有機錫對熱帶爪蟾基因mRNA表達的影響.pdf

1、近年來，全球兩棲類動物種群衰退現(xiàn)象十分嚴重，已有研究表明與環(huán)境污染物有關(guān)。有機錫是目前已知內(nèi)分泌干擾物質(zhì)(EDCs)中應(yīng)用最廣的金屬化合物，TBT也是人為引入水環(huán)境最毒的化學(xué)物質(zhì)之一。兩棲類變態(tài)實驗(AMA)被認為是檢測甲狀腺激素干擾作用簡單而特異的方法，這一方法是在爪蟾蝌蚪變態(tài)期間，通過形態(tài)學(xué)和組織學(xué)等指標對污染物是否具有甲狀腺激素干擾效應(yīng)進行檢測。而本論文采用分子指標，研究了有機錫化合物對熱帶爪蟾蝌蚪和胚胎發(fā)育過程中相關(guān)基因mRNA

2、表達的變化，并探討了甲狀腺激素干擾效應(yīng)及可能的作用機制。
　　 首先，用50和200 ng·L-1的TBT對熱帶爪蟾NF51階段蝌蚪進行48和96 h暴露。結(jié)果表明，TBT能引起蝌蚪多個甲調(diào)基因表達的變化，但基因的表達具有明顯的組織差異性。這些基因涉及到甲狀腺激素的合成、運輸、轉(zhuǎn)化和代謝等多個過程，表明TBT對爪蟾具有甲狀腺激素干擾效應(yīng)。同時，通過對一些相關(guān)基因的檢測表明TBT可能通過與RXR結(jié)合而對蝌蚪產(chǎn)生甲狀腺激素干擾效應(yīng)。

3、
　　 其次，TBT對熱帶爪蟾胚胎進行24、48和72 h三個不同時間段的暴露，結(jié)果表明，TBT能引起胚胎多個不同基因表達的變化。這些基因涉及到甲調(diào)信號途徑，頭部發(fā)育和神經(jīng)脊細胞遷移途徑等多個過程，表明TBT影響了爪蟾胚胎發(fā)育過程。同時，通過對一些甲調(diào)基因及其相關(guān)基因的檢測，從分子水平上說明TBT在爪蟾胚胎期也具有甲狀腺激素干擾效應(yīng)。一些胚胎發(fā)育相關(guān)基因表達的異常，影響了胚胎發(fā)育，導(dǎo)致胚胎畸形。
　　 最后，用0.2、1

4、和5μg·L-1TPT對熱帶爪蟾胚胎進行72 h時間暴露。結(jié)果表明，TPT能引起胚胎尾部多個不同基因mRNA表達的變化，初步探討了TPT引起的胚胎尾部畸形的分子機制，F(xiàn)oxd3異常表達，可誘導(dǎo)體軸異常，胚胎尾巴彎曲現(xiàn)象可能與其有關(guān)。但是，所做基因有限，還需進一步的實驗來研究其致畸機制，揭示如鰭為什么變窄等畸形現(xiàn)象。
　　 本論文通過多個實驗研究了有機錫化合物對熱帶爪蟾蝌蚪期和胚胎期相關(guān)基因表達的變化，從分子水平上證明了有機錫化合