醫(yī)院感染病原學(xué)

1、醫(yī)院感染病原學(xué),岳陽(yáng)市二人民醫(yī)院院感科 李義紅,2,人體正常微生物群,正常人體表和與外界相通的開放性部位存在的微生物群。一般不致病，有益無(wú)害包括細(xì)菌、病毒、真菌、衣原體、支原體等 以細(xì)菌的數(shù)量最多，因此通稱為正常菌群 原籍菌:固有菌群(常居菌),長(zhǎng)期寄住于皮膚粘膜, 在一定年齡和一定部位相對(duì)固定。 外籍菌:暫居菌,暫時(shí)寄生在皮膚粘膜上的來(lái)源 于外環(huán)境的非致病菌和潛

2、在致病菌。,,3,4,正常菌群對(duì)人體的作用,正常情況下正常菌群對(duì)宿主有利。1、菌群之間能相互制約而維持其微生態(tài)平衡， 通過(guò)爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和空間位置，產(chǎn)生代謝物 等來(lái)殺傷侵入的有害細(xì)菌。2、細(xì)胞成分或代謝產(chǎn)物能激發(fā)宿主防御機(jī)制的 發(fā)育。3、有些微生物能在腸道內(nèi)合成一些維生素。4、生物屏障作用。,5,細(xì)菌的定植和抗定植,細(xì)菌定植條件：黏附能力 滿足生活必需的條件

3、 逃避或?qū)谷梭w的防御 一定數(shù)量正常菌群的抗定植：正常菌群能相對(duì)的保持穩(wěn) 定，新來(lái)的微生物不易定植,6,細(xì)菌的定植和抗定植,定植抵抗力：一種已定植的細(xì)菌具有抑制其他 細(xì)菌定植的能力去污染：減少或消滅患者的一部分正常菌群或 定植細(xì)菌 保

4、護(hù)性隔離→防止外源性感染 控制定植菌→防止內(nèi)源性感染 如復(fù)方新諾明抑制腸道需氧菌，可扶 植厭氧菌的定植抵抗力水平。,7,常見醫(yī)院感染病原體,按來(lái)源分：內(nèi)源性、外源性大部分為人體正常菌群的轉(zhuǎn)移菌或條件致病菌，對(duì)某些環(huán)境有特殊適應(yīng)性（如表葡和不動(dòng)桿菌，可粘附于塑料表面）常為多重耐藥菌株:對(duì)抗生素有較強(qiáng)較廣耐藥常侵犯免疫功能低下的宿主：如老年人

5、；血液病、肝硬化、糖尿病、惡性腫瘤等基礎(chǔ)疾病的患者；接受各種侵入性操作、器官移植等；長(zhǎng)期應(yīng)用廣譜抗菌藥物、免疫抑制劑、激素等。,8,常見醫(yī)院感染病原體,葡萄球菌屬,凝固酶陰性：表葡、腐生葡,凝固酶陽(yáng)性：金葡,,金葡是醫(yī)院感染的重要病原菌，常見感染部位有下呼吸道、外科傷口、導(dǎo)管相關(guān)感染、燒傷部位、泌尿道等。途徑：污染的手。從有損傷的皮膚和黏膜進(jìn)入人體，也可因食入含金葡菌腸毒素或吸入染菌塵埃而致病?？梢酝ㄟ^(guò)患者之間直接或間接接觸引起醫(yī)院感

6、染暴發(fā)。,9,常見醫(yī)院感染病原體,肺炎鏈球菌 自然界廣泛分布，鼻腔中，多數(shù)不致病 能否致病與莢膜關(guān)系密切 主要引起大葉性肺炎及氣管炎、中耳炎、腦 膜炎、胸膜炎、心內(nèi)膜炎、敗血癥等 耐青霉素肺炎鏈球菌（PRSP）,10,常見醫(yī)院感染病原體,腸球菌 腸道正常菌群的一部分，G+ 醫(yī)院感染最常見的為糞腸球菌，占80-90%，其次是屎腸球菌、鳥腸球菌。 可造成泌尿道、血液、心內(nèi)膜、傷

