淺談hplc法檢測咸鴨蛋中非法添加蘇丹紅染料

1、1淺談淺談HPLCHPLC法檢測咸鴨蛋中非法添加蘇丹紅染料法檢測咸鴨蛋中非法添加蘇丹紅染料楊沫銀內(nèi)蒙古食品藥品檢驗(yàn)所（010020）摘要：摘要：目的：完善檢測方法，更好的監(jiān)控非法添加物。方法：采用高效液相色譜法，改變提取溶劑。結(jié)果：蘇丹紅Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ分別在0μgml～2.56μgml范圍呈良好線性關(guān)系，回收率在66%～80%之間，方法最低檢出限在3.3μgKg～7.5μgKg（按蛋總重計(jì)算）之間。結(jié)論：方法簡便，結(jié)果準(zhǔn)確。關(guān)鍵詞：關(guān)鍵

2、詞：咸鴨蛋高效液相色譜法蘇丹紅AbstractObjective:ToperfectthemethodofmeasuremethodBettermonitingofillegaladditives.Method:AdoptHPLCtochangethesolventextraction.Results:thecalibrationcurveshowedagoodlinearitywiththerangeof0μgml2.56μgmlfs

3、udantherangeofrecoverywas66%80%thelimitofdetectionwas3.3μgkg7.5μgkg(Accdingtocalculationofthetotalegg).Conclusion:themethedissimpletheresultisaccurate.蘇丹紅屬于化工染料，有Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ號(hào)四種。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道[1]，該物質(zhì)具有偶氮結(jié)構(gòu)，對(duì)人體的肝、腎器官有明顯的毒副作用。經(jīng)毒理學(xué)研究表明，蘇

4、丹紅具有致突變性和致癌性，國家明令禁止添加于食品中。本方法參照相關(guān)文獻(xiàn)[2]，將其提取方法進(jìn)行了修訂，改進(jìn)后的方法具有分離效果好、靈敏、準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)。1.樣品來源：市售。2.儀器與試藥：2.1儀器美國安捷侖1100高效液相色譜儀，紫外可見檢測器，離心機(jī)，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀等。2.2試劑乙睛、丙酮、甲酸、為色譜純，水為重蒸水，其他試劑均為分析純。2.3對(duì)照品蘇丹紅由D86199AugsburgGemany提供蘇丹紅Ⅰ、蘇丹紅Ⅱ、蘇丹紅Ⅲ、蘇丹紅Ⅳ純

5、度≥85%。2.4層析用氧化鋁（中性100目～200目）：105℃干燥2h，于干燥器中冷卻至室溫，每100g中加入2ml水降活，混勻密封，放置12h后使用。2.5氧化鋁層析柱：在層析柱管（1cm5cm的注射器管）底部塞入一薄層脫脂棉，干法裝入處理過的氧化鋁至3cm高，輕敲實(shí)后加一薄層脫脂棉，用10ml正己烷預(yù)淋洗，洗凈柱中雜質(zhì)后，備用。34.2含量計(jì)算按公式（1）計(jì)算蘇丹紅含量CVR=─────（1）MR：樣品中蘇丹紅含量，單位為mgK

6、g；C：由標(biāo)準(zhǔn)曲線得出的樣液中蘇丹紅的濃度，單位為μgml；V：樣液定容體積，單位為ml；M：樣品質(zhì)量，單位為g。4.3線性關(guān)系的考察分別精密稱取蘇丹紅Ⅰ、蘇丹紅Ⅱ、蘇丹紅Ⅲ、蘇丹紅Ⅳ各10mg（按實(shí)際含量折算），置250ml量瓶中，加乙醚適量使溶解，加正己烷稀釋至刻度，搖勻。精密吸取0ml、0.1ml、0.2ml、0.4ml、0.8ml、1.6ml，置25ml量瓶中，加丙酮稀釋至刻度，搖勻，分別精密吸取10μl進(jìn)樣，按上述色譜條件測定

7、。以峰面積對(duì)進(jìn)樣量進(jìn)行回歸分析，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果見表2表2標(biāo)準(zhǔn)曲線測定結(jié)果序號(hào)123456蘇丹紅Ⅰ濃度（μgml）00.16080.32160.64331.28672.5735峰面積積分值平均值07.0048514.2162828.2511554.9508110.3807回歸方程（蘇丹紅Ⅰ）y=42.78x0.2488r=0.9999蘇丹紅Ⅱ濃度（μgml）00.16710.33420.66841.33682.6736峰面積積分值平均

8、值07.093414.1028429.9773558.42848117.8936回歸方程（蘇丹紅Ⅱ）y=44.132x0.1852r=0.9999蘇丹紅Ⅲ濃度（μgml）00.15990.31980.63961.27922.5585峰面積積分值平均值06.78368513.0338727.8521754.41752110.2893回歸方程（蘇丹紅Ⅲ）y=43.122x0.2311r=0.9999蘇丹紅Ⅳ濃度（μgml）00.16090.