最全的tlc經(jīng)驗(yàn) 薄層層析 顯色劑

1、最全的最全的TLC經(jīng)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)薄層色譜（TLC）是一種非常有用的跟蹤反應(yīng)的手段，還可以用于柱色譜分離中合適溶劑的選擇。薄層色譜常用的固定相有氧化鋁或硅膠，它們是極性很大（標(biāo)準(zhǔn)）或者是非極性的（反相）。流動(dòng)相則是一種極性待選的溶劑。在5.301中以及大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)中，都將使用標(biāo)準(zhǔn)硅膠板。將溶液中的反應(yīng)混合物點(diǎn)在薄板上，然后利用毛細(xì)作用使溶劑（或混合溶劑）沿板向上移動(dòng)進(jìn)行展開。根據(jù)混合物中組分的極性，不同化合物將會(huì)在薄板上移動(dòng)不同的距離。極性

2、強(qiáng)的化合物會(huì)“粘”在極性的硅膠上，在薄板上移動(dòng)的距離比較短。而非極性的物質(zhì)將會(huì)在流動(dòng)的溶劑相中保留較長的時(shí)間從而在板上移動(dòng)較大的距離?；衔镆苿?dòng)的距離大小用Rf值來表達(dá)。這是一個(gè)位于0～1之間的數(shù)值，它的定義為：化合物距離基線（最先點(diǎn)樣時(shí)已經(jīng)確定）的距離除以溶劑的前鋒距離基線的距離。薄層色譜（薄層色譜（TLC）實(shí)驗(yàn)步驟：）實(shí)驗(yàn)步驟：1)切割薄板。切割薄板。通常，買來的硅膠板都是方形的玻璃板，必需用鉆石頭玻璃刀按照模板的形狀進(jìn)行切割。在切

3、割玻璃之前，用尺子和鉛筆在薄板的硅膠面上輕輕地標(biāo)出基線的位置（注意不要損壞硅膠面）。借助鋒利的玻璃切割刀和一把引導(dǎo)尺，你便可方便地進(jìn)行玻璃切割。當(dāng)整塊玻璃被切割后，你就可以進(jìn)一步將其分成若干獨(dú)立的小塊了。（開始的時(shí)候，也許你會(huì)感到有一些難度，但經(jīng)過一些訓(xùn)練以后，你便會(huì)熟練地掌握該項(xiàng)技術(shù)。）2)選取合適的溶劑體系。選取合適的溶劑體系?；衔镌诒“迳弦苿?dòng)距離的多少取決于所選取的溶劑不同。在戊烷和己烷等非極性溶劑中，大多數(shù)極性物質(zhì)不會(huì)移動(dòng)，但

4、是非極性化合物會(huì)在薄板上移動(dòng)一定距離。相反，極性溶劑通常會(huì)將非極性的化合物推到溶劑的前段而將極性化合物推離基線。一個(gè)好的溶劑體系應(yīng)該使混合物中所有的化合物都離開基線，但并不使所有化合物都到達(dá)溶劑前端，Rf值最好在0.15~0.85之間。雖然這個(gè)條件不一定都能滿足，但這應(yīng)該作為薄層色譜分析的目標(biāo)（在柱色譜中，合適的溶劑應(yīng)該滿足Rf在0.2~0.3之間）。那么，應(yīng)該選取哪些溶劑呢？一些標(biāo)準(zhǔn)溶劑和他們的相對(duì)極性（從LLP中摘錄）列于如下：強(qiáng)極

5、性溶劑：甲醇〉乙醇〉異丙醇中等極性溶劑：乙氰〉乙酸乙酯〉氯仿〉二氯甲烷〉乙醚〉甲苯非極性溶劑：環(huán)己烷，石油醚，己烷，戊烷常用混合溶劑：乙酸乙酯己烷：常用濃度0~30%。但有時(shí)較難在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上完全除去溶劑。乙醚戊烷體系：濃度為0~40%的比較常用。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上非常容易除去。乙醇己烷或戊烷：對(duì)強(qiáng)極性化合物5~30%比較合適。二氯甲烷己烷或戊烷：5~30%，當(dāng)其他混合溶劑失敗時(shí)可以考慮使用。3)將1~2mL選定的溶劑體系倒入展開池中，在展

6、開池中放置一大塊濾紙。選定的溶劑體系倒入展開池中，在展開池中放置一大塊濾紙。4)將化合物在標(biāo)記過的基線處進(jìn)行點(diǎn)樣。將化合物在標(biāo)記過的基線處進(jìn)行點(diǎn)樣。我們用的點(diǎn)樣器是買來的，此外，點(diǎn)樣器也可從加熱過的Pasteur吸管上拔下（你可以參照UROP）。在跟蹤反應(yīng)進(jìn)行時(shí)，一定要點(diǎn)上起始反應(yīng)物、反應(yīng)混合物以及兩者的混合物。5)展開：展開：讓溶劑向上展開約90%的薄板長度。6)從展開池中取出薄板并且馬上用鉛筆標(biāo)注出溶劑到達(dá)的前沿位置。從展開池中取出

