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1、近年來(lái),環(huán)境內(nèi)分泌干擾物尤其是具有雌激素活性的內(nèi)分泌干擾物因?qū)ι飩€(gè)體及其后代生長(zhǎng)發(fā)育的不良影響以及對(duì)生態(tài)系統(tǒng)的潛在危害而受到高度重視。其中酚類污染物因其環(huán)境分布廣泛、生態(tài)危害嚴(yán)重而受到廣泛關(guān)注。目前對(duì)酚類污染物雌激素效應(yīng)的研究?jī)H限于單種物質(zhì),對(duì)于混合物聯(lián)合作用的研究則鮮有報(bào)道。
本文以金魚(yú)為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,通過(guò)活體試驗(yàn)建立了卵黃蛋白原(Vtg)誘導(dǎo)分析法,研究壬基酚(NP)、辛基酚(OP)、雙酚A(BPA)和2,4-二氯酚(2
2、,4-DCP)單獨(dú)作用下對(duì)金魚(yú)Vtg的誘導(dǎo)能力,確定四種酚類對(duì)Vtg誘導(dǎo)的劑量-效應(yīng)關(guān)系,評(píng)價(jià)其雌激素活性。在此基礎(chǔ)上探討四種酚類污染物以等效應(yīng)濃度比和等環(huán)境濃度比組成的混合物共同作用下的聯(lián)合效應(yīng),并應(yīng)用毒性單位法、相加性指數(shù)法、混合毒性指數(shù)法和相似性參數(shù)法四種聯(lián)合作用指數(shù)評(píng)價(jià)方法和濃度相加(CA)模型探討混合物的聯(lián)合作用類型,以期為酚類污染物的環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)和環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定提供依據(jù)。本文同時(shí)研究了酚類污染物單獨(dú)和聯(lián)合作用下對(duì)金魚(yú)肝臟指
3、數(shù)(HSI)、超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)和谷胱苷肽硫轉(zhuǎn)移酶(GST)活性的影響,探討其作為酚類污染物生物標(biāo)志物的可能性。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:NP,OP和BPA均可誘導(dǎo)雄性金魚(yú)合成Vtg,具有雌激素活性,誘導(dǎo)閾濃度分別為15,5,10μg·L-1,各種化合物對(duì)Vtg的誘導(dǎo)均呈現(xiàn)明顯的劑量-效應(yīng)關(guān)系,可用非線性模型進(jìn)行擬合。三種酚類污染物誘導(dǎo)Vtg的半效應(yīng)濃度(EC50)分別為255.7,79.6,113.4μ
4、g·L·1,相對(duì)于E2的誘導(dǎo)能力分別為3.05×10-4,9.80×10-4和6.88×10-4,雌激素活性以O(shè)P最高,BPA略低,NP最小。
2,4-DCP能夠誘導(dǎo)雄性金魚(yú)合成Vtg,但誘導(dǎo)量遠(yuǎn)低于陽(yáng)性對(duì)照組,因此具有微弱的雌激素活性。NP、OP和BPA以等效應(yīng)濃度比和等環(huán)境濃度比得到的兩種混合物對(duì)雄性金魚(yú)Vtg的誘導(dǎo)同樣呈現(xiàn)明顯的劑量-效應(yīng)關(guān)系,應(yīng)用Weibull函數(shù)進(jìn)行非線性擬合結(jié)果較好,兩種混合物對(duì)Vtg誘導(dǎo)的EC
5、50分別為149.2和168.7μg·L-1,等效應(yīng)濃度比混合物的雌激素活性略高于等環(huán)境濃度比混合物。采用不同的指數(shù)評(píng)價(jià)方法以及CA模型對(duì)聯(lián)合作用類型的評(píng)價(jià)結(jié)果相同,三種酚類污染物基本呈現(xiàn)相加作用,而在低濃度區(qū)表現(xiàn)為弱相加作用,高濃度區(qū)表現(xiàn)為弱協(xié)同作用。CA模型的預(yù)測(cè)結(jié)果與實(shí)驗(yàn)結(jié)果在全劑量范圍內(nèi)基本一致,說(shuō)明三種酚類污染物的雌激素效應(yīng)機(jī)理類似,可采用CA模型進(jìn)行聯(lián)合效應(yīng)的預(yù)測(cè)。
NP、OP、BPA和2,4-DCP對(duì)金魚(yú)HS
6、I均有顯著誘導(dǎo)效應(yīng),聯(lián)合作用下HSI的誘導(dǎo)效應(yīng)更為明顯,因此HSI可作為酚類內(nèi)分泌干擾物污染的參考指標(biāo)。單獨(dú)作用下四種酚類污染物對(duì)金魚(yú)肝臟SOD和CAT活性的影響表現(xiàn)出較為一致的變化趨勢(shì):酶活性隨暴露濃度的升高先上升后下降。四種酚類污染物單獨(dú)作用下對(duì)金魚(yú)GST活性的影響表現(xiàn)為:較高濃度可被顯著誘導(dǎo)。NP、OP和BPA聯(lián)合作用下對(duì)SOD、CAT和GST三種酶活性的影響呈現(xiàn)明顯的劑量-效應(yīng)關(guān)系,酶活性均隨混合物濃度的升高而先上升后下降?;旌?/p>
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