腦靜脈竇栓塞動物模型豬的建立

1、腦靜脈竇栓塞動物模型﹙豬﹚的建立,山東省醫(yī)學(xué)影像學(xué)研究所唐軍 武樂斌 王廣彬 張琰,前 言,,● 腦靜脈竇栓塞引起的腦缺血梗死和腦出血是一種特殊類型的腦血管疾病，死亡率高。● 本病致病誘因眾多，臨床表現(xiàn)多種多樣，缺乏特異 性?！?探討腦靜脈竇栓塞的發(fā)病機理，病生理的演變過程，影像學(xué)表現(xiàn)演化規(guī)律對臨床治療具有重要意義，這些研究有 待動物實驗加以證實?！?多數(shù)學(xué)者報道試驗的動物以鼠，貓，兔等小型動物，我們選用更為理想的動

2、物﹙豬﹚，設(shè)計制作一種新的靜脈竇栓塞動物模型，旨在評價其有效性，可行性和優(yōu)缺點。,實驗動物,山東農(nóng)科院配育的健康幼豬9頭，2-3月齡，體重30±2Kg，雌雄不限,材料與方法,材料與方法,實驗器材 器械：動脈穿刺針、動脈防漏套鞘、短導(dǎo)絲、4F多功能導(dǎo)管、4 F導(dǎo)管鞘、0.038英寸導(dǎo)絲、超滑導(dǎo)絲COOK鉑金彈簧圈，明膠海綿,自體血凝塊,材料與方法,實驗藥物,鹽酸氯胺酮注射液3%戊巴比妥鈉溶液硫酸阿托品注射液76%泛影

3、葡胺2%利多卡因注射液,10%福爾馬林肝素鈉注射液生理鹽水地西泮針劑20%明膠包埋液,機器：LCV-PLUS大型DSA MARK~Ⅳ型高壓注射器Magnetom Sonata maestro class 1.5 T超導(dǎo)磁共振掃描儀 Sonatom sen sation cardiac 16 排螺旋CT掃描儀,材料與方法,材料與方法,實驗步驟,實驗前準(zhǔn)備 動靜脈插管 MR、CT檢查 大體標(biāo)本 病理學(xué)檢查 統(tǒng)計

4、學(xué)分析,材料與方法,實驗前準(zhǔn)備,手術(shù)室溫度25℃左右 常規(guī)介入手術(shù)準(zhǔn)備,材料與方法,實驗前準(zhǔn)備及麻醉,實驗動物術(shù)前禁食12h，禁飲2h 麻醉，固定 建立靜脈通道,材料與方法—實驗步驟,動脈插管,1：在隱動脈搏動處切開皮膚，逐層分離皮下組織、筋膜，暴露隱動脈鞘 膜。2：分離出隱動脈，用血管鉗輕輕挑起，結(jié)扎隱動脈遠(yuǎn)端。,1,2,材料與方法—實驗步驟,動脈插管,3：在直視下用手術(shù)刀尖將隱動脈挑開小口，送入短導(dǎo)絲。

5、4：沿短導(dǎo)絲送入動脈防漏套鞘，將動脈鞘和隱動脈血管壁固 定在一起，防止動脈鞘脫落。,3,4,1：觸摸股動脈搏動,2：在股動脈內(nèi)側(cè)利用穿刺針直接穿 刺股深靜脈,3：拔出穿刺針針芯，見靜脈 血流后送入導(dǎo)引導(dǎo)絲,靜脈插管,1,2,3,圖像分析,材料與方法—實驗步驟,對照MRV與DSA 圖像，比較 栓塞后腦靜脈竇的栓塞情況 及各組淺深腦靜脈的顯示情況。,大體標(biāo)本的觀察與病理分析,兩周后處死豬

6、開顱取腦標(biāo)本固定、切割做HE 染色切片,,,,,,材料與方法—實驗步驟,結(jié) 果,1.實驗動物的麻醉效果 2. 實驗動物栓塞情況及相關(guān)表現(xiàn) 3.栓塞后2DTOF MRV表現(xiàn),實驗動物的麻醉效果,結(jié)果1,實驗動物栓塞情況及相關(guān)表現(xiàn),結(jié)果2,結(jié)果2,栓塞前DSA,明膠海綿栓塞后DSA,PIG2：Rolandic靜脈前方明膠海綿栓塞,1,2,3,結(jié)果2,PIG4： Rolandic靜脈2個鉑金彈簧圈栓塞,栓塞前

7、DSA,導(dǎo)管位置,栓塞后部分SSS不顯影,2,3,1,結(jié)果2,PIG7： Rolandic靜脈1個鉑金彈簧圈+明膠海綿栓塞,栓塞前DSA,栓塞后DSA,,,結(jié)果2,PIG7： Rolandic靜脈1個鉑金彈簧圈+明膠海綿栓塞,,側(cè)枝血管,結(jié)果2,Rlandic靜脈兩個彈簧圈栓塞,結(jié)果2,Rlandic靜脈彈簧圈加明膠海綿栓塞，彈簧圈后方見條狀血栓形成。,結(jié)果2,,,Rlandic靜脈彈簧圈栓塞后腦表面明顯淤血,結(jié)果2,,大體標(biāo)本左側(cè)觀,