7、薄板并且馬上用鉛筆標(biāo)注出溶劑到達(dá)的前沿位置。根據(jù)這個(gè)算Rf數(shù)值。7)讓薄板上的溶劑揮發(fā)掉。讓薄板上的溶劑揮發(fā)掉。8)用非破壞性技術(shù)觀察薄板。用非破壞性技術(shù)觀察薄板。最好的非破壞性方法就是用紫外燈進(jìn)行觀察。將薄板放在紫外燈下，用鉛筆標(biāo)出所有有紫外活性的點(diǎn)。盡管在5.301中不用這種方法，但我們將采用另一常用的無損方法用碘染色法。（你可以參看UROP）。9)用破壞性方式觀測薄板。用破壞性方式觀測薄板。當(dāng)化合物沒有紫外活性的時(shí)候，只能采用這種

8、方法。在5.3013，5一二硝基苯酰氯檢出物：醇類。溶液：I2％本品甲苯溶液；Ⅱ0.5％氫氧化鈉溶液；ⅢO.002％羅丹明溶液。方法：先噴(I)，在空氣中干燥過夜，用蒸氣薰2min，將紙或薄層通過試液(Ⅱ)30s，噴水洗，趁濕通過(Ⅲ)15s，空氣干燥，紫外燈下觀察。硝酸鈰銨檢出物：醇類。溶液：I1％硝酸鈰銨的0.2mol／L硝酸溶液；ⅡNN二甲基對(duì)苯二胺鹽酸鹽1.5g溶于甲醇、水與乙酸(128m125m115m1)混合液中，用前將(I

9、)與(Ⅱ)等量混合。噴板后于105oC加熱5min。③香草醛／硫酸檢出物：高級(jí)醇、酚、甾類及精油。溶液：香草醛1g溶于硫酸lOOml。方法：噴后于120oC加熱至呈色最深。④二苯基苦基偕肼’檢出物：醇類、萜烯、羰基、酯與醚類。溶液：本品15mg溶于氯仿25ml中。方法：噴后于110oC加熱5～lOmin。結(jié)果：紫色背景呈黃色斑點(diǎn)。(3)醛酮類品紅／亞硫酸檢出物：醛基化合物。溶液：I0.01%品紅溶液，通入二氧化硫直至無色；Ⅱ0.05mo

10、l／L氯化汞溶液；ⅢO.05mol／L硫酸溶液。方法：將I、Ⅱ、Ⅲ以1：1：10混合，用水稀釋至l00ml。鄰聯(lián)茴香胺檢出物：醛類、酮類。溶液：本品乙酸飽和溶液。2，4二硝基苯肼檢出物：醛基、酮基及酮糖。溶液：I0.4％本品的2mol／L鹽酸溶液；Ⅱ本品O.1g溶于乙醇l00ml中，加濃鹽酸lml。方法：噴溶液I或Ⅱ后，立即噴鐵氰化鉀的2mol／L鹽酸溶液。結(jié)果：飽和酮立即呈藍(lán)色；飽和醛反應(yīng)慢，呈橄欖綠色；不飽和羰基化合物不顯色。繞丹寧

11、檢出物：類胡蘿卜素醛類。溶液：I1%～5%繞丹寧乙醇溶液；Ⅱ25%氫氧化銨或27%氫氧化鈉溶液。方法：先噴溶液I，再噴溶液Ⅱ，干燥。(4)有機(jī)酸類1溴甲酚綠檢出物：有機(jī)酸類。溶液：溴甲酚綠0.1g溶于乙醇500ml和0.1molL氫氧化鈉溶液5ml。方法：浸板。結(jié)果：藍(lán)色背景產(chǎn)生黃色斑點(diǎn)。2高錳酸鉀／硫酸檢出物：脂肪酸衍生物。溶液：見通用顯色劑酸性高錳酸鉀。3過氧化氫檢出物：芳香酸。溶液：0.3%過氧化氫溶液。方法：噴后置紫外光(365

12、nm)下觀察。結(jié)果：呈強(qiáng)藍(lán)色熒光。42，56二氯苯酚靛酚鈉檢出物：有機(jī)酸與酮酸。溶液：0.1%本品的乙醇溶液。方法：噴后微溫。結(jié)果：藍(lán)色背景呈紅色。(5)酚類1Emerson試劑(4氨基安替比林／鐵氰化鉀(Ⅲ))檢出物：酚類、芳香胺類及揮發(fā)油。溶液：I4氨基安替比林1g溶于乙醇100ml；Ⅱ鐵氰化鉀(Ⅲ)4g溶于水50ml，2用乙醇稀釋至100ml。方法：先噴溶液I，3在熱空氣中干燥5min，4再噴溶液Ⅱ，5再于熱空氣中干燥5min，6

13、然后將板置含有氨蒸氣(25％氨溶液)的密閉容器中。結(jié)果：斑點(diǎn)呈橙淡紅色。揮發(fā)油在亮黃色背景下呈紅色斑點(diǎn)。7Boute反應(yīng)檢出物：酚類、氯、溴、烷基代酚。方法：將薄層置有NO2蒸氣(含濃硝酸)的容器中3～10min，8再用NH2蒸氣(濃氨液)處理。9氯醌(四氯代對(duì)苯醌)檢出物：酚類。溶液：1％本品的甲苯溶液。10DDQ(二氯二氰基苯醌)試劑檢出物：酚類。溶液：2％本品的甲苯溶液。11TCNE(四氰基乙烯)試劑檢出物：酚類、芳香碳?xì)浠?、雜