7、口及下呼吸道等部位感染。最常見是尿路感染。 條件致病菌。部分肺部感染為混合感染。,11,常見醫(yī)院感染病原體,埃希菌屬 大腸埃希菌是最常見的臨床分離菌，也是腸道G-桿菌群的主要成員。 大腸埃希菌居醫(yī)院感染泌尿道感染病原菌首位，也是G-菌敗血癥最常見的病原菌。 在腸道內(nèi)一般不致病，在免疫力低下的患者可發(fā)生易位引起內(nèi)源性感染；可通過(guò)患者之間及工作人員與患者之間的接觸、呼吸道氣溶膠的吸入或各種侵入性操作引起外源性感染。

8、 可引起泌尿道、腹腔、膽道、血液、 下呼吸道等部位的感染。,考點(diǎn),12,常見醫(yī)院感染病原體,克雷伯菌屬 G-桿菌，內(nèi)毒素是主要致病物質(zhì)。是腸道及上呼吸正常菌群的組成部分。 在住院患者中易發(fā)生定植，尤上呼吸道極常見 可通過(guò)接觸患者或呼吸機(jī)等醫(yī)療器械傳播。 不注意洗手，手可成傳播感染的重要方式 可引起呼吸道、泌尿道、傷口及血液等部位感染，克雷伯菌肺炎易形成膿腫和 壞死。肺克還可引起腸炎和嬰兒

9、 腦膜炎及敗血癥。,13,常見醫(yī)院感染病原體,腸桿菌屬 陰溝腸桿菌、產(chǎn)氣腸桿菌、聚團(tuán)腸桿菌等，是腸桿菌科中最常見的環(huán)境菌群，但不是腸道的常居菌群。 陰溝是呼吸道及消化道正常菌群的組成部分 產(chǎn)氣腸桿菌是產(chǎn)生AmpC型酶的重要菌之一2009天津薊縣婦幼保健院新生兒感染,14,常見醫(yī)院感染病原體,假單胞菌屬 非發(fā)酵、G-需氧桿菌銅綠假單胞菌：俗稱綠膿，產(chǎn)多種水溶性色素，易造成機(jī)會(huì)性感染，可單一/混合感染，

10、可發(fā)生在人體任何部位和組織，常見于燒傷或創(chuàng)傷部位、中耳、角膜、尿道和呼吸道嗜麥芽窄食單胞菌：常呈多重耐藥，對(duì)包括碳青霉烯類在內(nèi)的β-內(nèi)酰胺類、氟喹諾酮類、氨基糖苷類等都可表現(xiàn)為耐藥，對(duì)泰能天然耐藥,15,常見醫(yī)院感染病原體,不動(dòng)桿菌屬 需氧G-菌，基本為腐生菌，廣泛存在于自然界，新鮮水標(biāo)本中100%有不動(dòng)桿菌生長(zhǎng)。 常見鮑曼不動(dòng)桿菌，易在潮濕環(huán)境中生存，可引起泌尿道、呼吸道、傷口及血液等感染，主要通過(guò)各種污染器械及手傳播。

11、ICU是不動(dòng)桿菌引起感染的多發(fā)區(qū)，病死率較高，與ICU患者年齡大、病情重、機(jī)體免疫力較低、住院時(shí)間長(zhǎng)、多有侵襲性操作以及廣泛使用皮質(zhì)激素和抗生素有關(guān)。,16,常見醫(yī)院感染病原體,變形桿菌屬 自然界分布廣泛(土壤、污水、垃圾)，普通、奇異變形桿菌引起人的原發(fā)性和繼發(fā)性感染，是泌尿道感染主要病原菌之一，僅次于大腸埃希菌，可由此產(chǎn)生菌血癥，還常引起傷口、呼吸道等多種感染。,17,常見醫(yī)院感染病原體,嗜肺軍團(tuán)菌 廣泛存在于自然水體與自來(lái)

