國產(chǎn)北加apoaⅰ,apob參考品的who-ifcc靶值轉移實驗研究

1、國產(chǎn)北加國產(chǎn)北加ApoAⅠApoAⅠ、ApoBApoB參考品的參考品的WHOIFCCWHOIFCC靶值轉移實驗研究靶值轉移實驗研究陳銘生1，王勤富2，劉中令3（1.上海第二醫(yī)科大學附屬仁濟醫(yī)院檢驗科，上海200001；2.上海利群醫(yī)院，上海200333；3.上海北加生化試劑有限公司，上海200060）摘要：目的摘要：目的載脂蛋白AⅠ、B（ApoAⅠ、ApoB）參考品與WHOIFCC國際標準品靶值轉移，制備定值可溯源國際標準的國產(chǎn)北加參考

2、品。方法方法檢測方法采用免疫透射比濁法（終點法）；靶值轉移的實驗研究方法按美國西北脂類研究實驗室（NWLRL）制定的測試步驟進行，用WHOIFCC的國際標準靶值轉移和靶值轉移后的測試系統(tǒng)準確性和精密度的評估等三個步驟進行。結果結果第一步驟測試系統(tǒng)評估符合要求，第二步驟的結果均≤2%期望值，第三步驟ApoAⅠ、ApoB偏差值≤1.8，CV≤0.9%。結論結論國產(chǎn)北加ApoAⅠ、ApoB參考品的定值與WHOIFCC國際標準品靶值轉移成功，獲

3、得NWLRL的WHOIFCCApoAⅠ、ApoB國際標準靶值轉移合格證書。關鍵詞關鍵詞：載脂蛋白AⅠ（ApoAⅠ）、載脂蛋白B（ApoB）參考品。載脂蛋白ApoAⅠ、ApoB免疫透射比濁法試劑盒，最近完成了醫(yī)療器械注冊，并獲得國家食品藥品監(jiān)督總局頒發(fā)的注冊文號。但一直困繞著我們一大問題是參考品的定值。為了制備有溯源性的參考品我們與美國華盛頓大學西北脂類研究實驗室（NWLRL）聯(lián)系，申請參加ApoAⅠ、ApoB參考品靶值轉移方案。通過NW

4、LRL靶值轉移工作三個步驟評估已獲得WHO載脂蛋白AⅠ、B（ApoAⅠ、ApoB）國際標準靶值轉移合格證書?，F(xiàn)將實驗研究報告如下：材料與方法材料與方法1材料與方法1.1儀器1.1.1HITACHI7060C自動生化分析儀1.1.2.實驗參數(shù)(免疫透射比濁法終點法)溫度37℃，波長700nm（副）340nm（主）1cm光徑，樣品3ul，R1250ul，R250ul，分析點16點31點。1.2試劑羊抗人抗血清：本公司自制，ApoAⅠ效價≥1

5、:32，ApoB效價≥512。試劑1(R1)：0.01mmolL磷酸鹽緩沖液加入聚乙二醇6000。試劑2(R2)：磷酸鹽緩沖液、抗體液。1.3ApoAⅠ、ApoB參考品：批號北加20030707取新鮮人血清，剔除脂血、溶血、黃疸血清，經(jīng)測HBsAg陰性，混合后加入適量防腐劑混勻分裝，70℃保存。將結果按要求填表寄回給NWLRL，要求白12、綠12、蘭12的測定結果的均值≤2%期望值。2.2.3結果用北加20030707定標表2白12、綠

6、12、蘭12ApoAⅠ、ApoB測試結果(gL)NWLRL定值測定值SDCV%偏差%A1BA1BA1BA1BA1BSp1011501502.01.30.1Sp3071181181.21.00.1白1210670107702.61.42.42.00.60.2綠121721471721502.31.51.31.00.11.8蘭1213796136971.80.91.31.01.00.7平均1.31.30.60.9第二步驟符合要求，NWLRL

7、通知進入第三步驟。2.3第三步驟2.3.1用北加20030707定標測定NWLRL40份血清標本ApoAⅠ、ApoB的值。2.3.2方法用2.2標定的北加20030707參考品定標，每次均作標準曲線。測定由NWLRL提供的40份冷凍血清的ApoAⅠ、ApoB的值。每天一批，每批重復測定二次，共測二天。在每批測定的前、中、后按NWLRL要求都跟測白12、綠12、蘭12質控血清。將結果按要求填表，寄回給NWLARL，要求40份血清的標本總的

8、精密度CV≤5%，40份血清標本的測定結果與NWLRL定值的平均偏差值為ApoAⅠ≤5%、ApoB≤6%。2.3.3結果用北加20030707定標40份血清表3精密度與偏差值CV%偏差%NWLRL要求≤5ApoAⅠ≤5、ApoB≤6ApoAⅠ1.80.9ApoB1.70.9第三步驟又獲得通過。3討論3.1ApoAⅠ、ApoB測定，一般均采用免疫透射比濁法，我們雖有了較好的試劑和摸索了儀器的參數(shù)，但結果準確性如何，關鍵是參考品的溯源。為此