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1、實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)5血液基因組血液基因組DNA的純化分離的純化分離【實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康摹空莆談?dòng)物全血基因組DNA提取的方法【實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理】真核生物的DNA是以染色體的形式存在于細(xì)胞核內(nèi),而成熟的紅細(xì)胞除禽類外沒有細(xì)胞核,因此,制備DNA的原則是先要分離白細(xì)胞。提取DNA的一般過程是將分散好的白細(xì)胞在含SDS(十二烷基硫酸鈉)和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白質(zhì),再用酚和氯仿異戊醇抽提分離蛋白質(zhì),得到的DNA溶液經(jīng)乙醇沉淀使DNA從溶液中析出?!酒鞑?/p>
2、與試劑器材與試劑】1器材制冰機(jī)、冰箱、冷凍低溫超速離心機(jī)、常溫高速離心機(jī)、移液器,旋轉(zhuǎn)搖床、恒溫箱、恒溫水浴箱、離心管架、真空干燥器、燒杯、試劑瓶、離心管和吸頭等。2.試劑(1)PBS緩沖液:取NaCl8g,KCl0.2g,Na2HPO41.44g,KH2PO40.24g,定容至1000ml,高壓滅菌(2)提取液:含10mmolLTrisHCl(pH8.0),0.1molLEDTA,0.5%(mV)SDS。(3)20mgml蛋白酶K溶液
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