12、水等環(huán)境中 常見醫(yī)院感染類型：肺炎 感染途徑：吸入帶菌氣溶膠 易感因素：吸煙、慢阻肺、飲酒過(guò)度、使用空調(diào)設(shè)施、使用腎上腺皮質(zhì)激素或其他免疫抑制劑、年老等。,18,常見醫(yī)院感染病原體,分枝桿菌 人型和牛型結(jié)核分枝桿菌是熟知的致病菌 非結(jié)核分枝桿菌(NTM)廣泛分布于自然界，醫(yī)院環(huán)境表面、醫(yī)療器械及其清洗用水中存在多種非結(jié)核分枝桿菌真菌 白假絲酵母菌、新型隱球菌、曲霉菌 免疫力低下或

13、長(zhǎng)期使用廣譜抗菌藥物時(shí)易發(fā)生感染,19,常見醫(yī)院感染病原體,病毒 常見：HBV、HCV、HIV、CMV SARS相關(guān)病毒 其他：流感病毒、麻疹病毒、柯薩奇病毒、水痘-帶狀皰疹病毒等 可經(jīng)血液-體液傳播，也可經(jīng)飛沫傳播，還可經(jīng)器官移植傳播。,20,醫(yī)院感染病原體變遷,20世紀(jì)40年代前 G+球菌20世紀(jì)60年代 G-桿菌取代G+球菌近年來(lái) 頭孢菌素大量應(yīng)用以及侵入性操作增多，在G-桿菌得到有效

14、控制的同時(shí)，G+球菌呈上升趨勢(shì)，同時(shí)真菌比例增加，病毒、衣原體也成為醫(yī)院感染的重要病原體。,21,病原體的耐藥性,細(xì)菌耐藥性：致病微生物對(duì)抗菌藥物作用的耐受性或?qū)剐?，是抗菌藥物、?xì)菌本身及環(huán)境共同作用的結(jié)果。 天然耐藥 因染色體DNA突變所致 獲得性耐藥 大多由質(zhì)粒、噬菌體及其他遺傳 物質(zhì)攜帶外來(lái)的DNA片段所致交叉耐藥：細(xì)菌對(duì)同一

15、作用機(jī)制藥物中不同種 類的藥物同時(shí)耐藥多重耐藥：細(xì)菌對(duì)不同作用機(jī)制藥物同時(shí)耐藥,,考點(diǎn),22,細(xì)菌耐藥的機(jī)制,產(chǎn)生鈍化酶，使抗生素滅活或結(jié)構(gòu)改變,靶位發(fā)生突變，抗生素的親和力下降,細(xì)胞膜通透性降低，抗生素進(jìn)入減少或進(jìn)入細(xì)菌的抗生素被主動(dòng)排除體外（外排泵）,細(xì)菌菌膜形成,23,耐藥菌— MRSA,MRSA定義：凡對(duì)甲氧西林、苯唑西林、頭孢西丁耐藥，或青霉素結(jié)合蛋白2a（PBP2a）陽(yáng)性、me

16、cA基因陽(yáng)性的金黃色葡萄球菌定義為耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）MRSA應(yīng)視為對(duì)所有β內(nèi)酰胺類抗生素耐藥1961年英國(guó)首次報(bào)道MRSA,考點(diǎn),24,耐藥菌— VRE,VRE--耐萬(wàn)古霉素腸球菌1988年首次分離于英國(guó)倫敦VRE的出現(xiàn)與近年臨床大量使用廣譜抗生素和糖肽類抗生素有關(guān)體外證明，VRE耐藥基因可輕易整合到金葡菌，產(chǎn)生一種難治的耐萬(wàn)古霉素金葡菌,25,耐藥菌—ESBLs,ESBLs—產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶是由質(zhì)粒介

17、導(dǎo)的、能水解氧亞氨基β-內(nèi)酰胺類抗生素的一類β-內(nèi)酰胺酶，對(duì)β-內(nèi)酰胺類抗生素具有廣泛水解活性，包括青霉素類、氧亞氨基頭孢菌素和單酰胺類，通常不水解7-α-甲氧基頭孢菌素和碳青霉烯類，其活性可被β-內(nèi)酰胺酶抑制劑抑制。1983年德國(guó)首次報(bào)道肺炎克雷伯、產(chǎn)酸克雷伯、大腸埃希菌最常見,26,耐藥菌—產(chǎn)KPC酶細(xì)菌,KPC—碳青霉烯酶KPC可水解包括碳青霉烯類抗菌藥物在內(nèi)的所有β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物，但對(duì)頭孢他啶和頭孢西丁相對(duì)較弱。20

