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1、SUR1SUR1過表達實驗設計方案過表達實驗設計方案一實驗目的:一實驗目的:使SUR1基因在植物體內超表達二實驗方法:二實驗方法:三實驗步驟三實驗步驟①RTPCR將RNA反轉錄成CDNARNARNA提?。ㄌ崛。?0℃70℃保存)保存)1.組織剪碎加入1mlTrizol,冰上勻漿(邊勻漿邊暫停)2.轉入一新EP管中(1.5ml),室溫保存5min3.加氯仿0.2ml,振蕩混合(手搖劇烈),室溫放置5min4.10000rpm4℃離心15m
2、in851AAATTGGCTGGATCGCCTTGAATGATCCCGAGGGCGTTTTCGAGACCACC901AAGGTGTTACAATCCATCAAACAGAATCTTGACGTAACTCCTGACCCTGC951CACAATAATTCAGGCTGCACTTCCAGCGATCCTGGAGAAAGCGGACAAAA1001ACTTCTTTGCAAAGAAGAACAAGATACTCAAACATAATGTTGATTTGGTG1051T
3、GTGATAGGCTCAAGGACATCCCCTGTGTCGTCTGTCCCAAGAAACCTGA1101GTCTTGCACTTACTTATTGACAAAGTTGGAGCTGTCATTGATGGATAATA1151TCAAGGACGATATAGATTTTTGCGTAAAACTGGCCAGAGAGGAGAATCTC1201GTGTTTCTACCAGGGGATGCTCTGGGTTTGAAGAACTGGATGAGGATAAC1251CATCG
4、GAGTCGAAGCTCATATGCTTGAGGATGCACTTGAGAGACTGAAGG1301GTTTCTGTACACGTCATGCCAAGAAGACAGAGACAGAAACTGAGTCACTT1351CAAGCTTTGAAACTGAGTGATAATAATCTCGAAATGTAA根據引物設計原則,利用軟件Primerpremier5.0設計上下游引物進行PCR擴增得到目的基因SUR1③載體的構建圖1:過表達載體User載體的連接Us
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