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1、,動(dòng) 物 胚 胎 工 程,,王 鋒 王子玉 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物胚胎工程技術(shù)中心,緒 論,一 動(dòng)物胚胎工程的研究概況二 動(dòng)物胚胎工程的研究?jī)?nèi)容三 動(dòng)物胚胎工程的研究意義四 中國(guó)胚胎工程研究備忘錄,一、動(dòng)物胚胎工程的研究概況,,動(dòng)物繁殖學(xué) 生物工程 繁殖技術(shù) 細(xì)胞工程
2、 動(dòng)物胚胎工程,,,1. 動(dòng)物胚胎工程概念,現(xiàn)代生物工程技術(shù)對(duì)國(guó)民經(jīng)濟(jì)的持續(xù)發(fā)展具有舉足輕重的影響,因此,它越來(lái)越成為各國(guó)研究開(kāi)發(fā)的重點(diǎn)和科技競(jìng)爭(zhēng)的熱點(diǎn)。我國(guó)政府也把生物工程技術(shù)作為優(yōu)先研究和發(fā)展的領(lǐng)域,并取得了令人矚目的成就。,,生物工程包括基因工程、細(xì)胞工程、酶工程和發(fā)酵工程。胚胎工程是細(xì)胞工程中的分支。動(dòng)物胚胎工程就是以胚胎為研究對(duì)象,為了加速繁育經(jīng)濟(jì)動(dòng)物,培育動(dòng)物的優(yōu)良品種,或挽救
3、瀕危動(dòng)物使用的一系列工程技術(shù)方法,一般來(lái)說(shuō)包括胚胎移植、試管動(dòng)物(體外受精)、胚胎冷凍、胚胎分割、胚胎干細(xì)胞、核移植(克?。┘夹g(shù)等。,,胚胎工程是生物技術(shù)的重要組成部分,它的研究和應(yīng)用不僅推動(dòng)了制藥、器官移植醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的變革,而且還加速了畜牧業(yè)生產(chǎn)的發(fā)展。以牛為例,20世紀(jì)80年代中期,主要發(fā)達(dá)國(guó)家(美國(guó)、加拿大、日本等)在不斷開(kāi)展胚胎工程深入研究的同時(shí),已開(kāi)始產(chǎn)業(yè)化,加速了良種牛的繁育速度,優(yōu)化了牛群結(jié)構(gòu),使牛群生產(chǎn)水平大幅度提高,
4、推動(dòng)了畜牧業(yè)及相關(guān)產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展。,,我國(guó)近十幾年來(lái)對(duì)胚胎工程的研究投入了較大的人力和物力,單項(xiàng)技術(shù)取得了長(zhǎng)足發(fā)展,但產(chǎn)業(yè)化程度與發(fā)達(dá)國(guó)家相差甚遠(yuǎn)。主要表現(xiàn)在我國(guó)奶類(lèi)總產(chǎn)量占世界總產(chǎn)量的1%多一點(diǎn),人均占有奶量為世界平均水平的1/15,不到發(fā)展中國(guó)家的1/5,僅為發(fā)達(dá)國(guó)家的1/25;中國(guó)成年母牛的年均產(chǎn)奶量只有1700kg,遠(yuǎn)低于世界平均5000-6000kg的水平(2002年數(shù)據(jù))。,,造成這么大的差距,除了奶牛數(shù)目不足外,最根本的原
5、因就是中國(guó)奶牛的品質(zhì)不佳,產(chǎn)奶量低。長(zhǎng)期以來(lái),我國(guó)只采用冷凍精液人工授精技術(shù)進(jìn)行牛群品質(zhì)改良,由于世代間隔長(zhǎng),改良速度慢,制約了牛群生產(chǎn)水平的提高速度。,,為了加速我國(guó)奶牛品質(zhì)的提高,促進(jìn)我國(guó)奶牛業(yè)向著優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)、高效方向發(fā)展,只有通過(guò)牛胚胎工程產(chǎn)業(yè)化。目前我國(guó)在胚胎移植改良牛、羊品種,體細(xì)胞克隆牛、羊等家畜的技術(shù)方面已經(jīng)進(jìn)入國(guó)際先進(jìn)行列。,2. 胚胎工程各項(xiàng)技術(shù)之間的關(guān)系,胚胎工程是在研究胚胎移植的理論和技術(shù)的基礎(chǔ)上建立起來(lái)的,在此