18、01年美國(guó)北卡羅來(lái)納州首次報(bào)道，我國(guó)2007年報(bào)道了首株產(chǎn)KPC的肺克產(chǎn)KPC酶的細(xì)菌包括肺克、其他腸桿菌(如大腸埃希菌、產(chǎn)酸克雷伯、沙門菌、腸桿菌屬、奇異變形桿菌等)、銅綠等。,27,耐藥菌— MDR-AB,多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌--同時(shí)耐3種以上不同類型的抗菌藥物的鮑曼。1991年美國(guó)首次報(bào)道對(duì)碳青霉烯類抗菌藥物耐藥的鮑曼（CRAB）,28,耐藥菌,多重耐藥銅綠假單胞菌 耐藥機(jī)制復(fù)雜，主要與以下因素有關(guān)：①細(xì)菌產(chǎn)生抗菌活

19、性酶，如β-內(nèi)酰胺酶、氨基糖苷鈍化酶等；②細(xì)菌改變抗菌藥物作用的靶位，如PBPs、DNA旋轉(zhuǎn)酶等結(jié)構(gòu)發(fā)生改變；③外膜通透性降低；④生物膜形成；⑤主動(dòng)泵出系統(tǒng)等。MRCNS：耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌PRSP：耐青霉素肺炎鏈球菌MDR-TB：多重耐藥結(jié)核分枝桿菌,29,標(biāo)本采集有關(guān)的生物安全措施,戴手套、穿工作服，必要時(shí)戴面罩或護(hù)目鏡容器必須防漏。標(biāo)本運(yùn)送時(shí)應(yīng)密封、防滲嚴(yán)禁將出現(xiàn)滲漏的標(biāo)本送檢，應(yīng)盡量重新采集標(biāo)本，將滲漏容器按

20、感染性醫(yī)療廢物處置。嚴(yán)禁將針頭暴露的注射器送到實(shí)驗(yàn)室，應(yīng)將注射器中的標(biāo)本注入無(wú)菌密封的容器中送檢。,30,標(biāo)本采集的基本原則,應(yīng)在疾病急性期或早期，如有可能盡量在用抗菌藥物前采集標(biāo)本收集真正病灶處的標(biāo)本，避免臨近正常菌群的污染。標(biāo)本采集要足量，以滿足檢驗(yàn)的要求。 選擇合適的取樣容器。 檢驗(yàn)申請(qǐng)單上應(yīng)提供患者的相關(guān)資料，包括病人姓名、病房、住院或門診號(hào)、標(biāo)本來(lái)源、采集部位和采集時(shí)間等。,31,標(biāo)本的運(yùn)送與保存,所有標(biāo)本采集后立即

21、送檢，最好在2h內(nèi)。如不能及時(shí)送檢應(yīng)放在相應(yīng)條件保存。運(yùn)送時(shí)間較長(zhǎng)者可使用運(yùn)送培養(yǎng)基。 保存的方式主要依賴于運(yùn)送培養(yǎng)基的種類及要檢測(cè)的病原體。需檢測(cè)志賀菌、淋病奈瑟菌、腦膜炎奈瑟菌和流感嗜血桿菌等病原菌的標(biāo)本，如腦脊液、生殖道、眼部、內(nèi)耳道的標(biāo)本，禁止冷藏。用于檢測(cè)病毒的標(biāo)本應(yīng)儲(chǔ)存于4℃。尿液、痰液、拭子及插管等標(biāo)本做普通細(xì)菌培養(yǎng)而無(wú)法及時(shí)送檢時(shí)，可冷藏保存。,32,血培養(yǎng)標(biāo)本的采集,采血指征 一般患者出現(xiàn)可疑菌血癥應(yīng)采集血液培養(yǎng)

