2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、,,生化生產(chǎn)工藝課程教案,2006年5月,胡斌杰,一、細(xì)胞對氧的需求,1、三個(gè)基本概念,好氣性微生物的生長發(fā)育和代謝活動(dòng)都需要消耗氧氣,因?yàn)楹脷庑晕⑸镏挥醒醴肿哟嬖谇闆r下才能完成生物氧化作用。因此,供氧對需氧微生物是必不可少的,在發(fā)酵過程中必須供給適量無菌空氣,才能使菌體生長繁殖積累所需要的代謝產(chǎn)物。而需氧微生物的氧化酶系是存在于細(xì)胞內(nèi)原生質(zhì)中,因此,微生物只能利用溶解于液體中的氧。發(fā)酵液中溶解氧的多少,一般以溶解氧系數(shù)表示。

2、由于各種好氣微生物所含的氧化酶體系(如過氧化氫酶、細(xì)胞色素氧化酶、黃素脫氫酶、多酚氧化酶等)的種類和數(shù)量不同,在不同環(huán)境條件下,各種需氧微生物的吸氧量或呼吸程度是不同的。,飽和溶氧濃度: 在一定溫度和壓力下,空氣中的氧在水中的溶解度。(mol/m3)例:P111(第二自然段),比耗氧速率(呼吸強(qiáng)度): 單位質(zhì)量的干細(xì)胞在單位時(shí)間內(nèi)消耗氧的量molO2/(kg干細(xì)胞·s )。

3、用Qo2 表示。,臨界溶氧濃度: 好氧性微生物生長繁殖所需要的最低溶解氧的濃度。(mol/m3),攝氧率: 指單位體積培養(yǎng)液在單位時(shí)間內(nèi)的消耗氧的量,以 r 表示,單位為[molO2/m3·s] 。,2、攝氧率與呼吸強(qiáng)度之間的關(guān)系,r=Qo2·X式中: r --- 微生物耗氧速率[molO2/(m3·s)]; Qo2---菌

4、體呼吸強(qiáng)度(比耗氧速率), molO2/(kg干細(xì)胞·s ) ; X ---發(fā)酵液中菌體濃度,(kg/m3);,3、注意點(diǎn)(P115),1)判斷:在生產(chǎn)中,要保證最高產(chǎn)物產(chǎn)量,供氧時(shí)必須使溶氧濃度大于臨界溶 氧濃度(?。?。溶氧濃度大于臨界溶氧濃度可以得到最高的微生物濃度(?。?2)碳源種類對細(xì)胞的耗氧速度沒有影響( ?。?。,3)培養(yǎng)液中基質(zhì)濃度對細(xì)胞的耗氧速度有很大的影響( ?。?3)

5、細(xì)胞的攝氧率與培養(yǎng)時(shí)間及細(xì)胞濃度有關(guān),例如在鏈霉素的發(fā)酵過程中,初始的攝氧率為34molO2/m3·h,補(bǔ)料后(78h)升為40.9 molO2/m3·h,隨著營養(yǎng)物質(zhì)的消耗,在94 h又降到15-20 molO2/m3·h。,,,,,,,,Qo2,干重,PH,疣孢漆斑霉在分批培養(yǎng)時(shí)比耗氧速率的變化,Qo2,干重,r=Qo2·X,,r,請問攝氧率和比耗氧速率在細(xì)胞培養(yǎng)的哪一階段達(dá)到最高值?,4)

6、培養(yǎng)條件(如PH、溫度等)對細(xì)胞 的需氧要求也有影響,一些有害代 謝產(chǎn)物的積累,也會(huì)抑制細(xì)胞的呼 吸 。,閱讀課本P116回答問題,何謂氧的滿足度?,問題1,舉例說說各種氨基酸的生產(chǎn)與最佳溶氧濃度的關(guān)系 ?為什么?,問題2,舉例說說微生物的次級代謝產(chǎn)物的生產(chǎn)也與臨界溶氧濃度有關(guān) ?,問題3,1)判斷:在生產(chǎn)中,要保證最高產(chǎn)物產(chǎn)量,供氧時(shí)必須使溶氧濃度大于臨界溶 氧濃度(?。?。溶氧濃度大于臨界溶氧濃度可以得到最高的微

7、生物濃度(?。?。,,,,,,,,,,2,1,3,4,5,6,7,8,9,氣液界面,氣泡,液膜,液相主體,固液界面,細(xì)胞團(tuán),液膜,細(xì)胞膜,細(xì)胞,生物反應(yīng),,,,氧從氣泡到細(xì)胞的傳遞過程示意圖 P117(劃線),二、培養(yǎng)過程中氧的傳質(zhì)理論,1、氧從氣泡到細(xì)胞的傳遞過程,對于大多數(shù)微生物細(xì)胞的培養(yǎng)過程,細(xì)胞分散在培養(yǎng)液中,只能利用溶解氧,供氧都是在培養(yǎng)液中通往空氣來進(jìn)行。氧從空氣泡傳遞到細(xì)胞內(nèi)要克服一系列阻力,首先氧須從氣相溶解于培養(yǎng)基

