耐甲氧西林金黃色葡萄球菌mrsa檢測熒光pcr法

1、上海之江生物科技股份有限公司Shanghai ZJ Bio-Tech Co., Ltd.,耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA) 檢測（熒光PCR法）,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,金葡/表葡/腐生,致病性強,耐甲氧西林金葡,葡萄球菌,金黃色葡萄球菌,MRSA,1. MRSA背景資料——What Is MRSA?,金黃色葡萄球菌致病性,1、金黃色葡萄球菌是人類化膿感染中最常見的病原菌 2、可引起局部化膿感染，也可引

2、起肺炎、偽膜性腸炎、心包炎等，甚至嚴重到敗血癥、膿毒癥等全身感染。 3、 其致病的強弱取決于其產(chǎn)生毒素和侵襲性酶 溶血毒素 殺白細胞素 血漿凝固酶 腸毒素,金葡菌的院內(nèi)感染,手術(shù)切口感染各種插管感染下呼吸道感染尿路感染胃腸感染皮膚和軟組織感染血液感染,病人往往抵抗力低下正常醫(yī)療操作可能導致病人的正常免疫屏障受損接受化療、激素治療等治療容易

3、出現(xiàn)免疫力迅速降低不合理大量抗生素治療容易導致菌群失調(diào)醫(yī)院是病原體相對集中的環(huán)境菌群交叉感染等,SA VS MRSA — 耐藥的產(chǎn)生機制,一種特殊蛋白的產(chǎn)生低親和力的青霉素結(jié)合蛋白PBP2α,mecA基因 PBP2α 耐藥性,,,金葡的耐藥性,STAPHYLOCOCCI,Coagulase Negative Staphylococci,S. aureus,MSSA,MRSA,,,,,對于MRS

4、A萬古霉素常是治療的唯一藥物，而萬古霉素具有很強的副作用，易導致病人出現(xiàn)肝腎問題。同時，萬古霉素的使用會誘發(fā)耐萬古霉素金葡（VRSA）的產(chǎn)生，致使尤其引起的各種感染發(fā)展到無藥可用的地步。因而在未確定是耐藥性金葡感染前需特別注意慎重用藥。,近年在南歐部分國家和英國MRSA在金葡菌感染中的檢出率在大型醫(yī)院達到了30％-50％。在德國，1996-2006年間MRSA的感染率不斷增長達到了20％-22％，德國的一所大型教學醫(yī)院(kath—ar

5、inen hospita1)MRSA感染的病例在1994—2003年間上升了277％,國外,SA院內(nèi)攜帶率普查—北京某三甲醫(yī)院,SA院內(nèi)現(xiàn)狀,SA耐藥率現(xiàn)狀,MRSA,《多重耐藥菌醫(yī)院感染預防與控制技術(shù) 指南（試行）》,2011年國家衛(wèi)生部出臺文件，為了進一步加強多重耐藥菌醫(yī)院感染預防與控制 ，制定了,MRSA,醫(yī)療機構(gòu)應積極開展常見多重耐藥菌的監(jiān)測。對多重耐藥菌感染患者或定植高?；颊咭M行監(jiān)測，及時

6、采集有關(guān)標本送檢，開展主動篩查，以及時發(fā)現(xiàn)、早期診斷多重耐藥菌感染患者和定植患者。,,生化鑒定（乳膠凝集） VS PCR快速檢測,金葡菌鑒定：,耐藥性鑒定：,藥敏試驗（K-B法） VS PCR快速檢測,金葡傳統(tǒng)臨床鑒定方法,其他方法：細菌鑒定儀,,,,培 養(yǎng),分離培養(yǎng),藥敏紙片,1 day,2 day,3 day,乳膠凝集實驗,0 day,,取標本,取標本,,PCR,快速PCR操作流程,2Hour~4Hour ！,如何用PCR

7、檢測SA&MRSA？,PCR檢測,Nuc —,Nuc +,非SA,MSSA,MRSA,mecA—,mecA+,檢測判讀流程,Nuc FAM熒光標記mecA HEX熒光標記,www.themegallery.com,本試劑盒的臨床應用方向,,,,臨床應用,質(zhì)量第一 服務第一,本產(chǎn)品的檢測優(yōu)點,1、公認的篩查“金標準” 2002年美國臨床實驗室標準化委員會（NCCLS）指出金黃色葡萄球菌一旦檢出mecA基因即可

8、定為MRSA。PCR法檢測mecA基因被公認為MRSA篩查檢測“金標準”。2、特異性高 現(xiàn)已明確，大量產(chǎn)生的一種新的青霉素結(jié)合蛋白-PBP2a是葡萄球菌對甲氧西林耐藥的主要原因。mecA基因是PBP2a的編碼基因，只存在于葡萄球菌中，因此mecA基因可作為耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的分子標志。熒光PCR方法就是通過直接檢測細菌染色體上的mecA基因來確定是否為耐甲氧西林菌株，不受藥敏實驗條件的影響。3、檢測時間短 正確快速

9、地檢測出MRSA是尋找有效的抗菌藥物和控制MRSA院內(nèi)感染的關(guān)鍵。熒光PCR方法實驗檢測時間在3個小時以內(nèi)，當天知道檢測結(jié)果。而目前其他檢測方法需2-3天的細菌培養(yǎng)，使檢測時間延長，不利于及時調(diào)整使用抗生素治療方案和院內(nèi)感染控制。,質(zhì)量第一 服務第一,臨床監(jiān)測方案,1、 入院篩查 對入院患者進行MRSA篩查，并采取有效的接觸預防措施，是控制MRSA擴散的最有效手段。 對住院病人（尤其是ICU及燒傷科/

10、感染科/呼吸科/老干部科等）入院時應進行MRSA檢測，陽性者考慮在相對隔離。（美國加利福尼亞，伊利諾，新澤西，賓夕法尼亞，華盛頓，肯塔基等16個州政府先后立法，要求所有住院患者強制性檢測，以減少院內(nèi)感染，提高病床周轉(zhuǎn)率，減低醫(yī)療資源的支出）。2、 指導患者用藥 治療過程中應定期監(jiān)測，以便及時調(diào)整抗生素及治療方案（萬古霉素是首選藥物）。治療過程出現(xiàn)并發(fā)感染，需要定期檢測，檢測對象選擇感染部位。,本試劑盒的臨床應用方向,1、治

11、療性應用： 痰液、血標本：即時檢測，快速診斷金黃色葡萄球菌及其耐藥性。如：菌血癥，敗血癥等。 感染病灶標本（傷口分泌物、咽拭子、痰等）：快速檢測金黃色葡萄球菌及其耐藥性。如：肺炎、傷口感染等。,2、預防性應用： 鼻拭子標本：進入ICU病房，進入手術(shù)易感科室病房（骨科、外科等）前的檢測，避免院內(nèi)感染。,產(chǎn)品應用,國內(nèi)首個獲得SFDA注冊號的MRSA PCR法檢測試劑盒,臨床開展醫(yī)院：浙江大