藥物動力學(xué)方法學(xué)模板

1、111人血漿中氯唑沙宗濃度的測定方法人血漿中氯唑沙宗濃度的測定方法11.1儀器與色譜條件儀器與色譜條件11.1.1儀器TSQQuantumAccess三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀配備電噴霧離子源（ESI）源及Xcalibur2.0.7數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)（美國ThermoScientific公司）；島津LC20AD液相泵島津CBM20A系統(tǒng)控制器島津CTO20A柱溫箱，SIL20AC自動進樣器(日本島津公司)；電子天平(型號BS124S，賽多利斯Sar

2、tious公司)；旋渦混合器（型號XW80C，上海醫(yī)大儀器廠）；高速離心機（型號16121，上海手術(shù)器械廠）；數(shù)控超聲清洗器（型號KQ2200DE，昆山市超聲儀器有限公司）；數(shù)顯恒溫水浴鍋（型號HH2，國華電器有限公司）。11.1.2質(zhì)譜條件質(zhì)譜條件用LCMSMS進行測定，離子源為ESI源，負(fù)離子化方式檢測，噴霧電壓為2.8kV；加熱毛細(xì)管溫度為350℃；鞘氣（N2）壓力為40Arb；輔助氣（N2）壓力為15Arb；碰撞氣（Ar）壓力為

3、1.5mTr；碰撞誘導(dǎo)解離（CID）電壓分別為21eV（氯唑沙宗），23eV（瑞格列奈）。掃描方式為選擇性反應(yīng)監(jiān)測（SRM）用于定量分析的離子反應(yīng)分別為mz168.0→mz132.1（氯唑沙宗）和mz451.3→mz379.3（內(nèi)標(biāo)瑞格列奈）。11.1.3色譜條件色譜條件色譜柱：SHIMADZUShimpack:VPODS；5Columnsize:1502.0mm；SerialNO.9042015；柱溫：40℃；流動相A為甲醇，流動相B

4、為水相（含5mmolL醋酸銨）；梯度洗脫，梯度設(shè)定為：0～0.5min，B50%；0.5～1.0min，B10%；1.0～4.0min，B10%；4.0～4.5min，B50%；4.5～6.0min，B50%；流速：0.3mLmin1；進樣量：5L。11.2藥品與試劑藥品與試劑11.2.1對照品對照品內(nèi)標(biāo)瑞格列奈對照品為Dr.Reddy’sLabatiesItd公司產(chǎn)品，批號：REWS0801；氯唑沙宗由中國藥品生物制品檢定所提供，批號

5、：10036420030111.2.2試驗試劑試驗試劑甲醇、乙腈為色譜純（美國Tedia公司）；醋酸銨為分析純(南京化學(xué)試劑一廠)。11.3方法學(xué)確證方法學(xué)確證11.3.1樣品處理與測定樣品處理與測定取人血漿樣品200L至Effendf管，加入內(nèi)標(biāo)瑞格列奈(10gml)50L，混勻后加入乙腈600L，渦旋振蕩1min，12000轉(zhuǎn)min離心10min，取上清液10L，加入990L甲醇進行稀釋，渦旋振蕩30s混勻，取上清液5L進樣，測定受

6、試者血漿中氯唑沙宗的濃度。11.3.2專屬性試驗專屬性試驗在本試驗條件下，氯唑沙宗的保留時間約為3.6min，瑞格列奈的保留時間約為4.0min。通過對來自6個不同個體的空白血漿測定表明，血漿中的內(nèi)源性雜質(zhì)不干擾樣品測定，受試者的空白血漿、空白血漿添加氯唑沙宗和內(nèi)標(biāo)（瑞格列奈）標(biāo)準(zhǔn)品及受試者服用受試制劑后的血漿樣品的色譜圖見圖11至圖13。3圖12空白血漿加氯唑沙宗（1gml）和瑞格列奈LCMSMS測定試驗圖譜（圖譜來源于日內(nèi)精密度研究