8、中,然后傳遞到細(xì)胞內(nèi)的呼吸酶位置上被利用。,氧從氣泡到細(xì)胞的傳遞過程示意圖,氧從空氣泡傳遞到細(xì)胞的過程中需要克服哪幾種阻力?,問題1,氧的整個(gè)傳遞過程可分為供氧和耗氧兩個(gè)方面,請分別指出這兩個(gè)過程的傳氧路線?,問題2,2、氧的傳遞速率總方程式,OTR=K Lα(c*-cL)式中: OTR---單位體積培養(yǎng)液中的傳氧速率,[mol/m3·s]; KL---以濃度差為推動(dòng)力的總傳質(zhì)系數(shù)(m/s

9、) α– 比表面積(m2/m3) KLα---以濃度差為推動(dòng)力的體積傳遞系數(shù),(s-1); cL---溶液中氧的實(shí)際濃度,(mol/m3); c*---與氣相中氧分壓p平衡時(shí)溶液中氧濃度,(mol/m3);,例題,三、溶解氧的測定方法,1、化學(xué)法,化學(xué)法的優(yōu)點(diǎn)是測定比較準(zhǔn)確,能直接得到氧的濃度,往往是其他測定方法

10、的基礎(chǔ),也常用于衡量其他方法的準(zhǔn)確性。,2、極譜法,3、復(fù)膜氧電極法,4、壓力法,復(fù)膜氧電極測定的是氧的分壓,閱讀課本P123-126,KL---以濃度差為推動(dòng)力的總傳質(zhì)系數(shù)(m/s) α– 比表面積(m2/m3) KLα---以濃度差為推動(dòng)力的體積傳遞系數(shù),(s-1);,復(fù)習(xí),OTR=K Lα(c*-cL),氧的傳遞速率總方程式,OTR---單位體積培養(yǎng)液中的傳氧速率,[mol/m3·

11、;s];,cL---溶液中氧的實(shí)際濃度,(mol/m3);c*---與氣相中氧分壓p平衡時(shí)溶液中氧濃度,(mol/m3);,測定氧濃度的方法有哪些,四、氧傳遞系數(shù)的測定P126,1、亞硫酸鹽氧化法,2、取樣極譜法,3、物料衡算法,4、動(dòng)態(tài)法,5、排氣法,6、復(fù)膜電極法P128,五、影響氧傳遞速率的主要因素,根據(jù)氣液傳遞速率方程: OTR=K Lα(c*-cL)凡是影響推動(dòng)力c*-cL、比表面積α和傳遞系數(shù)

12、 的因素都會(huì)影響氧傳遞速率。,1、溶液的性質(zhì)對氧的溶解度的影響,隨溫度的升高而降低 P129,與酸的種類及濃度有關(guān) P130表,電解質(zhì)溶液氧的溶解度降低P129 (為什么),要提高氧在溶液中的溶解度的方法有多種,其中最簡單的方法是增加罐壓。但是要注意的是增加罐壓雖然提高了氧的分壓,從而增加了氧的溶解度,但其他氣體成分(如CO2)分壓也相應(yīng)增加,且由于CO2的溶解度比氧大得多,因此不利于液相中CO2的排出,而影響了

13、細(xì)胞的生長和產(chǎn)物的代謝,所以增加罐壓是有一定限度的。 另一種方法是增加空氣中氧的含量,進(jìn)行富氧通氣操作。即通過深冷分離法、吸附分離法及膜分離法制得富氧空氣,然后通入培養(yǎng)液。目前由于這三種分離方法的成本都較高,富氧通氣還處于研究階段。,2、氣液比表面積,比表面積:氣泡表面積與體積之比,比表面積越大,氧傳遞速率越大,主要體現(xiàn)以下三個(gè)方面:,A、氣液比表面積的大小取決于截留在培養(yǎng)液的氣體體積以及氣泡的大小。截留在液體中的氣

14、體越多,氣泡的直徑越小,那么氣泡比表面積就越小。,B、攪拌對比表面積的影響較大。因?yàn)閿嚢枰环矫婵墒箽馀菰谝后w中產(chǎn)生復(fù)雜的運(yùn)動(dòng),延長停留時(shí)間,增大氣體的截留率,另一方面攪拌的剪切作用又使氣泡粉碎,減小氣泡的直徑。,提高氧在溶液中的溶解度的最直接方法方法有哪些?,問題,說說攪拌對比表面積的影響?,問題,C、增大通氣量可增加空氣的截留率,從而使比表面積增大。,3、攪拌,攪拌的作用: P133 把通入的氣體打碎,強(qiáng)化湍流程度

15、,使空氣與發(fā)酵液充分混合,氣、液、固三相更好地接觸,增加了溶氧速率,使微生物懸浮混合均勻,促進(jìn)代謝產(chǎn)物的傳質(zhì)速率。 攪拌器的型式、直徑大小、轉(zhuǎn)速、組數(shù)、攪拌器間距以及在罐內(nèi)的相對位置等對氧的傳遞速率都有影響。,##攪拌器##,1)攪拌能把大的空氣泡打碎成為微小氣泡,增加了氧與液體的接觸面積,而且小氣泡的上升速度要比大氣泡慢,相應(yīng)地氧與液體的接觸時(shí)間也就增長;2)攪拌使液體作渦運(yùn)動(dòng),使氣泡不是直線上升而是作螺旋運(yùn)動(dòng)上升

