霉酚酸酯在腎移植中的治療藥物監(jiān)測研究及基因多態(tài)性的影響.pdf

1、目的：探索對腎移植受者霉酚酸酯(MMF)進行治療藥物監(jiān)測的意義，同時考察藥物代謝酶、轉(zhuǎn)運體的基因多態(tài)性對MMF的藥動學(xué)影響及其與MMF相關(guān)胃腸道反應(yīng)的關(guān)聯(lián)性，為腎臟移植受者霉酚酸酯的臨床個體化用藥提供參考。
　　方法：1.首先建立人血漿中MPA、MPAG的HPLC檢測方法并進行方法學(xué)驗證，進行對206名腎移植受者的MPA、MPAG的藥物谷濃度根據(jù)是否發(fā)生藥物不良反應(yīng)分組，通過ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)藥物不良反應(yīng)的MPA、MPAG的藥物谷

2、濃度截斷值。測定24例腎移植早期受者全程AUC，用DAS軟件分析藥動學(xué)參數(shù)，用SPSS軟件逐步回歸法擬合估算MPA AUC0-12h的回歸方程，并用Bland-Altman法對其精準性進行評價。
　　2.采用Sequenom MassArray系統(tǒng)進行UGT、ABCC、ABCG、SLCO1B和SLC22A基因分型，針對24例腎移植早期受者全程測定的AUC，并根據(jù)不同基因型進行分組比較其對MMF的藥動學(xué)影響。另通過隨訪觀察記錄199

3、例腎移植受者用藥期間的MMF相關(guān)胃腸道反應(yīng)，運用SPSS統(tǒng)計軟件和Haploview4.2遺傳分析軟件研究基因多態(tài)性與MMF相關(guān)胃腸道反應(yīng)的關(guān)聯(lián)性。
　　結(jié)果：1.MPA、MPAG分別在0.2~50μg/mL，2.5~500μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r>0.999)，絕對回收率均>80%，方法回收率在90%~110%之間，日內(nèi)及日間RSD均小于10%。
　　2.在2015年8月~2016年12月期間，共檢測腎移植隨訪患者

4、藥物谷濃度820例次，發(fā)生感染共55例次，發(fā)生MMF相關(guān)性胃腸道反應(yīng)有34例次，發(fā)生骨髓毒性有322例次。通過對MPA、MPAG谷濃度進行ROC曲線分析，發(fā)現(xiàn)MPA C0小于2.36mg/L，MPAG C0大于40.70mg/L是發(fā)生藥物不良反應(yīng)的最佳截斷值。
　　3.在有限采樣法中，單點擬合的復(fù)相關(guān)系數(shù)均較低，3點以上擬合的復(fù)相關(guān)系數(shù)較高，其中3點（1h、4h、8h）和4點（0.5h、1h、4h、8h）擬合的回歸方程與實際MPA

5、 AUC0-12h的相關(guān)性好、誤差低，結(jié)合預(yù)測精準性、檢測成本和可操作性，推薦3點的回歸模型 MPA AUC0-12h=4.74+4.65C4+1.656C1+4.538C8（r2=0.929）。
　　4.分析不同基因型對MPA、MPAG藥動學(xué)參數(shù)影響：對MPAAUC0-12h有影響的是ABCG2 rs2231142(23.83±3.39 vs30.40±10.51, p=0.034)；對MPAAUC0-12h與 MPAG AUC

6、0-12h比值有影響的是 SLCO1B1 rs4149057(.0443±.01481 vs.0710±.03440, p=0.022)，對 MPACmax有影響的是 SLCO1B1 rs2291075(5.75±1.81 vs8.17±2.43, p=0.014)。
　　5. UGT1A9 rs13418420、UGT1A8 rs1042597和SLC22A8 rs4149180基因多態(tài)性與MMF胃腸道反應(yīng)顯著相關(guān)，UGT1A9

7、 rs13418420TT/CT/CC3種基因型在正常組與胃腸道反應(yīng)組的分布有差異，p=0.0277；UGT1A8 rs1042597GG/CC/CG3種基因型在正常組與胃腸道反應(yīng)組的分布有差異，p=0.0277；SLC22A8 rs4149180TT/TC/CC3種基因型在正常組與胃腸道反應(yīng)組的分布有差異，p=0.0062。 UGT2B7rs12233719-rs28365062-rs28365063-rs4292394-rs6229

8、8861-rs7438135- rs7439366組成的單體型 GGAAATC在胃腸道反應(yīng)組分布頻率為0.476，顯著高于正常組（分布頻率0.309，p=0.028）。
　　結(jié)論：1.本研究建立的同時測定人血漿中MPA、MPAG的HPLC法具有準確、方便、快速等優(yōu)點，可以用于腎移植受者血藥濃度監(jiān)測。
　　2.監(jiān)測 MPA及 MPAG谷濃度可以作為 MMF治療藥物監(jiān)測指標，MPA C0小于2.36mg/L，MPAG C0大于4

9、0.70mg/L是發(fā)生藥物不良反應(yīng)的最佳截斷值。
　　3.腎移植患者使用MMF，以服藥后1h、4h、8h的MPA濃度能夠很好的估算MPA AUC0-12h，可作為臨床監(jiān)測MPA治療藥物監(jiān)測的指標。
　　4.ABCG2 rs2231142，SLCO1B1 rs4149057，SLCO1B1 rs2291075基因多態(tài)性是影響MMF在腎移植受者藥動學(xué)改變的重要因素。
　　5.UGT1A9 rs13418420、UGT1A8