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1、概述: 血細(xì)胞及血細(xì)胞形態(tài)學(xué)是臨床血液病診斷與治療及臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)的基礎(chǔ)工作。血細(xì)胞形態(tài)學(xué)適用于臨床血液病診斷快速簡(jiǎn)捷的要求。近年來(lái)由于血細(xì)胞學(xué)及超微結(jié)構(gòu)、免疫學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué) 、融合基因、造血干細(xì)胞及其細(xì)胞因子、骨髓造血微環(huán)境、基質(zhì)細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞、淋巴系細(xì)胞發(fā)生及其疾病表現(xiàn),細(xì)胞增殖動(dòng)力學(xué)與細(xì)胞凋亡以及骨髓組織病理學(xué)應(yīng)用,推動(dòng)了血液的臨床與實(shí)驗(yàn)室的新知識(shí)迅猛發(fā)展,因而當(dāng)前血液病不能單憑臨床與形態(tài)學(xué)作出診斷,必須以臨床和血細(xì)胞形
2、態(tài)學(xué)為基礎(chǔ),把免疫學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)及分子生物學(xué)新知識(shí)、新技術(shù)應(yīng)用到血液學(xué)中,構(gòu)成現(xiàn)代臨床血液學(xué)與分子生物學(xué)診斷技術(shù),彌補(bǔ)形態(tài)學(xué)的經(jīng)驗(yàn)性與主觀性帶來(lái)負(fù)面缺陷,才能提高血液病的診斷與治療水平。,進(jìn)入90年代以來(lái),國(guó)內(nèi)外采用多學(xué)科聯(lián)合技術(shù)綜合診斷如AL-MIC分(類(lèi))型,F(xiàn)AB-CLL診斷分(類(lèi))型方案、MIC對(duì)MDS診斷要求,已被廣泛采用或正趨于完善。 近年來(lái),血細(xì)胞形態(tài)學(xué)診斷技術(shù)正在進(jìn)入顯微圖像、血液病診斷與鑒別診斷、CL診斷
3、與治療及教學(xué)系統(tǒng)多媒體軟件等。還將顯微鏡與微機(jī)相連,應(yīng)用存儲(chǔ)、分類(lèi)、檢索軟件、編輯、打印診斷報(bào)告,并可附多幅細(xì)胞圖像。從軟件水平看,國(guó)內(nèi)幾家此類(lèi)產(chǎn)品尚屬探索性,尚不成熟,各有優(yōu)缺點(diǎn),有待軟件專(zhuān)業(yè)與應(yīng)用專(zhuān)業(yè)人員密切合作,生產(chǎn)出高質(zhì)量產(chǎn)品。,血細(xì)胞形態(tài)學(xué)基本概念及臨床應(yīng)用: 血細(xì)胞形態(tài)學(xué):觀察血細(xì)胞形態(tài)和數(shù)量及其比例的變化來(lái)研究造血器官的結(jié)構(gòu)和功能是血液學(xué)的重要組成部分,是很早就開(kāi)展的一門(mén)學(xué)科,是診斷造血系統(tǒng)疾病最基本、最簡(jiǎn)便
4、實(shí)用的檢查方法之一,被臨床普遍應(yīng)用。 正常人的血液及造血器官中,各種血細(xì)胞的數(shù)量有一定的正常范圍,不同血細(xì)胞及細(xì)胞發(fā)育的不同階段有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。在造血系統(tǒng)疾病中,如果造血功能發(fā)生紊亂,就會(huì)從血細(xì)胞形態(tài)學(xué)的量變和質(zhì)變中反映出來(lái),因此,可將形態(tài)學(xué)變化作為血液病的診斷依據(jù)。,幾種血細(xì)胞形態(tài)學(xué)的檢查方法:1.光鏡(瑞氏-姬姆薩染色)是血細(xì)胞形態(tài)學(xué)最基本和最常用的檢查方法,被看成是血細(xì)胞形態(tài)學(xué)的基本內(nèi)容,最廣泛應(yīng)用于臨床
5、實(shí)驗(yàn)室。,2.細(xì)胞化學(xué)染色: 是細(xì)胞學(xué)和化學(xué)兩者結(jié)合的形態(tài)學(xué)方法,其目的和特點(diǎn)是細(xì)胞保持完整組織結(jié)構(gòu)。在細(xì)胞個(gè)體組織的單位上,顯示化學(xué)結(jié)構(gòu)成分的定性或半定量。在血液學(xué)中應(yīng)用的意義: (1)研究血細(xì)胞化學(xué)成分及代謝功能; (2)協(xié)助血液病的診斷與鑒別診斷,尤其是急性白血病分型及鑒別診斷; (3)觀察血液病的療效及判斷預(yù)后; (4)探索血液病的發(fā)病機(jī)制。,3.相差鏡檢查:
6、 用于觀察未染色細(xì)胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)及活細(xì)胞的活動(dòng)及形態(tài),并結(jié)合細(xì)胞培養(yǎng),觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)、成熟、衰亡過(guò)程及對(duì)各種刺激的反應(yīng),可采用顯微鏡攝影術(shù)或顯微電影將活細(xì)胞活動(dòng)拍攝和記錄下來(lái)。,4.電鏡檢查: 有透射和掃描電鏡兩種,它的出現(xiàn)和應(yīng)用對(duì)細(xì)胞學(xué)的進(jìn)展是一個(gè)重大的突破。透射電鏡的分解力可達(dá)到2-3埃左右,把細(xì)胞放大到幾十萬(wàn)倍,能觀察到一般電鏡中無(wú)法觀察到的細(xì)胞內(nèi)超微結(jié)構(gòu)。,瑞氏染色法(Wrights Stain):