6、基礎(chǔ)上又解決了哺乳動(dòng)物體外受精的技術(shù),繼而推動(dòng)了胚胎分割、性別鑒定、體細(xì)胞克隆、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等現(xiàn)代胚胎工程技術(shù)的建立和發(fā)展。,,體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育是學(xué)習(xí)本課的基礎(chǔ)。胚胎工程的許多技術(shù),實(shí)際是在體外條件下,對(duì)動(dòng)物自然受精和早期胚胎發(fā)育條件進(jìn)行的模擬操作。因此,必須先了解哺乳動(dòng)物受精和早期胚胎發(fā)育的規(guī)律。,,本門(mén)課在總體內(nèi)容安排上也體現(xiàn)了胚胎工程的發(fā)展脈絡(luò)。首先對(duì)胚胎工程的理論基礎(chǔ)──哺乳動(dòng)物的受精和早期胚胎發(fā)育的規(guī)律,進(jìn)行了較深入
7、地講述,在此基礎(chǔ)上介紹了各項(xiàng)胚胎工程技術(shù)。,,目前,胚胎工程技術(shù)中應(yīng)用最多的是胚胎移植技術(shù),無(wú)論是轉(zhuǎn)基因胚胎還是克隆等獲得的胚胎,最后都必須經(jīng)胚胎移植才能獲得后代,胚胎移植是胚胎工程的最后一道“工序”。因此,可以說(shuō)它是胚胎工程技術(shù)的基礎(chǔ);,,體外受精解決了體內(nèi)胚來(lái)源不足的問(wèn)題;胚胎冷凍技術(shù)使胚胎移植的推廣不再受時(shí)間和空間的限制;胚胎分割技術(shù)方法簡(jiǎn)單,效率更高;胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)不僅是胚胎工程的重要成就之一,在基礎(chǔ)生物學(xué)、畜牧學(xué)、醫(yī)學(xué)
8、上都有重要的應(yīng)用價(jià)值,是當(dāng)前研究的熱門(mén)課題之一。,3. 胚胎工程在繁殖學(xué)中的地位,(1)繁殖 雄性 精子 受精卵(胚胎) 胎兒 雌性 卵子 仔畜,,,,,,(2)繁殖的重要性,種族延續(xù)動(dòng)物生產(chǎn)中的關(guān)鍵性環(huán)節(jié):肉、奶、蛋等
9、畜產(chǎn)品的獲得均需要經(jīng)過(guò)繁殖環(huán)節(jié)來(lái)實(shí)現(xiàn)。,(3)動(dòng)物繁殖學(xué)的定義及研究?jī)?nèi)容,是研究動(dòng)物生殖活動(dòng)及其調(diào)控規(guī)律和調(diào)控技術(shù)的科學(xué),是加強(qiáng)畜禽品種改良,保證畜牧業(yè)快速發(fā)展的重要手段,是現(xiàn)代動(dòng)物科學(xué)或畜牧科學(xué)中研究最活躍的學(xué)科之一。是動(dòng)物生產(chǎn)中的一門(mén)基礎(chǔ)學(xué)科,是畜牧專(zhuān)業(yè)的專(zhuān)業(yè)基礎(chǔ)課,主要包括四大內(nèi)容。,繁殖理論,包括性別分化、性發(fā)育、性行為、配子(精子、卵子)發(fā)生、受精、胚胎發(fā)育、妊娠、分娩等整個(gè)繁殖過(guò)程中的各種生殖現(xiàn)象及機(jī)理。,繁殖技術(shù),同期
