軍團菌氣溶膠檢測技術(shù)初步研究.pdf

1、目的:
　　 通過對三種空氣微生物采樣技術(shù)對嗜肺軍團菌氣溶膠采集效果的比較,建立與優(yōu)化適于公共場所中嗜肺軍團菌氣溶膠污染的檢測方法。
　　 內(nèi)容:
　　 1.建立應(yīng)用巢式PCR、RT-PCR技術(shù)檢測嗜肺軍團菌氣溶膠樣品的檢測方法;
　　 2.比較本課題組建立的新型靜電場采樣器、SKC-button采樣器和Biosampler采樣器三種采樣器在實驗室及現(xiàn)場對嗜肺軍團菌氣溶膠的采集效率;分析影響本課題組建立的

2、新型靜電場采樣器采集效率的主要因素,為優(yōu)化嗜肺軍團菌氣溶膠檢測方法提供依據(jù)。
　　 3.應(yīng)用本課題組建立的新型靜電場采樣器和Biosampler采樣器在選擇的代表性公共場所四家賓館進行采樣分析,探討對嗜肺軍團菌檢測效果。
　　 結(jié)果:
　　 1.受檢樣本分別用巢式PCR和普通PCR技術(shù)進行嗜肺軍團菌檢測,前者的檢出率為100％,后者僅為50%;應(yīng)用RT-PCR技術(shù)能保證對樣品的特異性分析,與大腸桿菌(ATCC25

3、922)、金黃色葡萄球菌(ATCC25923)、表皮葡萄球菌(ATCC12228)、銅綠假單胞菌(ATCC9027)和白色念珠菌(ATCC90029)等不存在交叉反應(yīng)。
　　 2.將電壓和流量作為匹配條件,在采集嗜肺軍團菌氣溶膠時,新型靜電場采樣最優(yōu)條件為電壓10KV,流量3L/min。
　　 3.在實驗室模擬中最優(yōu)條件下,新型靜電場采樣器對嗜肺軍團菌的采集效率分別為Biosampler的0.684倍,SKC-Butto

4、n過濾式采樣器的1.34倍。
　　 4.現(xiàn)場試驗表明使用新型靜電場采樣器和Biosampler均能有效檢測出軍團菌,在本研究條件下,Biosampler液體撞擊式采樣器針對嗜肺軍團菌的采集效果好于新型靜電場采樣器效果。
　　 結(jié)論:
　　 1.應(yīng)用巢式PCR、RT-PCR技術(shù)能有效提高樣品中嗜肺軍團菌的檢出靈敏度并進行初步定量;
　　 2.Biosampler液體撞擊式采樣器是目前常用空氣微生物采樣器中對