22、：發(fā)熱（≥38℃）或低溫（≤36℃），寒戰(zhàn)，白細(xì)胞增多（計(jì)數(shù)大于10.0×109/L，特別有“核左移”時(shí)），皮膚黏膜出血、昏迷、多器官衰竭、血壓降低，C反應(yīng)蛋白升高及呼吸加快，粒細(xì)胞減少、血小板減少等。 新生兒可疑菌血癥，應(yīng)該同時(shí)做尿液和腦脊液培養(yǎng)。,考點(diǎn),33,血標(biāo)本的采集,采血時(shí)間 盡量在使用抗菌藥物之前進(jìn)行。對(duì)間歇性寒戰(zhàn)或發(fā)熱患者應(yīng)在寒戰(zhàn)或體溫高峰到來(lái)之前0.5-1h采集血液，或于寒戰(zhàn)或發(fā)熱后1h進(jìn)行。 當(dāng)懷

23、疑為急性感染性心內(nèi)膜炎時(shí)，應(yīng)立即進(jìn)行血培養(yǎng)，在30min內(nèi)采集1-2套血標(biāo)本，然后立即進(jìn)行抗菌藥物的經(jīng)驗(yàn)治療。對(duì)于亞急性感染性心內(nèi)膜炎，則推薦在30-60min內(nèi)采集兩次各2套血標(biāo)本，然后才開始抗菌藥物的經(jīng)驗(yàn)治療。,考點(diǎn),34,血標(biāo)本的采集,采血套數(shù)及采血量對(duì)于成人患者，要求每次采集2-3套標(biāo)本，每套應(yīng)包括一個(gè)需氧培養(yǎng)瓶和厭氧培養(yǎng)瓶。 對(duì)于目前普遍采用的自動(dòng)化血培養(yǎng)系統(tǒng)，成人采血20ml，分裝在兩個(gè)瓶?jī)?nèi)，各分配10ml。當(dāng)采血量不足

24、20ml時(shí)，應(yīng)先注入需氧瓶。對(duì)于嬰幼兒患者，采血量不超過(guò)患者總血量的1%。通常兒童采血1-5ml。,考點(diǎn),35,血標(biāo)本的采集,皮膚消毒程序（1）使用安爾碘溶液直接消毒皮膚，達(dá)到該消毒劑規(guī)定要求的時(shí)間即可。（2）嚴(yán)格執(zhí)行三步法：①75%酒精擦拭靜脈穿刺部位待30秒以上。②1%-2%碘酊作用30s或10%碘伏1-2min，從穿刺點(diǎn)向外畫圈消毒，至消毒區(qū)域直徑達(dá)3cm以上。③75%酒精脫碘：對(duì)碘過(guò)敏的患者，用75%酒精消毒1min，待酒

25、精揮發(fā)干燥后采血。,36,血標(biāo)本的采集,靜脈穿刺和培養(yǎng)瓶接種程序 ①在穿刺前或穿刺期間，為防止靜脈滑動(dòng)，可戴乳膠手套固定靜脈，不可接觸穿刺點(diǎn)。 ②用注射器無(wú)菌穿刺取血后直接注入血培養(yǎng)瓶，勿換針頭，或嚴(yán)格按廠商推薦的方法采血。 ③血標(biāo)本接種到培養(yǎng)瓶后，輕輕顛倒混勻以防血液凝固。血培養(yǎng)使用SPS抗凝劑，不得用肝素、EDTA、枸櫞酸鈉抗凝。,37,血標(biāo)本的采集,注意事項(xiàng)1、最好從靜脈采血，不建議從動(dòng)脈采血。2、一個(gè)靜脈穿刺點(diǎn)只

26、能采集1套血標(biāo)本，采集第2套血標(biāo)本應(yīng)該選擇第2個(gè)靜脈穿刺點(diǎn)。一次靜脈采血注入多個(gè)培養(yǎng)瓶中應(yīng)視為單份血培養(yǎng)。3、常規(guī)血培養(yǎng)不宜從靜脈導(dǎo)管或靜脈留置裝置取血，除非懷疑導(dǎo)管相關(guān)血流感染4、送檢的標(biāo)本所標(biāo)注的內(nèi)容應(yīng)包括病人基本信息、采血時(shí)間和采血位置，不要把標(biāo)簽貼在血培養(yǎng)瓶的條形碼上，否則儀器無(wú)法識(shí)別。5、采血后應(yīng)該立即送檢，如不能立即送檢，需室溫保存，切勿冷藏。,38,靜脈導(dǎo)管標(biāo)本的采集,采集原則保留導(dǎo)管：至少2套血培養(yǎng)，經(jīng)外周靜脈采