7、 細(xì)胞染色機(jī)制:染色是將細(xì)胞經(jīng)染色劑的物理和化學(xué)作用,使其清楚顯示細(xì)胞各個(gè)組成成分,有利辨識(shí)細(xì)胞形態(tài)。 染色可分兩個(gè)步驟: 1.染料受相應(yīng)物質(zhì)吸附而附著于物質(zhì)表面; 2.固著作用,即染色粒子進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)起化學(xué)反應(yīng)(染色透過(guò)細(xì)胞膜的學(xué)說(shuō)很多,尚無(wú)定論),與相應(yīng)的物質(zhì)形成溶解度很低的鹽固著于細(xì)胞內(nèi)而顯色。染色劑皆有選擇作用,其染色不是將細(xì)胞全部一齊著色,而只是將其中一部分染色,多余的被沖
8、洗掉。目前多以吸附學(xué)說(shuō)(電力吸附、機(jī)械吸附、化學(xué)吸附)來(lái)解釋。,基本概念 1.瑞氏染料是堿性染料美藍(lán)和酸性染料伊紅合稱(chēng)伊紅美藍(lán)染料即瑞氏染料。 伊紅鈉鹽的有色部分為陰離子,無(wú)色部分為陽(yáng)離子,其有色部分為酸色,故稱(chēng)伊紅為酸性染料。美藍(lán)的中間產(chǎn)物結(jié)晶為三氯化鎂復(fù)鹽,有色部分為陽(yáng)離子,無(wú)色部分為陰離子,恰與伊紅鈉鹽相反。,2.用甲醇作瑞氏染料溶劑,即成瑞氏染液。甲醇是瑞氏染料良好溶劑,有兩種作用 (1)
9、甲醇使瑞氏染料中美藍(lán)(M)與伊紅(E)在溶液中離解,可使細(xì)胞成分選擇性吸附其中的有色物質(zhì)而著色。 甲醇 ME(瑞氏染料)──→M+ + E- 在配置的瑞氏染液中美藍(lán)如放置過(guò)久即可氧化而含有天青,美藍(lán)天青與伊紅化合物能使核染成紫紅色,但不能使胞漿染成藍(lán)色,多余美藍(lán)就可以使胞漿染成藍(lán)色,染色主要是化學(xué)作用,是離子彼此結(jié)
10、合的反應(yīng)。 (2)甲醇具有強(qiáng)大的脫水力,可將細(xì)胞固定在一定形態(tài)及增加細(xì)胞結(jié)構(gòu)的表面積,提高細(xì)胞對(duì)染料的吸收作用,同時(shí)由于甲醇吸附染色液中的水,使染色液升溫,加速染色反應(yīng)。,3.緩沖液作用:染色對(duì)氫離子濃度是十分敏感的,據(jù)觀察PH的改變,可使蛋白質(zhì)與染料形成的化合物重新離解。緩沖液須保持一定的PH使染色穩(wěn)定,PBS的PH一般在6.4-6.8,偏堿性染料可與緩沖液中酸基起中和作用,偏酸性染料可與緩沖液中的堿基起中和作用,使PH恒
11、定。,(三)瑞氏染液配制: 1.瑞氏染液配制: 瑞氏染料 830mg或1g 甲醇(AR) 500ml或600ml 瑞氏染料放置乳缽內(nèi),用乳棒輕輕敲碎染料成粉末,加少許甘油或甲醇溶解研磨,在加較多量甲醇研磨呈一面鏡光亮,靜置片刻,將上層液體倒入一清潔儲(chǔ)存瓶?jī)?nèi),再加甲醇研磨,重復(fù)數(shù)次,直至乳
12、缽內(nèi)染料及甲醇用完為止,搖勻,密封瓶口,存室溫暗處,儲(chǔ)存愈久,則染料溶解、分解愈好,一般儲(chǔ)存3個(gè)月以上。,2.緩沖夜配制(PH6.4-6.8,弱酸性): 配方1 (貯存液) 配方2 1%KH2PO4 30ml M/15 KH2PO4 73.5ml 1%
13、Na2HPO4 20ml M/15 Na2HPO4 26.5ml H2O(新鮮) 加至1000ml置處,瓶口密封,防止霉菌污染,如有污染則應(yīng)報(bào)廢。,血細(xì)胞形態(tài)學(xué)采樣、制片與檢查程序: 血細(xì)胞形態(tài)學(xué)是十分細(xì)致、艱苦的工作,來(lái)不得半點(diǎn)虛假,只有認(rèn)真觀察與思維,才能發(fā)現(xiàn)問(wèn)題與解決問(wèn)題。因
14、此,人的主觀能動(dòng)性顯得十分重要。另一方面,要具有全面的臨床與血液學(xué)知識(shí),較豐富的細(xì)胞形態(tài)學(xué)水平,才能發(fā)揮人的高素質(zhì),才算得上德才兼?zhèn)涞膬?yōu)秀血液學(xué)人才。,血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查,要注意與臨床資料的密切相關(guān)性,即微觀與宏觀疾病的關(guān)系,但也需要注意血細(xì)胞形態(tài)學(xué)本身相對(duì)的獨(dú)立性。在檢查前應(yīng)先研究患者的病例資料,即實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果,臨床診斷與送檢目的及要求,進(jìn)行初步分析,提出可能存在問(wèn)題,在檢查與觀察骨髓及血片細(xì)胞形態(tài)學(xué)過(guò)程中,再一一思索這些問(wèn)題。對(duì)于臨
15、床上提出申請(qǐng)檢查目的、要求及臨床診斷,是否可以幫助證實(shí)與排除的可能性,同時(shí)也應(yīng)注意臨床未提出的問(wèn)題和臨床資料不周全時(shí)應(yīng)追究病史,充實(shí)資料、占有資料,并將形態(tài)學(xué)的發(fā)現(xiàn)和臨床資料反復(fù)聯(lián)系思考,最后做出較正確的結(jié)論。,形態(tài)學(xué)也有其相對(duì)的獨(dú)立性,這就是以標(biāo)本的取材、涂片的制備與染色,以及鏡檢一整套的規(guī)律性檢查,必須遵循這一套檢查方法的要求,嚴(yán)格進(jìn)行操作,才能得到滿(mǎn)意合格的標(biāo)本。嚴(yán)格鏡下操作規(guī)程,才能達(dá)到診斷工作的良好條件,取得各種數(shù)據(jù)和參數(shù),否