8、大體標(biāo)本3mm層厚右面觀,結(jié)果2,,HE染色，10x40倍光鏡,實驗動物栓塞情況及相關(guān)表現(xiàn),結(jié)果2,結(jié)果2,PIG9,結(jié)果2,Rolandic靜脈后方栓塞組,直竇栓塞組,腦靜脈竇栓塞的MR表現(xiàn),T1WI 、T2WI、FLAIR圖像均無異常3例 T1WI圖像有腦回腫脹，T2WI、FLAIR圖像無異常信號，無腦室擴(kuò)大2例 腦腫脹、腦室大小正常伴T2WI、FLAIR高信號1例 腦腫脹、腦室輕度擴(kuò)大伴T2WI、FLAIR高信號3例 T2

9、WI、FLAIR高信號伴腦出血2例 硬膜下出血2例,結(jié)果3.,結(jié)果3.,,腦腫脹,T1WI,T2WI,結(jié)果3.,腦腫脹、腦室輕度擴(kuò)大伴T2WI、FLAIR高信號,T1WI,FLAIR,T2WI,結(jié)果3.,腦腫脹、T2WI、FLAIR高信號、腦出血,T1WI,FLAIR,T2WI,結(jié)果3.,硬膜下出血,,T1WI,CT,結(jié)果3.,上矢狀竇、直竇、竇匯完全栓塞組,ADC,T2WI,栓塞后 MRV表現(xiàn),,,結(jié)果4,2例MRV表現(xiàn)與栓塞前

10、無明顯變 化； 4例在栓塞部位表現(xiàn)為充盈缺 損，栓塞后方上矢狀竇血流信號 減弱，或血流信號不連續(xù)模糊。,栓塞后 MRV表現(xiàn),,,結(jié)果4,,,栓塞后 MRV表現(xiàn),,,結(jié)果4,3例完全栓塞組顯示栓塞部 位及其后方的上矢狀竇、直 竇和部分竇匯不顯影。,栓塞后 MRV表現(xiàn),,,結(jié)果4,,,討 論,1. 動物選擇2. 豬入路血管及豬顱腦應(yīng)用解剖3. 腦靜脈竇栓塞部位與方法4.實驗方法的優(yōu)缺點、有效性、可

11、行 性及臨床應(yīng)用價值,動物的選擇,討論1.,鼠,貓,兔,豬,豬入路血管及豬顱腦應(yīng)用解剖,動脈入路 靜脈入路 腦靜脈竇,討論2,應(yīng)用解剖,一側(cè)隱動脈→一側(cè)股動脈→一側(cè)髂外動脈→腹主動脈→胸主動脈→升主動脈→主動脈弓→臂頭動脈→一側(cè)頸總動脈→頸內(nèi)動脈。,討論2.,應(yīng)用解剖,一側(cè)股深靜脈→一側(cè)髂外靜脈→一側(cè)髂總靜脈→后腔靜脈→右心房→前腔靜脈→一側(cè)頸內(nèi)靜脈,討論2.,應(yīng)用解剖,豬腦位于顱腔內(nèi)，分為延髓、腦橋、中腦、小腦、間腦

12、和端腦6部分。,討論2.,T2WI,應(yīng)用解剖,豬的顱內(nèi)靜脈竇解剖特點在某些方面與人非常相似，主要有矢狀竇、直竇、海綿竇、基底竇。,討論2.,DSA,腦靜脈竇栓塞部位與方法,栓塞部位 栓塞方法 優(yōu)缺點,討論3.,實驗方法的優(yōu)缺點,優(yōu)點 不破壞動物的正常生理狀態(tài) 可以在DSA下準(zhǔn)確選擇栓塞部位 可以通過不同的栓塞材料不同程度的閉塞腦靜脈竇 可以用MRI 各種常規(guī)和功能序列檢測腦實質(zhì)信號變化 實驗重復(fù)性強,討論4.,實驗方法

13、的優(yōu)缺點,缺點 對介入操作技術(shù)要求比較高 需要非常清楚的了解豬的血管和神經(jīng)解剖 鉑金彈簧圈等栓塞材料價格昂貴 實驗周期比較長,討論4.,實驗方法的有效性、可行性及臨床應(yīng)用價值,9例實驗動物中栓塞材料放置到靜脈竇指定位置的成功率是100% 種系和個體差異動物實驗與臨床差異臨床價值,討論4.,經(jīng)皮穿刺靜脈插管腦靜脈竇內(nèi)彈簧圈、明膠海綿植入致腦靜脈竇急性栓塞動物模型的實驗方法有效可行，此方法不開顱，腦組織無人為損傷，更加接近實際

14、發(fā)病狀況，而且可適用于MRI檢查。,結(jié)論1.,單純明膠海綿栓塞腦靜脈竇可再通；單純彈簧圈栓塞只能達(dá)到靜脈竇部分栓塞的效果；彈簧圈加明膠海綿栓塞能達(dá)到靜脈竇完全栓塞的效果。,結(jié)論2.,Rolandic靜脈后方矢狀竇、直竇完全栓塞后可出現(xiàn)腦顱內(nèi)壓增高、硬膜下出血和腦實質(zhì)靜脈性梗死。,結(jié)論3.,腦靜脈竇完全栓塞組在栓塞后30 min即可表現(xiàn)為雙頂、枕葉靜脈竇引流區(qū)T2WI、DWI高信號和ADC值的減低。,結(jié)論4.,腦靜脈竇栓塞后磁共振腦靜脈血