鹽補(bǔ)骨脂一測多評法的建立及其在炮制工藝優(yōu)選與質(zhì)量評價中的應(yīng)用研究.pdf

1、本文建立了一種超高效液相色譜（ultra-high performance liquid chromatography,UHPLC）技術(shù)結(jié)合一測多評法（quantitative analysis of multi-components by single marker,QAMS）同時測定補(bǔ)骨脂中9種主要成分（異補(bǔ)骨脂素、補(bǔ)骨脂素、補(bǔ)骨脂定、補(bǔ)骨脂寧、新補(bǔ)骨脂異黃酮、補(bǔ)骨脂甲素、補(bǔ)骨脂乙素、補(bǔ)骨脂查耳酮以及補(bǔ)骨脂酚）含量的方法。并以此為手

2、段，結(jié)合D-最優(yōu)設(shè)計(jì)響應(yīng)面分析，優(yōu)選了補(bǔ)骨脂藥材鹽炙工藝參數(shù)，建立了參數(shù)明確、過程可控的鹽補(bǔ)骨脂炮制工藝。在優(yōu)選的炮制工藝基礎(chǔ)上，通過對14批補(bǔ)骨脂藥材的優(yōu)化炮制和QAMS含量測定，對鹽炙飲片進(jìn)行質(zhì)量評價。為提高鹽補(bǔ)骨脂質(zhì)量均一性和臨床安全性提供技術(shù)支持。
　　目的：
　　建立同時測定補(bǔ)骨脂中多指標(biāo)成分含量測定法；優(yōu)化鹽補(bǔ)骨脂飲片炮制工藝；并對優(yōu)化的鹽補(bǔ)骨脂飲片進(jìn)行質(zhì)量評價。
　　方法：
　　1.QAMS法和外標(biāo)

3、法（External standard method,ES）色譜條件：色譜柱為C18 ODS色譜柱（50 mm×2.0 mm,1.6μm）；檢測波長246 nm；柱溫45℃；進(jìn)樣量4μL；以乙腈-0.2%冰醋酸水溶液為流動相，0.4 mL/min體積流量，梯度洗脫。以異補(bǔ)骨脂素為內(nèi)參物，確定其與其他8個成分的相對校正因子（relative correction factor,RCF）值和相對保留時間值（relative retentio

4、n time,r）。用Wilcoxon配對秩和檢驗(yàn)比較QAMS法和ES法測定14批藥材含量結(jié)果的差異來驗(yàn)證QAMS法。
　　2.以鹽補(bǔ)骨脂炮制工藝關(guān)鍵參數(shù)（炒制溫度、悶潤時間及加鹽量）為自變量，進(jìn)行D-最優(yōu)設(shè)計(jì)；以QAMS含測獲得的補(bǔ)骨脂中9種主要成分炮制前后質(zhì)量變化分?jǐn)?shù)為因變量，進(jìn)行響應(yīng)面分析；結(jié)合單因素分析確定炒制時間，優(yōu)化出補(bǔ)骨脂鹽炙工藝。
　　3.運(yùn)用優(yōu)化炮制工藝制備14批鹽補(bǔ)骨脂飲片，并運(yùn)用QAMS法對其進(jìn)行質(zhì)量評

5、價。
　　結(jié)果：
　　1.Wilcoxon配對秩和檢驗(yàn)結(jié)果（r≥0.9975，p＜0.01）表明QAMS法所得結(jié)果和參比方法（ES法）所得實(shí)測值無顯著差異，QAMS法可代替ES法對補(bǔ)骨脂進(jìn)行多成分含量測定。
　　2.鹽補(bǔ)骨脂的最佳炮制工藝為：在100 g補(bǔ)骨脂藥材中加入2.10 g鹽，悶潤12 h，在80℃炒制30 min。
　　3.得到14批優(yōu)化鹽補(bǔ)骨脂飲片，對其進(jìn)行QAMS含測，結(jié)果鹽炙后補(bǔ)骨脂中香豆素類含量