16、則徒勞無(wú)益。 采樣、制片及染色三道工序至關(guān)重要,是細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查的成敗關(guān)鍵。要取得合格的涂片標(biāo)本,必須做好上述工序,應(yīng)注意以下要求:,(一)采樣、制片: 1.玻片要求:國(guó)內(nèi)1.0mm×26mm×76mm±0.5,美國(guó)NCCLS規(guī)定1.0mm×25mm×76mm±0.5,要嚴(yán)格清潔,接近中性。 2.推片:要選擇優(yōu)質(zhì)推片,推片兩端邊緣整齊、平滑。也可選
17、用有機(jī)玻璃,其大小、厚度與玻片相同,兩端之邊緣應(yīng)加工光滑,以利推片用。 3.才外周血(樣),擦去第一滴血,迅速采血,量適中,如綠豆粒大小,具有一定推片技術(shù),推片傾斜45。±,推成血膜長(zhǎng)度25mm—35mm,寬度18—20mm,血膜四周留有空隙區(qū),血膜終尾離玻片終端至少10mm,血膜均勻,薄如蟬翼,尾端形如弧狀,迅速扇(搖)干,血膜具有頭體尾不同厚薄區(qū)域。此外,涂片時(shí),還要考慮患者的血液狀態(tài),如貧血程度、血液粘稠度、WB
18、C或有核細(xì)胞多少等因素,調(diào)整推片技巧。 4.如若采用靜脈血推片,用K3-EDTA或肝素抗凝,推制血片應(yīng)盡早進(jìn)行(最遲在1-2小時(shí)內(nèi))。,5.骨髓涂片:骨穿抽取骨髓 液至關(guān)重要,否則,骨髓細(xì)胞學(xué)檢查則無(wú)法進(jìn)行或不能真實(shí)反應(yīng)骨髓造血狀態(tài)。穿刺針定位后抽骨髓液量<0.2mm,拔出穿刺針時(shí)應(yīng)保持注射器連接穿刺針的真空狀態(tài),再拔針,反復(fù)地打出骨髓,抽回血液部分,使玻片面留下較膿的骨髓液及骨髓小粒,進(jìn)行推片。應(yīng)推十張以上,順序編號(hào),以備常規(guī)
19、形態(tài)學(xué)及細(xì)胞化學(xué)染色檢查之用。骨髓液涂片與外周血涂片有所不同,骨髓液有核細(xì)胞多,脂肪成分較多,粘稠度高,未抗凝,易凝固,操作應(yīng)敏捷。涂片時(shí),應(yīng)根據(jù)骨髓上述特點(diǎn)及病人情況,調(diào)整推片技巧,推片速度較血片慢,使細(xì)胞充分在玻片上攤展開(kāi)來(lái),迅速扇(搖)干。,(二)染色:是識(shí)別細(xì)胞形態(tài)的重要標(biāo)記工序: 有核細(xì)胞是無(wú)色的,經(jīng)細(xì)胞染色后,用光鏡見(jiàn)到細(xì)胞顯色的成分,并非是細(xì)胞原來(lái)的面貌。而是細(xì)胞經(jīng)染色后在鏡下反映細(xì)胞內(nèi)不同的結(jié)構(gòu)成分,在一定
20、酸堿溶液中對(duì)染料的特殊的親和性,如胞核的核酸及蛋白質(zhì)以及原始細(xì)胞的胞漿為酸性物質(zhì),與堿性染料美蘭作用后,染成藍(lán)色,而堿性物質(zhì)如Hb,則被伊紅染成紅色。血細(xì)胞瑞氏-姬姆薩染色的 光鏡形態(tài)被看成是血細(xì)胞形態(tài)學(xué)最廣泛的基本方法。,1.常規(guī)染色法(1)姬姆薩(Giema’s)染色: Giema’s粉末為eosin-azureⅡ3.0g及天青azureⅡ0.8g混合而成。對(duì)胞漿和顆粒顯色較好。(2)瑞氏(Wright’s)染色:Wright粉
21、末是亞甲蘭與伊紅合成,染色對(duì)胞核結(jié)構(gòu)顯色好。(3)瑞氏-姬姆薩混合染色(W-GS):以瑞氏(核)染色為主,取其兩者優(yōu)點(diǎn)。(4)May-Giemas氏染色:先用May-Giemas氏染液染色( May-Giemas氏液是含0.5伊紅酸亞甲蘭的甲醇溶液),再用姬姆薩氏染色的方法,主要用于染色體染色。,2.常規(guī)瑞氏-姬姆薩染色要點(diǎn):(1)要得到滿(mǎn)意、漂亮的血細(xì)胞染色標(biāo)本,新鮮涂片迅速染色是很重要的。(2)染色液配制要合格;(3)涂片
22、切勿用甲醛固定,否則不著色;(4)染色的好壞與染色液、緩沖液的質(zhì)量及比例、加液間隔時(shí)間、保持玻片染色液面的張力等染色技巧均有重大關(guān)系。染液要覆蓋涂膜面,再加緩沖液(1:2),其量要充足、混勻,染色時(shí)間要20分鐘以上。,(5)細(xì)胞著色觀察:當(dāng)染色液與緩沖液混合后,液溫升高,發(fā)生劇烈反應(yīng),直至液膜表面的“染色?!背示鶆蚍植迹S染色時(shí)間的推延, “染色?!庇?“染色小粒”聚集成 “染色大?!?,逐漸由邊緣推進(jìn)至液面中心(此過(guò)程需要20分鐘以上
23、),則表明細(xì)胞著色已完成,再用自來(lái)水緩流沖洗,使染色液沉渣及染色粒浮去,使其充分起起分色作用,去除細(xì)胞染色中浮色,顯示出胞核結(jié)構(gòu)及細(xì)胞清晰形態(tài),待干,鏡檢.,(三)光鏡檢查程序: 1.肉眼觀察:涂片厚薄是否適宜(根據(jù)貧血程度、白細(xì)胞及有核細(xì)胞的多少),涂膜是否合格,未染色涂片涂膜色澤,骨髓小粒及脂肪情況(灰白粒狀多為有核細(xì)胞增生明顯或白血病;磚紅色澤,涂膜面短、厚(推不開(kāi))多為RBC增多癥,涂膜稀釋或無(wú)骨髓小粒,多為取材不佳或增生不