10、發(fā)情、超數(shù)排卵、人工授精胚胎移植、體外受精、胚胎冷凍胚胎分割、性別控制、動(dòng)物克隆發(fā)情鑒定、妊娠診斷、生殖免疫助產(chǎn)技術(shù)、生殖疾病控制技術(shù),母,公,排卵,精子,自然交配,人工授精,體外授精,發(fā)情鑒定,精液保存,精子獲能,IVM,顯微授精,精卵結(jié)合,胚胎,胚胎干細(xì)胞,胚胎分割,胚胎移植,胚胎克隆,嵌合體,轉(zhuǎn)基因,誘導(dǎo)發(fā)情,超數(shù)排卵,同期發(fā)情,妊娠,妊娠診斷,分娩,分娩控制,助產(chǎn),難產(chǎn),生殖免疫,免疫去勢(shì),類(lèi)固醇免疫,蛋白質(zhì)免疫,基因免
11、疫,性別控制,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,分子技術(shù),,繁殖管理 繁殖障礙及其防治,,二、動(dòng)物胚胎工程的研究?jī)?nèi)容,胚胎移植胚胎分割胚胎冷凍體外受精胚胎干細(xì)胞技術(shù)轉(zhuǎn)基因技術(shù)動(dòng)物克?。ê艘浦玻┬詣e控制嵌合體技術(shù),1.授精與早期胚胎發(fā)育,受精與早期胚胎發(fā)育,,,,,,,,,胚胎移植,胚胎移植是指將一頭良種母畜配種后的早期胚胎取出,移植到另外一頭或數(shù)頭同種的、生理狀況相同
12、或相似的母畜生殖道的適當(dāng)部位,使之繼續(xù)發(fā)育成新個(gè)體的過(guò)程。實(shí)際上是由產(chǎn)生良種胚胎的供體和養(yǎng)育胚胎的受體分工合作共同繁殖后代的技術(shù)。,胚胎移植技術(shù),牛胚胎移植技術(shù)路線(xiàn)示意圖,,1890年,英國(guó)Walter Heape首次獲得兔受精卵移植成功。20世紀(jì)70年代中期,胚胎移植技術(shù)經(jīng)不斷改進(jìn),才發(fā)展到實(shí)際應(yīng)用階段。近30年來(lái),許多國(guó)家都建立了牛胚胎移植專(zhuān)業(yè)性公司,每年移植幾十萬(wàn)頭,平均每次由一頭供體采集得胚胎,可獲得2-9頭犢牛,繁殖效率
13、增加了幾十倍。,意義: 提高良種母畜的繁殖利用率,加快純繁速度; 加快品種的選育進(jìn)程; 代替種畜直接進(jìn)口; 拯救瀕危動(dòng)物; 研究手段。,,胚胎移植產(chǎn)的后代,,體外受精技術(shù),,哺乳動(dòng)物的體外受精已有120多年的歷史,早在1878年,德國(guó)科學(xué)家Schenk就開(kāi)始進(jìn)行體外受精的嘗試。1959年,張明覺(jué) 世界第一批試管兔。1970年,Mukherjee和Cohen, 小鼠。1978年,Steptoe和Edwards,試管嬰兒。
14、1980年,英國(guó) 波爾格,試管牛犢。,顯微受精技術(shù),,胚胎冷凍,胚胎的冷凍保存,是將胚胎貯存在-196℃超低溫下長(zhǎng)期保存的方法。這是20世記70年代試驗(yàn)成功的一項(xiàng)新技術(shù),是胚胎移植技術(shù)的重大突破,使胚胎移植不受時(shí)間和地點(diǎn)的限制,從而擴(kuò)大了胚胎移植技術(shù)的效率。胚胎冷凍保存技術(shù)也是長(zhǎng)期保存優(yōu)良母?;蜃羁煽康募夹g(shù)措施。胚胎的冷凍方法大體分為常規(guī)冷凍方法(慢速冷凍法)和玻璃化冷凍法兩種。1972年Whittingham等人首先對(duì)小鼠的胚
15、胎冷凍保存取得成功。,胚胎冷凍技術(shù),通過(guò)對(duì)胚胎進(jìn)行顯微操作,將一枚胚胎用顯微手術(shù)等方法分割成二分、四分甚至八分胚,經(jīng)體內(nèi)或體外培養(yǎng),然后移植入受體中,以得到同卵雙生或同卵多生后代的技術(shù)。胚胎分割是擴(kuò)大胚胎來(lái)源的一條有效途徑,其理論依據(jù)是早期胚胎的每一個(gè)卵裂球都具有獨(dú)立發(fā)育成個(gè)體的全能性。,胚胎分割技術(shù),在應(yīng)用胚胎移植術(shù)擴(kuò)大良種畜群時(shí),結(jié)合采用卵分割法,就可以更充分地利用胚胎。1個(gè)胚胎可當(dāng)2個(gè)或4個(gè)胚胎用,不僅可降低胚胎成本,還可加快家