27、血1套，從導(dǎo)管中心或輸液港隔膜無(wú)菌采血1套 拔除導(dǎo)管：采2套外周血培養(yǎng)，無(wú)菌方法拔出導(dǎo)管取導(dǎo)管尖端進(jìn)行培養(yǎng),39,靜脈導(dǎo)管標(biāo)本的采集,采集方法導(dǎo)管尖端：消毒導(dǎo)管周圍皮膚，拔出導(dǎo)管，無(wú)菌剪刀取約5cm長(zhǎng)，置無(wú)菌容器中送檢經(jīng)留置導(dǎo)管采血：消毒，拔去導(dǎo)管蓋，消毒針芯。先接無(wú)菌注射器抽吸至少0.5~1ml血棄去，另取一直無(wú)菌注射器抽血進(jìn)行血培養(yǎng)，然后封管。,40,靜脈導(dǎo)管標(biāo)本的采集,注意事項(xiàng) 送檢的導(dǎo)管長(zhǎng)度保持約5c

28、m，不要差 距太大 樣本要標(biāo)注采集時(shí)間和部位，及時(shí)送 檢，同時(shí)送檢外周血和導(dǎo)管血時(shí)要分 別標(biāo)注，同時(shí)送檢,41,上呼吸道標(biāo)本的采集,鼻拭子無(wú)菌拭子入鼻腔內(nèi)至少1cm后采集標(biāo)本取樣時(shí)用力旋轉(zhuǎn)拭子并停留10s，退出拭子，放入運(yùn)送培養(yǎng)基或無(wú)菌試管標(biāo)記病人信息，須注明鼻內(nèi)有無(wú)病灶，及時(shí)送檢,42,上呼吸道標(biāo)本的采集,咽拭子在扁桃體部位、咽喉壁及口腔內(nèi)炎癥、潰瘍或滲出部位采樣時(shí)，應(yīng)先

29、清水漱口觀察病人咽喉壁和扁桃體，定位炎癥和滲出物區(qū)域壓舌板輕壓舌面，無(wú)菌拭子在定位區(qū)域反復(fù)刷刮，拭子不要觸及頰腔側(cè)壁或牙齒，置無(wú)菌試管或運(yùn)送培養(yǎng)基,43,下呼吸道標(biāo)本的采集,咳痰清晨第一口痰為宜抗菌藥物應(yīng)用前，先清水漱口，有假牙應(yīng)取下無(wú)痰可用3％～5％NaCl 5ml霧吸約5min導(dǎo)痰易受口咽部定植菌污染,44,下呼吸道標(biāo)本的采集,氣管內(nèi)抽吸物支氣管鏡采集 支氣管沖洗液 肺泡灌洗液

30、 防污染毛刷采樣經(jīng)氣管穿刺吸引物經(jīng)胸壁針刺吸引物開胸肺活檢,45,下呼吸道標(biāo)本的采集,注意事項(xiàng)盡快（<2h）送至實(shí)驗(yàn)室。如不能及時(shí)送達(dá)，應(yīng)將標(biāo)本暫存于4℃，但放置時(shí)間不可超過(guò)24h。由于上呼吸道定植菌的干擾，在選擇痰培養(yǎng)檢查時(shí)應(yīng)該同時(shí)痰涂片檢查，每低倍視野下白細(xì)胞＜10個(gè)且上皮細(xì)胞＞25個(gè)，應(yīng)重留標(biāo)本。對(duì)于普通細(xì)菌性肺炎，痰標(biāo)本送檢每天1次，連續(xù)2～3天。不建議24h內(nèi)多次采集，除非痰液外觀性狀