24、良;如若油珠甚多,多為AA或低增生MDS等),涂片染色好壞,色澤是否正。,2.低倍鏡觀察—觀察涂片全貌: (1)涂片染色是否合格,了解全片有核細(xì)胞及各系細(xì)胞分布狀況; (2)觀察外周血WBC數(shù)(校對(duì)直接計(jì)數(shù))及各類(lèi)WBC分布及其比例。 (3)骨髓有核細(xì)胞增生度,粒/紅及粒紅兩系各階段及巨核系細(xì)胞數(shù)量,各階段比例及形態(tài),血小板形成情況,特別在片尾有無(wú)異常細(xì)胞(轉(zhuǎn)移瘤細(xì)胞、惡組、高雪氏細(xì)胞、N-P細(xì)胞及海蘭組織
25、細(xì)胞等)。選擇具有代表性油鏡觀察區(qū),尋找骨髓造血細(xì)胞成分多、分布比例具有代表性、無(wú)核細(xì)胞(RBC)不重疊、均勻分布區(qū)域,有核細(xì)胞才能分布均勻、推開(kāi),細(xì)胞形態(tài)才易辨認(rèn)。,3.油鏡觀察:要求觀察具有代表性區(qū)域的細(xì)胞形態(tài)比例,分類(lèi)計(jì)數(shù)-鏡頭移動(dòng)走向,按圖進(jìn)行。骨髓有核細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)200個(gè),外周血細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)100個(gè)。,六.外周血細(xì)胞形態(tài)檢查技巧: 外周血中血細(xì)胞數(shù)與形態(tài)學(xué)表現(xiàn)是反映骨髓造血狀態(tài)及血液病和其它疾病的櫥窗,是檢查與
26、觀察疾病的重要指標(biāo)。,(一)WBC形態(tài)學(xué)診斷技巧: WBC數(shù)值準(zhǔn)確性估計(jì):目前自動(dòng)化計(jì)數(shù)儀經(jīng)常出現(xiàn)結(jié)果的偏差,低倍鏡觀察血涂片可以粗略估計(jì)WBC數(shù)值及分布。低倍視野WBC數(shù):正常約3-5個(gè),增多6個(gè)以上,減低3個(gè)以下。WBC如推至片尾,分布不均,估計(jì)將有一定難度。較大的細(xì)胞如單核、異淋及中性粒細(xì)胞多在片尾,體部多為較小的淋巴細(xì)胞,使分類(lèi)造成偏差,所以分類(lèi)部位在適當(dāng)調(diào)整。,1.白細(xì)胞計(jì)數(shù): (1)WBC正常范圍:4.0~
27、10.0×109/L; (2) WBC正常限度以下:可分輕度減少(< 4.0~10.0×109/L),中度減少(< 3.0~2.0×109/L),或極度減少( <2.0×109/L); (3)正常高限度以上:可分輕度增多(>10.0~20.0×109/L),中度增多(> 20.0~40.0×109/L), 明顯增多(>40.0~80.0×109/L),極度
28、增多(>80.0×109/L); 以此與所測(cè)知WBC計(jì)數(shù)值作粗略對(duì)比,推斷WBC計(jì)數(shù)值準(zhǔn)確性. (4)如在血片分類(lèi)計(jì)數(shù)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)較多有核紅細(xì)胞時(shí),計(jì)出血片中有核紅所占%率,即以校正原WBC計(jì)數(shù)值減去有核紅所占比例,求出外周血中WBC總數(shù)值,還應(yīng)另作WBC分類(lèi)計(jì)100個(gè)過(guò)程中遇到多少有核紅細(xì)胞,即有核紅細(xì)胞 個(gè)/100個(gè)WBC,或作血片有核細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)(包括有核紅細(xì)胞),計(jì)出有核紅細(xì)胞所占%率.,2.WBC
29、分類(lèi)正常范圍及其病理性變化: (1)WBC分類(lèi)正常范圍:新生兒出生后最初24小時(shí)白細(xì)胞數(shù)高,主要為中性粒細(xì)胞,至第3~4周,中性粒細(xì)胞與淋巴細(xì)胞比例倒轉(zhuǎn),直至4歲淋巴細(xì)胞比例仍增多.表1表1 正常成人白細(xì)胞分類(lèi)范圍,白細(xì)胞分類(lèi)正常范圍由于民族、地區(qū)、年齡、性別及其生理性變化的影響,以及檢查本身的技術(shù)差異,即使一人同次取材不同涂片、一張涂片多次分類(lèi)計(jì)數(shù)結(jié)果也不可能完全一致,但不可差異太大.,表2
30、 NCCLS對(duì)分類(lèi)中的一些術(shù)語(yǔ)含量作了規(guī)定,(2)病理性形態(tài)學(xué)改變: 1)中性粒細(xì)胞:中性粒細(xì)胞的分葉分化程度,被認(rèn)為從干細(xì)胞至粒細(xì)胞生成是否正常及與粒細(xì)胞年齡相關(guān);如核分葉不良,Pelger-huet現(xiàn)象;核僅一葉或二葉,其百分率增加時(shí)謂之“左移”,反之,多數(shù)細(xì)胞四葉以上謂之右移,一般認(rèn)為正常中性粒細(xì)胞胞核分葉情況: 4葉者為 15~25% 3
31、葉者為 40~50% 2葉者為 20~40% 1葉者為 < 5%,血象中如有1個(gè)5葉以上者提示有巨幼細(xì)胞性貧血的可能。 右移現(xiàn)象-見(jiàn)于巨幼細(xì)胞性貧血、肝臟疾患,此外還見(jiàn)于缺鐵性貧血、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、遺傳性高分葉癥(顯性遺傳)及某些敗血癥(以左移多見(jiàn))。 左移-見(jiàn)于感染、敗血