16、畜的繁育速度。最早的胚胎分割是在家兔進(jìn)行的。1968年,Mullar等將家兔的8細(xì)胞胚胎一分為二,移植給受體母兔后,出生了仔兔。Trounson和Moore(1974)分割綿羊胚胎,繁殖出同卵雙羔。,,,,,,性別控制指通過(guò)人為干預(yù)并按人們的愿望使雌性動(dòng)物繁殖出所需性別后代的一種繁殖新技術(shù)。兩條途徑:精子分離和早期胚胎的性別鑒定。1989年Johnson利用流式細(xì)胞儀成功的分離了兔子的活的X和Y精子,用分離的精子授精并產(chǎn)下了后
17、代。,性別控制技術(shù),早期性別鑒定技術(shù)路線(xiàn),取樣,PCR 性別鑒定,,,,,,雄性,雌性,,奶牛胚胎,,肉牛胚胎,移植,,,移植,胚胎克隆是在胚胎分割基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)胚胎工程技術(shù),能大量生產(chǎn)基本同質(zhì)的后代。該項(xiàng)技術(shù)在美國(guó)已經(jīng)進(jìn)入商業(yè)化服務(wù),克隆胚胎可以冷凍保存,凍胚解凍后可再克隆產(chǎn)出同質(zhì)后代。我國(guó)在山羊(1991)、兔(1990、1991)、牛(1995、1996)均有研究報(bào)道,并獲得胚胎克隆或再可隆后代。 胚胎克隆技術(shù)不僅可以生
18、產(chǎn)大量?jī)?yōu)質(zhì)母畜的后代,而且可以與其它生物技術(shù)結(jié)合起來(lái)應(yīng)用。如進(jìn)行性別鑒別后胚胎的克隆、生產(chǎn)高表達(dá)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物和用于保護(hù)稀有、瀕危動(dòng)物資源。,克隆技術(shù),哺乳動(dòng)物胚細(xì)胞核移植,哺乳動(dòng)物體細(xì)胞核移植,綿羊Dolly,乳腺上皮細(xì)胞,Wilmut et al. (1997); 世界上第一頭體細(xì)胞克隆動(dòng)物。小鼠30余只,卵丘細(xì)胞,Wakayama et al.(1998);采用直接注射法將卵丘細(xì)胞注射到去核卵母細(xì)胞質(zhì)中,得到克隆和再克隆小鼠。,,,
19、克隆技術(shù),去核,移核,,克隆技術(shù),電融合,培養(yǎng),,多莉,克隆小鼠,貓,克隆狗與其”父母”,狗,豬,馬,騾子,轉(zhuǎn)基因動(dòng)物就是用實(shí)驗(yàn)室方法將人們需要的目的基因?qū)雱?dòng)物的受精卵,使外源基因與動(dòng)物本身的基因整合在一起,并隨細(xì)胞的分裂而增殖,在動(dòng)物體內(nèi)得到表達(dá),并能穩(wěn)定地遺傳給后代。,,轉(zhuǎn)基因技術(shù),國(guó)外轉(zhuǎn)基因動(dòng)物研究首創(chuàng)記錄,轉(zhuǎn)基因技術(shù),轉(zhuǎn)基因技術(shù)的發(fā)展前景非常廣闊: 1. 通過(guò)基因的定位整合技術(shù),來(lái)發(fā)現(xiàn)許多未知基因的功能和已知基因的新功能
20、; 2. 在動(dòng)物的遺傳資源保存,動(dòng)物的基因改良及發(fā)揮特別優(yōu)秀個(gè)體的生產(chǎn)性能等方面,都將起到重要作用; 3.動(dòng)物乳腺生產(chǎn)藥用蛋白質(zhì),是轉(zhuǎn)基因動(dòng)物研究另一個(gè)特別重要的目的之一。目前約有20余種基因已在家畜的乳腺中獲得高效表達(dá),有的已開(kāi)始臨床試驗(yàn),不久由動(dòng)物轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)的蛋白質(zhì)藥物即將面世; 4.通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)可以生產(chǎn)提供人類(lèi)器官移植所需的轉(zhuǎn)基因豬。,(引自上海轉(zhuǎn)基因研究中心),1994年德國(guó)成功培育出轉(zhuǎn)入生長(zhǎng)素的轉(zhuǎn)基因豬