31、出現(xiàn)改變。,46,大便標(biāo)本的采集,自然排便：成型糞便需要豌豆大小，液體糞便的量至少約5ML，取糞便中含膿血或粘液的部分置清潔容器中送檢。容器要帶密封蓋。直腸拭子：無(wú)菌拭子插入肛門2～4cm，在肛門括約肌處柔和轉(zhuǎn)動(dòng)拭子，可見拭子上有明顯的糞便標(biāo)本，置運(yùn)送培養(yǎng)基中送檢。(不太適合成人，不適于檢查寄生蟲、毒素和病毒抗原),47,尿液標(biāo)本的采集,癥狀明顯的病人（如尿急、尿頻、尿痛），一份標(biāo)本就已足夠，治療48-72小時(shí)后再采集第二份標(biāo)本。對(duì)于

32、癥狀不明顯的病人，需采集2-3份標(biāo)本。懷疑腎結(jié)核時(shí)，應(yīng)連續(xù)3天采集晨尿。普通培養(yǎng)10～20ml，找抗酸桿菌需30～50ml。多次收集或24小時(shí)尿不能用作培養(yǎng)。申請(qǐng)單上必須注明病人癥狀是否明顯，這對(duì)于定量培養(yǎng)分析非常重要，尤其只有少量尿液標(biāo)本。室溫保存時(shí)間不超過(guò)2h，4℃冷藏不得超過(guò)8h。,48,尿液標(biāo)本的采集,清潔中段尿盡量取早晨第一次尿液，置無(wú)菌容器加蓋送檢棄去開始流出的尿液，以沖刷尿道口的細(xì)菌，取能代表膀胱部位病原菌的中

33、段尿女性病人：收集標(biāo)本前用清洗液沖洗干凈，從前向后仔細(xì)擦洗尿道區(qū)域男性病人：翻開包皮并清洗尿道口,49,尿液標(biāo)本的采集,恥骨上膀胱穿刺尿一次性導(dǎo)尿尿液留置導(dǎo)尿管尿液用75%酒精消毒導(dǎo)尿管外部，無(wú)菌注射器插入導(dǎo)尿管吸取尿液送檢。不要從尿袋中采集尿液，也不要把導(dǎo)尿管與尿袋拔開后收集尿液進(jìn)行培養(yǎng),50,傷口分泌物的采集,開放性感染和已破潰的化膿灶采集前先用無(wú)菌生理鹽水沖洗表面污染菌，用滅菌拭子采膿液及病灶深部分泌物；如污染嚴(yán)重，可

34、取感染部位下的組織送檢切口：取分泌物，有時(shí)可取沾有分泌物的最內(nèi)層敷料置滅菌容器內(nèi)送檢。瘺管：滅菌棉拭子擠壓瘺管，棄去前端膿液后用滅菌容器收集膿液。燒傷：清創(chuàng)，以無(wú)菌棉拭子直接采取多部位創(chuàng)面膿性分泌物置無(wú)菌試管中送檢。,51,傷口分泌物的采集,閉合性膿腫皮膚消毒后，用無(wú)菌注射穿刺抽取膿液或分泌物送檢，有時(shí)也可將沾有膿液的最內(nèi)層敷料放入無(wú)菌平皿內(nèi)送檢。疑為厭氧菌感染時(shí)，取材后立即將注射器內(nèi)空氣排空，將針頭插入橡皮塞內(nèi)，及時(shí)送檢。,

35、52,傷口分泌物的采集,敷用藥物2h內(nèi)和燒傷12h內(nèi)不應(yīng)采集標(biāo)本皮膚消毒對(duì)培養(yǎng)結(jié)果至關(guān)重要，采集標(biāo)本時(shí)應(yīng)注意分泌物的性狀、色澤和氣味深部或粘膜附近的感染應(yīng)同時(shí)做需氧和厭氧培養(yǎng)采集標(biāo)本后及時(shí)送檢，如1h內(nèi)不能送檢應(yīng)冷藏厭氧培養(yǎng)要注意：避免正常菌群污染；由采集至接種盡量避免接觸空氣，最好以針筒直接由病灶處抽取標(biāo)本，采取完畢立即送檢,53,腦脊液的采集,腰椎穿刺后，采集腦脊液3～5ml于3個(gè)無(wú)菌小瓶或試管中，每管1～2ml，分別進(jìn)行微