32、癥、出血、小兒慢性中性粒細(xì)胞減少癥等。,中性粒細(xì)胞形態(tài)改變:毒性顆粒及空泡:中性粒細(xì)胞由于受到外來(lái)刺激(包括感染及應(yīng)激反應(yīng))引起顆粒變性,粗大著色深淺及漿內(nèi)空泡等病理性改變。上述改變及白細(xì)胞數(shù)量增多和出現(xiàn)幼稚及原始細(xì)胞則為類(lèi)白血病反應(yīng)。,慢性粒細(xì)胞白細(xì)胞(CML)的中性成熟粒細(xì)胞一般胞漿顆粒較正常稀少,但無(wú)空泡及毒性顆粒,而慢性中性粒細(xì)胞白細(xì)胞(CNL)的中性成熟粒細(xì)胞則與類(lèi)白血病反應(yīng)形態(tài)相似。 -假性嗜酸性顆粒在某些干
33、細(xì)胞疾病如MDS、粒細(xì)胞缺乏癥、腎性貧血某些患者中性粒細(xì)胞的顆粒增多,形態(tài)異常,類(lèi)似嗜酸樣顆粒的出現(xiàn)。,-遺傳性白細(xì)胞異常疾病:是先天性白細(xì)胞異常細(xì)胞,臨床上雖罕見(jiàn),但為了提高辨別的能力,應(yīng)有所認(rèn)識(shí). Pelger-Huer白細(xì)胞異常:屬于顯性遺傳,其白細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn):核分葉不良,不分葉,核呈花生形、啞鈴形等形狀,無(wú)核絲形成,胞漿正常,此外,還有假性(即繼發(fā)性) Pelger-Huer,白細(xì)胞異常應(yīng)加以鑒別,后者常見(jiàn)于急性腸
34、炎、傷寒、瘧疾、流感,無(wú)家族史,但在原發(fā)病得到治療后白細(xì)胞形態(tài)恢復(fù)正常.,Alder-Reilly顆粒異常:常染色體隱性遺傳性多糖代謝障礙性疾病,常伴有軟骨畸形、肝、脾腫大等,中性、嗜酸性及嗜堿性粒細(xì)胞含有多量嗜天青顆粒遮蓋整個(gè)細(xì)胞,單核細(xì)胞亦有類(lèi)似改變. May-Hegglin異常:為常染色體顯性遺傳疾病,在中性及嗜酸性粒細(xì)胞漿內(nèi)含有Dunle小體,常伴有巨血小板及血小板減少、紫癜,由于細(xì)胞的游走功能差,故病人常出現(xiàn)感染
35、癥狀.繼發(fā)性也可見(jiàn)于猩紅熱、球菌性感染、燒傷早期等某些病例.,2)嗜酸性粒細(xì)胞:此種細(xì)胞在人體每日規(guī)律性變動(dòng),晨至午下降,午后始升,午夜至次晨3時(shí)達(dá)高峰,哮喘患者及夜間工作者其規(guī)律與正常相反,晨9至12時(shí)達(dá)高峰。 臨床上嗜酸性粒細(xì)胞增多見(jiàn)于:過(guò)敏性疾病,如血管神經(jīng)性水腫、哮喘、食物及藥物過(guò)敏、血清病、蕁麻疹、枯燥熱等。 寄生蟲(chóng)病:常見(jiàn)于血絲蟲(chóng)病、鉤蟲(chóng)、包囊蟲(chóng)、肺吸蟲(chóng)、蛔蟲(chóng)、呂弗氏(Lofllers)綜合癥、蟯蟲(chóng)、旋毛蟲(chóng)、
36、瘧疾(偶見(jiàn))及血吸蟲(chóng)等。 皮膚?。喝鐫裾?、剝脫性皮炎、天皰瘡、牛皮癬、瘧疾、疥、感染、猩紅熱早期等。 血液病:CML、嗜酸性粒細(xì)胞白血病、何杰金氏?。ㄕ?0%病例)、嗜酸性肉芽腫、家族性嗜酸性細(xì)胞增多癥、熱帶嗜酸性細(xì)胞增多癥、甲狀腺癌及播散性結(jié)締組織病。 與化學(xué)藥物有關(guān):鎳(致皮膚炎)、青霉素、PAS、苯、呋喃妥因、磺胺等。,3)嗜堿性粒細(xì)胞:在正常人血液中為數(shù)甚少,該細(xì)胞嗜堿性顆粒含大量組織胺及肝素類(lèi)物質(zhì),臨床
37、上主要因骨髓增殖性疾病常伴嗜堿性粒細(xì)胞增多如CML、CML嗜堿變、嗜堿性粒細(xì)胞白血病、M4EO真性紅細(xì)胞增多癥、骨髓纖維化等。此外,還可見(jiàn)于感染恢復(fù)期、甲狀腺功能低下、何杰金病、溶血性貧血、肝硬化、結(jié)核病、流感、腫瘤以及月經(jīng)初潮等。,4)淋巴細(xì)胞:淋巴細(xì)胞為免疫反應(yīng)細(xì)胞,來(lái)源于骨髓淋巴干細(xì)胞,經(jīng)胸腺素作用分化為T(mén)淋巴細(xì)胞,參與細(xì)胞免疫,另一類(lèi)經(jīng)骨髓而成為B淋巴細(xì)胞,產(chǎn)生免疫球蛋白,可作為體液免疫。第三類(lèi)為非T非B淋巴細(xì)胞,其中又可分為:
38、 裸細(xì)胞(Null Cell)無(wú)膜表面標(biāo)記特征; K細(xì)胞(Killer Cell)有Fc受體,具有殺傷功效。,外周血內(nèi)淋巴細(xì)胞可分為大、中、小淋巴細(xì)胞,其形態(tài)一般不難辨認(rèn),在臨床由于各種因素刺激出現(xiàn)異常淋巴細(xì)胞,常出現(xiàn)于病毒感染性疾病,如傳染性單核細(xì)胞增多癥、傳染性淋巴細(xì)胞增多癥、傳染性肝炎、水痘、風(fēng)疹、流感、結(jié)核病、藥物過(guò)敏、慢性感染、放射病、應(yīng)激狀態(tài)及免疫異常等。其胞體增大,比正常淋巴大一倍以上,核染色
39、質(zhì)疏松、增多,胞漿豐富或不規(guī)則、有很強(qiáng)嗜堿性呈深蘭色、不均勻不透明或有泡沫或深蘭色、周邊著色加深,可見(jiàn)嗜天青紅顆?;蚩张荨?按Doney氏類(lèi)型分三型: Ⅰ型:最多見(jiàn),個(gè)體增大,核圓、卵圓或腎形,染色質(zhì)疏松、粗糙,胞漿豐富、深染,有泡沫或空泡,偶有嗜天青顆粒,核/漿約1:1。 Ⅱ型:胞體較大,主要胞漿明顯增多,且不規(guī)整(體如單核細(xì)胞),染色質(zhì)較致密,不如Ⅰ型增多聚集,胞漿淡蘭染,少數(shù)有嗜天青顆?;蛏僭S空泡,核/