21、,出現(xiàn)了壯如小牛的“超級(jí)豬”。,(引自上海轉(zhuǎn)基因研究中心),(引自上海轉(zhuǎn)基因研究中心),(引自上海轉(zhuǎn)基因研究中心),胚胎干細(xì)胞,胚胎干細(xì)胞(embryonic stem cells,ES細(xì)胞)主要來(lái)自囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)、早期胚胎的種細(xì)胞或胎兒的原始生殖細(xì)胞。哺乳動(dòng)物胚胎在囊胚期之前,其每一個(gè)卵裂球都具有多能性,在一定的條件下均可發(fā)育成一個(gè)完整的個(gè)體。 1981年,英國(guó)劍橋大學(xué)的Evans和Kaufman用囊胚內(nèi)細(xì)胞團(tuán)(ICM)建立小
22、鼠ES細(xì)胞系。 1991年Matsui利用小鼠PGCs獲得了ES細(xì)胞系。 1998年美國(guó)Thomson從人的體外受精囊胚中分離得到了ES細(xì)胞。同年約翰霍普金斯大學(xué)的Shamblott等從人的PGC細(xì)胞中分離得到人的全能性干細(xì)胞。,,,,干細(xì)胞研究大事件(黃禹錫事件),,把患者體細(xì)胞移植到去核卵母細(xì)胞中形成重組胚,把重組胚體外培養(yǎng)到囊胚,然后從囊胚內(nèi)分離出ES細(xì)胞,獲得的ES細(xì)胞使之定向分化為所需的特定細(xì)胞類(lèi)型 (如神經(jīng)細(xì)
23、胞、肌肉細(xì)胞和血細(xì)胞),用于替代療法。這種核移植法的最終目的是用于干細(xì)胞治療,而非得到克隆個(gè)體,稱(chēng)之為“治療型克隆”。,三、動(dòng)物胚胎工程的研究意義,動(dòng)物胚胎工程技術(shù)是動(dòng)物生物技術(shù)的重要組成部分之一,動(dòng)物胚胎工程技術(shù)在二十世紀(jì)后期發(fā)展極為迅速,近年來(lái)胚胎工程技術(shù)的應(yīng)用效益最為顯著,也是21世紀(jì)世界經(jīng)濟(jì)增長(zhǎng)的重要支撐技術(shù)之一。,,現(xiàn)代動(dòng)物胚胎工程的概念涵蓋所有對(duì)動(dòng)物配子和胚胎進(jìn)行工程化操作的技術(shù)方法,主要分為四大類(lèi)技術(shù)體系:第一類(lèi)是胚胎
24、移植相關(guān)技術(shù),包括超數(shù)排卵與胚胎移植(multiple ovulation and embyo transfer,MOET)技術(shù)、胚胎體外生產(chǎn)技術(shù)(試管動(dòng)物)、胚胎移植前性別鑒定技術(shù)與動(dòng)物性別控制技術(shù)、卵母細(xì)胞與胚胎的冷凍保存技術(shù);,,第二類(lèi)為動(dòng)物克隆技術(shù),包括胚胎分割技術(shù)、細(xì)胞核移植技術(shù)和胚胎嵌合技術(shù)體系;體細(xì)胞克隆技術(shù)還不十分完善,應(yīng)用也剛剛開(kāi)始,由于克隆胚基因再程序化的不完全這一技術(shù)瓶頸的存在,單純的體細(xì)胞克隆產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用尚無(wú)從談
25、起,但細(xì)胞核移植克隆動(dòng)物生產(chǎn)技術(shù)與其他胚胎工程技術(shù)的組裝配套仍顯示出了廣闊的前景和商業(yè)潛力。,,第三為轉(zhuǎn)基因動(dòng)物技術(shù);第四類(lèi)為胚胎干細(xì)胞技術(shù)。其中胚胎干細(xì)胞技術(shù)的主要研究意義在于發(fā)育生物學(xué)基礎(chǔ)理論和人類(lèi)醫(yī)學(xué)組織工程。前三類(lèi)胚胎工程技術(shù)在動(dòng)物生產(chǎn)領(lǐng)域有重要的實(shí)踐意義。,,人工授精、試管牛犢、冷凍胚胎、卵分割法等胚胎工程技術(shù)大大加快了畜牧業(yè)的發(fā)展速度,使得家畜優(yōu)良品種的生產(chǎn)商品化了。據(jù)報(bào)道,1987年世界上已經(jīng)有家畜胚胎移植公司20