16、,延長了氣泡的運(yùn)動(dòng)路線,增加了氣液的接觸時(shí)間;3)攪拌使發(fā)酵液呈湍流運(yùn)動(dòng),從而減少氣泡周圍液膜的厚度,減少液膜阻力,因而增大了KL值;4)攪拌使菌體分散,避免結(jié)團(tuán),有利于固液傳遞中的接觸面積的增加,使推動(dòng)力均一,同時(shí)也減少了菌體表面液膜的厚度,有利于氧的傳遞。 攪拌器的型式、直徑大小、轉(zhuǎn)速、組數(shù)、攪拌器間距以及在罐內(nèi)的相對位置等對氧的傳遞速率都有影響。,采用機(jī)械攪拌是普通提高溶氧系數(shù)的行之有效的方法。它能從以下幾個(gè)

17、方面改善溶氧速率:,在發(fā)酵生產(chǎn)中,攪拌有何作用?,問題1,在發(fā)酵生產(chǎn)中,攪拌是如何改善溶氧速率的?,問題2,4、空氣的線速度,氧傳遞系數(shù)K Lα是隨空氣量的增加而增大的,當(dāng)增加通風(fēng)量時(shí),空氣的線速度也就相應(yīng)地增大,從而增加了溶氧,氧傳遞系數(shù)K Lα相應(yīng)地也增大。 當(dāng)然過大的空氣線速度會(huì)使攪拌槳葉不能打散空氣,氣流形成大氣泡在軸的周圍逸出,使攪拌效率和溶氧速率都大大降低。,5、空氣分布管,空氣分布管的型式、噴口直徑及管

18、口與罐底距離的相對位置對氧溶解速率有較大的影響。 當(dāng)通風(fēng)量較小時(shí),噴口的直徑越小,氣泡的直徑也就越小,相應(yīng)地溶氧系數(shù)就越大。而當(dāng)通風(fēng)量超過一定值后,氣泡的直徑與通風(fēng)量有關(guān),與噴口的直徑無關(guān)。,6、培養(yǎng)液的性質(zhì),在發(fā)酵過程中,由于微生物的生命活動(dòng),分解并利用培養(yǎng)液中的基質(zhì),大量繁殖菌體,積累代謝產(chǎn)物等等都引起培養(yǎng)液的性質(zhì)的改變,特別是粘度、表面張力、離子液度、密度、擴(kuò)散系數(shù)等,從而影響到氣泡的大小、氣泡的穩(wěn)定性,進(jìn)而對氧

19、傳遞系數(shù)K Lα帶來很大的影響。 此外,發(fā)酵液粘度的改變還會(huì)影響到液體的湍流性以及界面或液膜阻力,從而影響到氧傳遞系數(shù)K Lα 。當(dāng)發(fā)酵液濃度增大時(shí),粘度也增大,氧傳遞系數(shù)K Lα就降低。 發(fā)酵液中泡沫的大量形成會(huì)使菌體與泡沫形成穩(wěn)定的乳濁液,影響到氧傳遞系數(shù)。,7、表面活性劑,培養(yǎng)液中消泡用的油脂等具有親水端和疏水端的表面活性物質(zhì)分布在氣液界面,增大了傳遞的阻力,使氧傳遞系數(shù)K Lα等發(fā)生變化,,說說培

20、養(yǎng)液的哪些因素會(huì)影響氧傳遞系數(shù)?,問題,8、離子強(qiáng)度,一般在電解質(zhì)溶液中生成的氣泡比在水中小得多,因而有較大的比表面積。在同一氣液接觸的發(fā)酵罐中,在同樣的條件下,電解質(zhì)溶液的氧傳遞系數(shù)K Lα比水大,而且隨電解質(zhì)濃度的增加, K Lα也有較大的增加。,9、菌體濃度,培養(yǎng)液中的菌體濃度對K Lα也有很大的影響。如圖7-24是黑曲霉菌體濃度與K Lα的關(guān)系。,菌體濃度(%W/V),,電解液濃度的增加,氧傳遞系數(shù)是增加還是減少?氧的溶解度呢?

21、,問題,六、控制溶氧的工藝手段,控制溶氧的工藝手段主要是從供氧和需氧兩方面來考慮,前已述及影響供氧效果的主要因素有:1)通氣流量(通風(fēng)量);2)攪拌速度;3)氣體組分中的氧分壓;4)罐壓;5)溫度;6)培養(yǎng)基的物理性質(zhì)等。而影響需氧的則是菌體的生理特性,諸如不同菌齡的呼吸強(qiáng)度差別,基質(zhì)加入時(shí)菌體耗氧的增加等。工藝上主要的控制手段有以下幾種: P135,改變通氣速率(增大通風(fēng)量),改變攪拌速度,主要是通過變化K Lα來改變供氧能力,改變

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