40、漿約為1:2。 Ⅲ型:少見(jiàn),大致與Ⅰ型相似??捎泻巳?,特別要提出,外周血出現(xiàn)“異淋”樣細(xì)胞,決不局限認(rèn)為是傳單等病毒或抗體瓜,應(yīng)警惕還有惡性疾病的可能性,如淋巴瘤、轉(zhuǎn)移癌等。 此外,Tuck細(xì)胞即刺激細(xì)胞也是一種異常淋巴細(xì)胞,其意義與上述異常淋巴細(xì)胞相同。,外周血中惡性淋巴細(xì)胞見(jiàn)于下列疾病:原幼淋巴細(xì)胞-見(jiàn)于ALL或淋巴瘤/成人T細(xì)胞淋巴瘤/白細(xì)胞(ATLL)。骨髓瘤細(xì)胞-多發(fā)性骨髓瘤。淋-漿細(xì)胞-華氏
41、巨球蛋白血癥。毛細(xì)胞-毛細(xì)胞白血病。幼淋細(xì)胞(Prolympho Cytic Cell;PLC)屬于病理性細(xì)胞,介于幼淋與成熟淋巴細(xì)胞之間的特殊幼淋細(xì)胞,具有成熟的核染色質(zhì)與核仁存在的發(fā)育不平衡為最突出的特征。其增多的白細(xì)胞為幼淋巴細(xì)胞白細(xì)胞(Prolympho Cytic Lenkemia;PLL)。,5)單核細(xì)胞:是血中吞噬性細(xì)胞,參與免疫作用,在新生兒出生后一周內(nèi),在外周血中單核細(xì)胞可高至4.0×109/L,平時(shí)由于
42、采血部位及時(shí)間不同也有差異。臨床上,單核細(xì)胞增多見(jiàn)于以下情況: 常見(jiàn)于細(xì)菌性感染、結(jié)核、細(xì)菌性心內(nèi)膜炎、布氏桿菌病、菌痢及感染性疾病恢復(fù)期。 寄生蟲(chóng)?。函懠?、錐蟲(chóng)病、黑熱病、阿米巴肝膿腫等。 惡性疾?。?jiǎn)魏思?xì)胞白血病、MDS、慢性粒-單核細(xì)胞白血?。–MML)及惡性腫瘤。,6)外周血巨核細(xì)胞及血小板異常:在下列疾病患者外周血中可出現(xiàn)巨核細(xì)胞及裸核: 巨核細(xì)胞白血病(M7)及慢粒-巨
43、核細(xì)胞白血病變。 骨髓增殖性疾?。篊ML、CNL、真紅、血小板增多癥、骨髓纖維化、何杰金氏病、MDS及鉛中毒等。 血小板形態(tài)異常及缺乏聚集性:常見(jiàn)于血小板病如血小板無(wú)力癥、May-Hegglin血小板異常等。,7)類(lèi)白血病及類(lèi)紅血病反應(yīng):凡外周血中出現(xiàn)骨髓性(即原始及幼稚細(xì)胞)及病理性淋巴細(xì)胞(不成熟與成熟淋巴),有時(shí)出現(xiàn)有核紅細(xì)胞的大量增多,呈現(xiàn)白血病樣改變,需結(jié)合臨床血液學(xué)檢查及其他檢查進(jìn)行鑒別,排除白血
44、病、紅血病、紅白血病及惡性腫瘤存在。,8)經(jīng)皮膚穿刺帶入的組織細(xì)胞:偶爾經(jīng)針穿刺皮膚及皮下組織而帶入血涂片中的組織細(xì)胞。 上皮脫屑(角化上皮、大部分來(lái)自皮膚及皮下組織):為無(wú)核、呈折疊、多角形、通常單個(gè),有時(shí)成片。 帶核上皮細(xì)胞:系角化上皮細(xì)胞,尚可見(jiàn)小圓核。 皮脂腺細(xì)胞:核偏位,胞漿成網(wǎng)狀,有許多空泡,與骨髓的脂肪細(xì)胞相似。,3.外周血中呈現(xiàn)惡性腫瘤細(xì)胞及惡性組織細(xì)胞或成人T細(xì)胞NHL/白血病
45、細(xì)胞。 在惡性組織細(xì)胞或ATLL白血病患者中白血病數(shù)低或正?;蛟龆鄷r(shí),常在片尾見(jiàn)到惡性組織細(xì)胞(常為不同程度退行性改變),或拖尾、變形、多樣性、大小懸殊的ATLL細(xì)胞;也可采用濃縮血涂片提高檢出率。 惡性腫瘤,特別是晚期,有時(shí)在血片中可見(jiàn)單個(gè)或多個(gè)或多堆瘤細(xì)胞,遇此情形,必須結(jié)合臨床診斷,切記不要將涂片上殘留或污染細(xì)胞誤認(rèn)。 4.由玻片或染色液污染帶入的細(xì)菌、真菌,也要注意識(shí)別。,(二)紅細(xì)胞形
46、態(tài)學(xué)診斷技巧: 1.RBC的Hb、網(wǎng)織RBC、MCV、MCH、MCHC及RBC 體積分布寬度(RDW)是判定貧血類(lèi)型重要依據(jù)。 (1)Hb/RBC比值:正常人:Hb/RBC比值為3gHb/L=100萬(wàn)RBC/ul即3:1。AA、溶血性貧血及繼發(fā)性貧血等屬此類(lèi)。>3:1者即為大細(xì)胞高色素性貧血,<3:1者為小細(xì)胞低色素性貧血。 (2)網(wǎng)織RBC是新生的RBC,可反應(yīng)造血機(jī)能的好壞。正常情況下為0.5-1.0%,代
47、償性反應(yīng)者多>5%。其網(wǎng)織紅細(xì)胞內(nèi)嗜堿性網(wǎng)織增多,代償性功能減低者,低于正常水平。多見(jiàn)于AA,但有不典型AA(1 / 4)患者可有網(wǎng)織紅細(xì)胞增高。網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)1000個(gè)紅細(xì)胞中有多少網(wǎng)織紅細(xì)胞,以其%數(shù)表示,是一個(gè)比值數(shù),不是絕對(duì)值。精確應(yīng)計(jì)算絕對(duì)值或流式細(xì)胞儀計(jì)數(shù)更為確切。 (3)MCV、NCH、MCHC反映RBC病理變化,可將貧血分為大細(xì)胞性貧血、正常細(xì)胞性貧血、小細(xì)胞低色素性貧血及單純小細(xì)胞性貧血(即小細(xì)胞性正常色素