26、0多個(gè),如美國(guó)已建立了從事牛胚胎移植、精子冷凍、受精卵分割等技術(shù)研究的格拉納達(dá)公司。這家公司已向澳大利亞、新西蘭、巴基斯坦、巴拉圭和中國(guó)等國(guó)出口胚胎移植術(shù)。該公司已發(fā)展成資產(chǎn)10億美元的企業(yè)。,,胚胎工程不僅蘊(yùn)藏著巨大的經(jīng)濟(jì)效益,同時(shí)對(duì)保護(hù)珍稀動(dòng)物和挽救瀕臨滅絕的野生動(dòng)物也發(fā)揮著重大作用。例如,英國(guó)倫敦動(dòng)物學(xué)院和劍橋動(dòng)物良種繁殖動(dòng)物學(xué)會(huì)合作,把斑馬的胚胎移植到普通馬的子宮里,這匹普通馬生出了一批小斑馬。又如,中國(guó)科學(xué)院動(dòng)物研究所的科研
27、人員研究大熊貓的體外受精取得了很大進(jìn)展,這將給人工繁殖大熊貓帶來(lái)希望。,,總之,體外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)等胚胎工程技術(shù),不僅廣泛應(yīng)用在畜牧業(yè)生產(chǎn)中,而且與醫(yī)學(xué)、制藥業(yè)等的發(fā)展,以及人們的生活有著越來(lái)越密切的關(guān)系。,四、中國(guó)胚胎工程研究備忘錄,60年代:魚(yú)類(lèi)、兩棲類(lèi)的細(xì)胞核移植 我國(guó)著名科學(xué)家童第周教授,于1960年開(kāi)展魚(yú)類(lèi)及兩棲類(lèi)細(xì)胞核移植研究。鯉鯽核移植魚(yú)已大面積繁殖推廣。,70-80年代:胚胎移植
28、 1973年中科院遺傳所率先開(kāi)展哺乳動(dòng)物胚胎移植,兔胚胎移植成功。 胚胎移植成功動(dòng)物:綿羊(1974年,中科院遺傳所、內(nèi)蒙古三北種羊場(chǎng)),奶牛(1978年,中科院遺傳所、上海牛奶公司第七牧場(chǎng)),山羊(1980年,西北農(nóng)大),小鼠(1980年,中科院遺傳所),馬(1982年,西北大學(xué)),豬(陜西)。,70年代末-80年代初:胚胎冷凍 在含有冷凍保護(hù)劑的溶液里,將胚胎保存于-196℃的液氮中。
29、需要時(shí),解凍胚胎并移植獲得后代。這項(xiàng)技術(shù)廣泛用于牛的繁殖。 胚胎冷凍移植成功動(dòng)物:兔(1979年,中科院遺傳所),奶牛(1981年,中科院遺傳所、上海奶研所),綿羊(1982年,中農(nóng)院畜牧所),山羊(1982年,西北農(nóng)大)。,,80年代:嵌合動(dòng)物 胚胎細(xì)胞嵌合:將兩個(gè)胚胎聚集在一起,形成一個(gè)具有兩品種胚胎的新胚胎,由此發(fā)育所得的動(dòng)物,叫嵌合動(dòng)物,其各種器官都可以由兩品種細(xì)胞組成。成功的動(dòng)物包括:小鼠(1
30、982年,發(fā)育所),兔(1988年,發(fā)育所),山羊(1993年,西北農(nóng)大)。 胚胎干細(xì)胞嵌合:胚胎干細(xì)胞是由胚胎內(nèi)細(xì)胞團(tuán)在體外培養(yǎng)下建立的細(xì)胞系。把胚胎干細(xì)胞注射到囊胚內(nèi),經(jīng)移植獲得嵌合動(dòng)物。1992年,北京大學(xué)培養(yǎng)成功小鼠。,,80年代:胚胎分割 胚胎分割移植成功的有:小鼠(1986年,西北農(nóng)大),奶牛(1987年,中科院遺傳所、四川鳳凰山乳牛場(chǎng)),山羊(1987年,西北農(nóng)大),綿羊(1987年,中農(nóng)
31、院畜牧所),兔(1990年,西北大學(xué)、中科院發(fā)育所)。,,80年代末:體外受精 卵子和精子在體外完成受精過(guò)程后移植獲得的個(gè)體,叫"試管嬰兒"或"試管動(dòng)物"。1986年,北京醫(yī)大獲得自體胚胎移植的試管嬰兒。1988年,湖南醫(yī)大獲得異體胚胎移植的嬰兒。 成功的動(dòng)物有:小鼠(1987年,遺傳所),兔(1990年,西北農(nóng)大),牛(1989年,內(nèi)蒙古大學(xué)),綿羊(1989年,
