特點,一、再生障礙性貧血,血象全血細(xì)胞減少淋巴細(xì)胞比例相對增多網(wǎng)織紅細(xì)胞減少正細(xì)胞正色素貧血,骨髓象增生低下造血細(xì)胞減少淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞、組織嗜堿細(xì)胞網(wǎng)狀細(xì)胞增多巨核細(xì)胞絕對減少,二、缺鐵性貧血,血象小細(xì)胞低色素貧血紅細(xì)胞中央淡染區(qū)擴大白細(xì)胞、血小板正常,骨髓象：增生活躍或明顯活躍紅系增高，以中晚幼紅細(xì)胞為主幼紅細(xì)胞核漿發(fā)育不平衡，漿發(fā)育落后于核發(fā)育組化染色：可

16、染鐵減少,三、巨幼細(xì)胞貧血,血象大細(xì)胞貧血巨橢圓型紅細(xì)胞全血細(xì)胞減少幼紅幼粒細(xì)胞出現(xiàn),骨髓象增生活躍或明顯活躍三系巨幼樣改變紅系增多，以原、早為主核漿發(fā)育不平衡，核發(fā)育落后于漿發(fā)育。,四、急性白血病,血象貧血、血小板減少WBC增高分類見到大量異常的原始或幼稚細(xì)胞（白血病細(xì)胞）,骨髓象增生極度活躍白血病細(xì)胞惡性增殖正常造血功能受抑,五、血小板減少性紫癜,血象血小板減少急性型WBC增高慢性易合并缺鐵性貧血,