48、性貧血)。,2.RBC形態(tài)學(xué)在檢驗(yàn)中易被忽視,觀察RBC形態(tài)一般以外周血涂片較為可靠。RBC形態(tài)與排列(如重疊、緡錢(qián)狀)與涂片技術(shù)、涂片部位及厚薄有很大關(guān)系。這點(diǎn)在鏡檢時(shí)應(yīng)予注意。即是合格涂片,RBC形態(tài)依然與涂片部位及厚薄等多種因素有關(guān): --如取涂片中心區(qū)域,RBC中心淡染,多> 1 / 3細(xì)胞面積大??; --取自涂片薄處或尾部,RBC形態(tài)誤給人以“球形”,失去雙凹盤(pán)形,中心淡然消失,所謂類(lèi)球形改變; --取厚片RBC則重疊堆
49、積,呈假“緡錢(qián)狀”,不便查清形態(tài); --玻片不清潔,油脂過(guò)多或骨髓脂肪過(guò)多,制片干燥不快,RBC則會(huì)形成人工的中心淡染區(qū)或空白區(qū)。,3.RBC形態(tài)及臨床意義: 正常紅細(xì)胞為直徑7.2-7.6mm,厚度2mm圓盤(pán)狀,兩面凹陷,中央較薄,著色較淺,在涂片中形態(tài)基本一致。 在貧血或有關(guān)疾病時(shí)紅細(xì)胞可出現(xiàn)異常,往往一張較滿(mǎn)意的血片,觀察紅細(xì)胞形態(tài),對(duì)貧血的性質(zhì)確定和某些疾病的診斷有一定的幫助。貧血在紅細(xì)胞形態(tài)中主要表現(xiàn)個(gè)體及群
50、體大小、形狀、血紅蛋白濃度的差異。,(1)大小不等(Anisocytosis)及形態(tài)異常(Poikilocytosis),由于骨髓紅系代償性增生旺盛,而產(chǎn)生大小不等的紅細(xì)胞及形態(tài)多樣化異常,常見(jiàn)有: 1)紅細(xì)胞顯著大小不等及形態(tài)異常如梨形、鈴形、少數(shù)卵圓形,常見(jiàn)于嚴(yán)重性貧血(包括繼發(fā)性貧血)及溶血性貧血。 2)紅細(xì)胞個(gè)體小,大小不等,一般形態(tài)異常及中心染色過(guò)淺,見(jiàn)于缺鐵貧、VitB6缺乏及慢性失血性貧血。
51、3)紅細(xì)胞個(gè)體大小,大小不等,異形,中心淡染過(guò)淺,出現(xiàn)靶形及小紅細(xì)胞,多為地中海貧血及某些血紅蛋白病。 4)紅細(xì)胞個(gè)體普遍增大,并呈大小不等,色素濃染,無(wú)中心淡染區(qū),多為巨幼細(xì)胞性貧血。,(2)多嗜性紅細(xì)胞(或網(wǎng)織紅細(xì)胞)(Polychro matcphiliomacrocyte,Reticalocyte)為胞體較大的成熟紅細(xì)胞,由于胞漿含有核糖核酸(Cytoplamia-RNA),淡灰藍(lán)色,若經(jīng)煌焦油藍(lán)染色即為網(wǎng)織紅細(xì)胞。根
52、據(jù)細(xì)胞嗜酸性物質(zhì)多少,按Hielmyer分類(lèi)法: 0型:胎幼紅細(xì)胞漿內(nèi)嗜堿性網(wǎng)狀;Ⅰ型:系卷絲狀網(wǎng)狀物質(zhì); Ⅱ型:網(wǎng)眼狀物質(zhì); Ⅲ型:不完全網(wǎng)眼狀物質(zhì); Ⅳ型:整個(gè)網(wǎng)絲斑點(diǎn)殘?bào)w。,(3)點(diǎn)彩紅細(xì)胞:晚幼紅細(xì)胞胞漿及成熟紅細(xì)胞中出現(xiàn)大小不等、分布不均的嗜堿性點(diǎn)彩物質(zhì)。在溶血性貧血、鉛中毒(因鉛使核苷酸酶受抑制和嘧啶與核苷酸酶缺乏患者增多)。(4)豪-周氏小體:在晚幼紅細(xì)胞漿內(nèi)和成熟紅細(xì)胞內(nèi)含單個(gè)或多個(gè)紫紅的包
53、含物為核碎片或染色體殘留物。此物具有DNA物質(zhì),是嚴(yán)重溶血、MDS、脾切除后等出現(xiàn)。(5)卡玻氏環(huán):在紅細(xì)胞內(nèi)具有淡紫紅色的環(huán)形或8字形環(huán)狀物,曾被認(rèn)為是核的殘余和一種豪周氏小體變種。但日前認(rèn)為是人工造成的,是退變細(xì)胞中凝集和變性的蛋白質(zhì),也有認(rèn)為含有組蛋白和鐵,相差鏡下則看不見(jiàn)。見(jiàn)于鉛中毒、溶貧、白血病、惡性瘧疾等。,4、特異性紅細(xì)胞形態(tài)改變:(1)刺狀細(xì)胞或據(jù)形細(xì)胞:在血細(xì)胞表面呈不規(guī)則的、較多的刺狀突出,呈鋸齒狀。加EDTA-
54、Na2更顯著。此細(xì)胞由膜質(zhì)改變所致;見(jiàn)于吸收不良反應(yīng)、肝病、脾切除后、PK缺乏性貧血、先天性缺乏β—脂蛋白血癥。(2)刺毛細(xì)胞:整個(gè)細(xì)胞表面有棘突狀突起,從皺縐圓盤(pán)形發(fā)展或皺縮球形,直至棘突消失,見(jiàn)于尿毒癥、PK缺乏癥、輸注低鉀庫(kù)血、胃癌、胃潰瘍出血等。(3)裂細(xì)胞:為大小不等、形態(tài)不規(guī)則、呈盔形、帶刺、三角碎片,多由于微血管堵塞、管腔狹小,紅細(xì)胞可塑性降低,RBC通過(guò)時(shí)被擠壓或纖維切割所致可見(jiàn)于微血管病性溶血、DIC、血栓性血小板
55、減少性紫癜、溶血性尿毒性綜合癥、嚴(yán)懲燒傷、心瓣膜溶血、行軍性Hb尿。,(4)靶形紅細(xì)胞:此細(xì)胞比政黨紅細(xì)胞薄,細(xì)胞表面積比其容積量相對(duì)較。靶點(diǎn)和周?chē)鶫B環(huán)缺乏連接橋。這種細(xì)胞對(duì)滲透脆性試驗(yàn)有較大低抗性,能耐受比政黨紅細(xì)胞更多的水分滲透入,使其成為球形乃至最后溶血之前則容積增大50%,見(jiàn)于地中海性貧血、Hb-S-c病、脾切除后及阻塞性肝病。因卵磷脂膽固醇?;D(zhuǎn)移酶減少或缺乏,使血清中膽固醇與卵磷脂積聚,影響了細(xì)胞膜的改變而致靶形細(xì)胞。(