32、內(nèi)蒙古大學(xué)),山羊(1991年,西北農(nóng)大)。,,90年代:細(xì)胞核移植 細(xì)胞核移植成功的動(dòng)物包括:山羊(1990年,西北農(nóng)大),兔(1991年,中科院發(fā)育所),牛(1995年,華南師大,廣西農(nóng)大),豬(1995年,西北農(nóng)大),小鼠(1996年,湖南醫(yī)大)。,,90年代:連續(xù)細(xì)胞核移植 1993年,中科院發(fā)育所獲得第二代核移植山羊。1992-1996年,西北農(nóng)大得到第一代至第五代核移植山羊。1995年,西北農(nóng)
33、大將滋養(yǎng)層細(xì)胞作為供體細(xì)胞,獲得山羊。,,專(zhuān)業(yè)選修課,2個(gè)學(xué)分,共36個(gè)學(xué)時(shí),其中理論學(xué)習(xí)30個(gè)學(xué)時(shí),實(shí)驗(yàn)2個(gè)共6個(gè)學(xué)時(shí)。 時(shí)間從1-12周,每周連續(xù)上3學(xué)時(shí)(其中2次為實(shí)驗(yàn)課)。 成績(jī)?cè)u(píng)定:期終考試70%+實(shí)驗(yàn)20%+平時(shí)10% 。,本門(mén)課程安排,1.動(dòng)物繁殖學(xué) 2.動(dòng)物繁殖生物技術(shù)(桑潤(rùn)滋) 3.動(dòng)物胚胎工程(郭志勤) 4.動(dòng)物細(xì)胞工程與實(shí)踐(李青旺),參考資料,南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物胚胎工
34、程中心簡(jiǎn)介,動(dòng)物胚胎工程技術(shù)中心成立于2001年,掛靠在動(dòng)物科技學(xué)院及動(dòng)物遺傳育種與繁殖學(xué)科點(diǎn)(博士點(diǎn)),經(jīng)過(guò)五年的發(fā)展,目前本中心已成為江蘇省重要的動(dòng)物胚胎工程研發(fā)機(jī)構(gòu)之一,先后承擔(dān)農(nóng)業(yè)部農(nóng)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整重大技術(shù)研究專(zhuān)項(xiàng) 、江蘇省農(nóng)業(yè)三項(xiàng)工程等各級(jí)科研項(xiàng)目20余項(xiàng)以及10多項(xiàng)橫向委托項(xiàng)目。,,人員組成:中心現(xiàn)有研究人員5名,外聘教授2名,各類(lèi)研究生20余名。聘任日本山口大學(xué)鈴木達(dá)行教授為本中心名譽(yù)教授,新疆畜牧科學(xué)院原院長(zhǎng)、全國(guó)動(dòng)物胚胎生
35、物技術(shù)專(zhuān)業(yè)委員會(huì)主任郭志勤研究員擔(dān)任本中心兼職博導(dǎo)。,,實(shí)驗(yàn)室建設(shè):建有動(dòng)物克隆、基因工程與胚胎移植(江浦)3個(gè)實(shí)驗(yàn)室,總面積約200m2。擁有NIKON顯微操作系統(tǒng)、CO2培養(yǎng)箱、胚胎冷凍儀、生物顯微鏡、細(xì)胞融合儀、低溫高速離心機(jī)、PCR儀、凝膠成像系統(tǒng)以及電泳儀等設(shè)備,固定資產(chǎn)近200萬(wàn)元。研究方向:動(dòng)物克隆、轉(zhuǎn)基因、胚胎干細(xì)胞、生物技術(shù)保種、肉羊新品種選育以及胚胎移植技術(shù)推廣等。,發(fā)展中的南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物胚胎工程技術(shù)中心,,,發(fā)
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