蘇丹紅Ⅰ對(duì)大鼠肝細(xì)胞的影響.pdf

1、蘇丹紅1號(hào)（1-phenylazo-2-hydroxynaphthol，SudanⅠ）是一種人工合成的脂溶性偶氮化合物，廣泛地應(yīng)用于各種工業(yè)生產(chǎn)。由于其對(duì)人體健康具有潛在危險(xiǎn)性，被禁止作為食品添加劑使用，但在我國(guó)和歐美市場(chǎng)上發(fā)現(xiàn)了含蘇丹紅的食品，引起了普遍關(guān)注。 早在1975年，國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)（InternationalAgencyforResearch on Cancer IARC）就將蘇丹紅1號(hào)歸為第三類致癌物。研究發(fā)現(xiàn)，

2、用體內(nèi)、體外遺傳毒性試驗(yàn)檢測(cè)蘇丹紅1號(hào)的遺傳毒性，其結(jié)果大多顯示陽(yáng)性。蘇丹紅1號(hào)通過(guò)多種途徑代謝，在其代謝過(guò)程中產(chǎn)生活性氧（ROS），其作用的靶器官是肝臟。受此啟發(fā)，我們?cè)囂接懱K丹紅1號(hào)產(chǎn)生遺傳毒性，是否與活性氧引起的氧化性DNA損傷有關(guān)。并且本研究選用大鼠肝臟細(xì)胞，它不僅是蘇丹紅1號(hào)作用的靶器官細(xì)胞，還保留了正常肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞的許多功能，是檢測(cè)外來(lái)化合物遺傳毒性的理想細(xì)胞系。已有的研究表明，SudanⅠ可通過(guò)多種途徑進(jìn)入生物體內(nèi)，對(duì)許多器

3、官和組織包括肝臟、腎臟、肺組織、心臟以及生殖器官造成損傷，并引發(fā)多種疾病。SudanⅠ在動(dòng)物與人體內(nèi)的代謝復(fù)雜，生物毒性不易監(jiān)測(cè)，并具有多樣性的特點(diǎn)，因此，SudanⅠ的毒性及分子機(jī)制目前還不清楚。本研究以大鼠肝臟細(xì)胞為研究對(duì)象，通過(guò)單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)，DPC檢測(cè)實(shí)驗(yàn)和MDA檢測(cè)等實(shí)驗(yàn)，研究了SudanⅠ的遺傳毒性作用，并對(duì)其可能的分子機(jī)制蘇丹紅1號(hào)進(jìn)行了討論。研究結(jié)果如下： 1.SudanⅠ導(dǎo)致DNA分子斷裂 Sud

4、anⅠ能否導(dǎo)致DNA分子斷裂，學(xué)界一直沒(méi)能達(dá)成共識(shí)。本研究以運(yùn)用單細(xì)胞凝膠電泳技術(shù)檢測(cè)SudanⅠ對(duì)大鼠肝臟細(xì)胞DNA的損傷作用。結(jié)果表明，SudanⅠ可引起大鼠DNA的損傷，并且隨著SudanⅠ濃度的逐漸增高，DNA的損傷也隨之加重，它們之間具有相應(yīng)的劑量效應(yīng)關(guān)系。所有SudanⅠ染毒濃度組（25μmol/L，50μmol/L and100μmol/L）均能導(dǎo)致大鼠肝臟細(xì)胞的DNA斷裂，并且具有極顯著性（p<0.01）。 2.

5、SudanⅠ導(dǎo)致DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)效應(yīng) 在正常細(xì)胞中存在著一定量的DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)（DNA-protein crosslinks，DPC）。這是DNA與核蛋白的正常聯(lián)系或其代謝的結(jié)果，對(duì)維持細(xì)胞的正?；顒?dòng)具有重要作用。當(dāng)有外來(lái)物理、化學(xué)因素作用時(shí)，則可誘導(dǎo)出過(guò)量的DPC。DPC與其他DNA損傷相比，較難修復(fù)，DPC僅發(fā)生在單鏈DNA上，表明這種交聯(lián)只能發(fā)生在DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄期間，因此DPC的形成，必將對(duì)DNA的構(gòu)象和功能（復(fù)制

6、與轉(zhuǎn)錄）產(chǎn)生嚴(yán)重的影響，并在其復(fù)制過(guò)程中容易造成某些重要基因（如抑癌基因）的丟失，導(dǎo)致腫瘤或某些嚴(yán)重疾病的發(fā)生。可見(jiàn)DPC過(guò)度增加是一種病理現(xiàn)象，是DNA分子的一種嚴(yán)重的遺傳損傷。 本研究以大鼠肝臟細(xì)胞為材料，采用SDS-KC1沉淀法對(duì)SudanⅠ致DPC效應(yīng)進(jìn)行了研究，研究證實(shí)了SudanⅠ可誘導(dǎo)大鼠肝細(xì)胞細(xì)胞產(chǎn)生DPC，DPC趨勢(shì)隨染毒濃度升高不斷升高。 3.SudanⅠ導(dǎo)致的大鼠肝臟細(xì)胞的脂質(zhì)過(guò)氧化作用 在