56、5)淚滴狀紅細(xì)胞:此細(xì)胞形如淚滴狀、網(wǎng)球拍形、長(zhǎng)形或豆點(diǎn)狀。見(jiàn)于骨髓纖維化。,(6)球形紅細(xì)胞:此細(xì)胞胞體比正常的較小,濃染的圓球形,平均厚度增大(厚徑3.2mm),直徑縮?。?.3mm),MCV正常,中心淡染區(qū)消失,由于變形性差,故易發(fā)生溶血,正常人有20%)、獲得性球形紅細(xì)胞增多癥(如ABO血型不合引起新生兒溶血性貧血)。(7)橢圓形紅細(xì)胞:為卵圓形,如駱駝的紅細(xì)胞,此為紅細(xì)胞膜的缺陷。正常人70%,此病為顯性遺傳,男女均可,同等
57、遺傳,可能與RH因子有關(guān)。未成熟的紅細(xì)胞仍為圓形,而無(wú)此種改變。在出生后第3個(gè)月始出現(xiàn)明顯異常。約2%受孕者有輕度溶血現(xiàn)象,Hb多為正常(代償性)或減低(失代償性)。此種紅細(xì)胞在37℃孵育48小時(shí)可發(fā)生自溶,加葡萄糖和ATP即可糾正。,(8)口形紅細(xì)胞:此種細(xì)胞中央為中空裂隙,形如口形或橢圓形淡染區(qū),又因該細(xì)胞內(nèi)水分減少,故又稱(chēng)為干細(xì)胞。在37℃自溶加重,但加葡萄糖癥狀減輕,細(xì)胞內(nèi)G6PD和PK活性升高,但還原型谷光甘肽濃度旱很低,過(guò)度
58、失K和Na時(shí)異常增加。小量口形紅細(xì)胞增多癥增多見(jiàn)于:肝硬化、遺傳性口形紅細(xì)胞增多癥、輕度地中海貧血、鉛中毒、傳染性單核細(xì)胞增多癥、谷光甘肽過(guò)氧化物酶缺乏、惡性腫瘤及酒精中毒等。明顯增多見(jiàn)于有溶血性貧血的口形紅細(xì)胞增多癥。,(9)鐮形紅細(xì)胞(Drepanocyte):由于Hb-S的聚合作用,在缺氧情況下導(dǎo)致紅細(xì)胞變成鐮刀狀、細(xì)長(zhǎng)新月形、燕麥形等形狀。此種細(xì)胞被脾臟阻止破壞產(chǎn)生血管外溶血。多見(jiàn)于黑人Hb-S病,鐮變?cè)囼?yàn)是用還原劑偏重亞硫酸鈉
59、(具有奪氧作用)處理后,造成紅細(xì)胞的鐮變更明顯。此為診斷Hb-S方法之一。,(10)緡錢(qián)狀排列:紅細(xì)胞在有異常高分子蛋白環(huán)境中呈緡錢(qián)狀排列,多見(jiàn)于多發(fā)性骨髓瘤、華氏巨球蛋白血癥以及免疫球蛋白增多癥。,5.外周血中出現(xiàn)有核(巨)紅(幼粒)細(xì)胞意義:外周血中有核(巨)紅細(xì)胞的出現(xiàn)提示紅細(xì)胞成熟紊亂,是嚴(yán)重疾病的反應(yīng),見(jiàn)于: (1)血片中有幼紅、幼粒細(xì)胞及點(diǎn)彩紅細(xì)胞,Howell-jolly小體出現(xiàn),常見(jiàn)于:溶血性貧血、PNH、自身免疫性
60、貧血、新生兒溶血性貧血(Rh、ABO不和等)。嬰兒假白血病性貧血、巨幼細(xì)胞性貧血、紅細(xì)胞酶缺乏性貧血(PK、G6PD)、Hb病、不穩(wěn)定血紅蛋白以及極度貧血等。 (2)急慢性白血病、紅血病及紅白血病、MDS、骨髓纖維化以及其他一些骨髓增殖性疾病和真紅、血小板增多癥。 (3)晚期腫瘤反應(yīng)及臨床危象反應(yīng)。,(三)外周血血小板及巨核細(xì)胞形態(tài)學(xué)診斷技巧:1.血小板數(shù)、形態(tài)及聚集性:血涂片也是估計(jì)Plt計(jì)數(shù)主要依據(jù)。Plt油鏡視野密度(R
61、BC200±):正常:3-6個(gè)/HP,增高>6個(gè)至成堆/HP;減低: <3個(gè)/HP。形態(tài):正常、巨/ 微小/異型血小板。聚集性:不抗凝血應(yīng)表現(xiàn)血小板大多有聚集性。2.血小板增多或伴出現(xiàn)巨核細(xì)胞,見(jiàn)于原發(fā)性、特發(fā)性血小板增多癥、骨髓增殖性疾?。≧BC增多癥、骨髓纖維化、慢粒)、繼發(fā)性血小板增多癥(腫瘤或感染引起如腎衰、腎膿腫、脾切除后、肺癌等)、血小板增多的MDS、5q綜合癥。血小板減少有ITP(原發(fā)性)或繼發(fā)性血小板減
62、少性紫癜及MDS-血小板減少癥。此外,還有血小板無(wú)力癥。,外周血涂片檢查步驟:1.肉眼觀察,涂片面膜大小,厚薄是否適中,染色好壞。2.低倍鏡觀察全貌:(1)涂片及染色好壞。(2)了解白血病數(shù)(可大體校對(duì)WBC直接計(jì)數(shù)是否正確)。(3)了解白血病大致分布及其各白血病大致比值誤差重要因素,乍尾有無(wú)異常細(xì)胞。(4)選擇具有代表性的細(xì)胞鏡檢區(qū)域。,3.油鏡觀察:進(jìn)行WBC分類(lèi)計(jì)數(shù),觀察細(xì)胞形態(tài)比例有無(wú)巨大或異常細(xì)胞。血涂片對(duì)WBC
63、總數(shù)值正確性估計(jì):從低倍及油鏡中估計(jì)WBC數(shù)值及其分布。一般區(qū)分WBC數(shù)幾個(gè)等級(jí);(油鏡視野中RBC密度分散無(wú)重疊)4.正常范圍:WBC約為3-5個(gè)/視野(WBC數(shù)4-10*109 /L)低倍。5.正常限度以下(<4*109/L)(白細(xì)胞數(shù)可減少)WBC3個(gè)/視野,此級(jí)再分為輕度與明顯減少;6.正常高限度以上(>10*109/L)(白細(xì)胞數(shù)增多)。WBC10個(gè)/視野,也分為輕度、明顯、極度增多。此外與所測(cè)知WBC總數(shù)值做粗略對(duì)比。
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