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1、深圳技師學(xué)院應(yīng)用生物系深圳技師學(xué)院應(yīng)用生物系《抗生素藥物稀釋法與管碟法的抗菌試驗(yàn)》論文項(xiàng)目名稱:抗生素藥物稀釋法與管碟法的抗菌試驗(yàn)項(xiàng)目組長(zhǎng):唐鵬程項(xiàng)目組成員:唐鵬程張君曼許杰生肖偉亨謝秋惠蔣銘強(qiáng)李淑霞鄭慧珠陳芃仲李文婷張妮何磊班級(jí):10生物J4指導(dǎo)教師:任茜莫全毅二0一三年三月二十一日結(jié)論:由稀釋梯度至,細(xì)菌總數(shù)計(jì)數(shù)表可知,為我們所需要的梯度。610?610?一試管法(無(wú)菌操作)2.藥物稀釋法2.1預(yù)實(shí)驗(yàn)(2批):取營(yíng)養(yǎng)肉湯100ml,
2、試管10支,第一管加藥物1ml9ml肉湯充分混合,第二管取第一管中1ml9ml肉湯混勻,第三管取第二管1ml9ml肉湯混勻,以此類推至第九管,取出1ml棄去,第十管不加藥,只加了營(yíng)養(yǎng)肉湯9ml。稀釋完畢后,十管的藥物稀釋度為,,…,,及陰性。110?210?310?910?2.2菌液制備:在上述的1.3中,菌液制備最后所得的菌液中取1ml用營(yíng)養(yǎng)肉湯作為稀釋劑梯度稀釋至,用滅過(guò)菌的移液槍每管加0.05ml,第九管不加菌作為陰性對(duì)照,第十6
3、10?管不加藥物加菌為陽(yáng)性對(duì)照。加完菌后充分混勻,經(jīng)37℃培養(yǎng)18h后判斷結(jié)果。藥物稀釋法找出最大抗菌效價(jià)表,加菌量為0.05ml結(jié)果110?210?310?410?510?610?710?810?陰性陽(yáng)性第一批--++++++-+第二批--++++++-+抗菌效價(jià)(u)250252.5備注:“-”表示澄清,“+”表示渾濁,“”表示沒(méi)必要算由藥物稀釋法找出最大抗菌效價(jià)表,可知藥液的最高稀釋倍數(shù)為100倍,藥物抗菌效價(jià)為20x10008=
4、2500u第一管為250u,第二管為25u,第三管為2.5u。2.3確定(最大抗菌效價(jià),6批):每批取營(yíng)養(yǎng)肉湯100ml,試管7支,第一管加藥物1ml9ml肉湯充分混合,第二管取第一管中2ml18ml肉湯混勻,第三管取第二管10ml10ml肉湯混勻,第四管取第三管10ml10ml肉湯混勻,第五管取第四管10ml10ml,第六管取第二管1ml9ml,第七管不加菌作為陰性對(duì)照,第八管不加藥物加菌為陽(yáng)性對(duì)照。藥物稀釋度為1:101:1001:
5、2001:4001:8001:1000,加完菌后充分混勻,經(jīng)37℃培養(yǎng)18h后判斷結(jié)果。藥物稀釋法擴(kuò)大梯度范圍找出更加準(zhǔn)確的抗菌效價(jià)表結(jié)果1:101:1001:2001:4001:8001:1000陰性陽(yáng)性第一批----++-+第二批----++-+第三批----++-+第三批----++-+第四批----++-+第五批----++-+第六批----++-+試驗(yàn)結(jié)果:本試驗(yàn)所采用的藤黃微球菌在肉湯培養(yǎng)基中,正常情況下均為混濁生長(zhǎng),培養(yǎng)基
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