acl系列血凝儀檢測原理介紹及血栓止血臨床基礎(chǔ)

1、ACL全自動凝血/纖溶分析儀,生產(chǎn)商：IL公司簡介,始建于 1959年處于全球?qū)嶒炇以\斷領(lǐng)域的領(lǐng)先地位推出第一臺血氣分析儀最先推出火焰光度計獲得離心式分析技術(shù)的專利,Milano Office,IL:Instrumentation Laboratory,銷售網(wǎng)絡(luò):歐洲、中東、拉丁美洲、太平洋地區(qū)總部在Milano（意大利）美國和加拿大總部在 Lexington （美國）從1992年開始，BC與IL結(jié)成戰(zhàn)略聯(lián)盟，從產(chǎn)

2、品和市場雙方面合作，共同領(lǐng)導(dǎo)全球血液和流式細(xì)胞自動分析的發(fā)展。,生產(chǎn)商：IL公司簡介,ACL系列發(fā)展的軌跡,1985年 ACL8101988年 ACL100/200/300/300R1991年 ACL1000/2000/3000/3000Plus1995年 ACL Futura1996年 ACL 60001997年 ACL 7000

3、2000年 ACL Advance2001年 ACL 90002002年 ACL 80002005年 ACL TOP,,,目前在市場上推出的ACL型號,ACL 100ACL 200ACL 7000ACL 9000ACL AdvanceACL TOP,,,ACL各型號的共同特點,光學(xué)凝固法:常規(guī)檢測：PT/FIB,APTT,TT特殊檢測：因子，F(xiàn)IB-C

4、lauss，PC，PS，LAC，APC-R，口服抗凝藥試驗提供凝固反應(yīng)曲線FIB:兩種檢測方法PT衍生FIB法和FIB-Clauss法標(biāo)準(zhǔn)RS-232 接口，方便聯(lián)網(wǎng)條形碼掃描器，方便樣品信息輸入和實驗室管理完美的儀器和儀器原廠試劑組合提供精確的結(jié)果完備的測試試劑、質(zhì)控品、校正品組合先進(jìn)的基因重組試劑、合成試劑：PT（基因重組、WHO標(biāo)準(zhǔn)）、APTT（合成）檢測動物標(biāo)本結(jié)果可靠（ACL7000以上）,各檢測方法的檢測項

5、目凝固法 PT,APTT,TT,FIB(PT-Based & FIB-Clauss), FactorsII, V,VII,X,VIII,IX,XI,XII,Protein C, Protein S, APC-R, LAC,PCX,HPX發(fā)色底物法 Anti-thrombin, Heparin(普通&低分子), PLG, Plasmin Inhibitor, Protein C 免疫比濁法

6、D-Dimer, vWF Ag , vWF Act ,Protein S, HS-CRP,ACL各型號的共同特點,不同型號血凝儀檢測原理介紹,ACL 00/7000ACL 8/9/10000ACL FUTURA/ADVANCEACL TOP,ACL 00/10000檢測原理,凝固法（散射比濁）,凝固法：檢測根據(jù)Fib的凝固形成顆粒，檢測900光散射值的增加值。信號經(jīng)過軟件設(shè)計的一系列數(shù)學(xué)運算法則連續(xù)監(jiān)測凝固過程曲線，獲得結(jié)果。,

7、發(fā)色底物法,通過物質(zhì)的反應(yīng)顯色，檢測吸光度變化值。,免疫比濁法（透射比濁）,借助抗原抗體反應(yīng)系統(tǒng)，檢測反應(yīng)終點吸光度變化值；只表示含量，不反映所檢物活性。,ACL 00/10000檢測原理,凝固法（光散比濁檢測）波長：660nm(ACL00/10000)發(fā)色底物法（透射光比色檢測）波長：405nm (ACL200以上儀器)免疫比濁法： （透射光比濁檢測）波長：405nm (ACL200以上儀器),凝固法,發(fā)色底物和免疫比濁法,

8、ACL 00/10000檢測原理,,離心式液體分配系統(tǒng)：加入樣品和試劑后，反應(yīng)盤1200rpm旋轉(zhuǎn)，使其在瞬間充分混勻，結(jié)果準(zhǔn)確、精密度高；,ACL 00/10000檢測原理,清洗緩沖液 Wash R Emulsion的作用：清洗樣本和試劑針內(nèi)外表面；作為光學(xué)凝固（散射比濁法）中的檢測參比100％不能用其它自配的清洗液替代反應(yīng)盤Rotor：20個獨立反應(yīng)杯；每杯各有兩個隔開的腔；內(nèi)圈裝樣本或第二試劑；外圈只裝試劑；旋轉(zhuǎn)

9、過程，試劑和樣本瞬間混勻；,ACL ADVANCE檢測原理,凝固法（透射比濁，880nm,180度角檢測）,ACL ADVANCE檢測原理,發(fā)色底物法：405nm,ACL ADVANCE檢測原理,免疫比濁法：405nm,ACL TOP檢測原理,凝固法（透射比濁，671nm,180度角檢測）,ACL TOP檢測原理,發(fā)色底物法：405nm,ACL TOP檢測原理,免疫比濁法：671nm或405nm,光學(xué)凝固法檢測優(yōu)點,直接測定，結(jié)果可靠

10、數(shù)據(jù)連續(xù)監(jiān)測、本底掃描提供凝固反應(yīng)曲線，為實驗室及臨床提供更多信息去處黃疸血、高脂血本底，消除干擾準(zhǔn)確測定低纖維蛋白原樣品,結(jié)果可靠,光散檢測原理每次測試收集1100個數(shù)據(jù)點，連續(xù)平均數(shù)據(jù)處理方式，利用先進(jìn)的第一微分和第二微分法則測定結(jié)果，穩(wěn)定可靠，精密度高，重復(fù)性好,光學(xué)法提供凝固曲線,,,,,,,,,,,Time,,,LS,,本底掃描，消除黃疸、高血脂干擾,數(shù)據(jù)連續(xù)監(jiān)測,凝固點確定：最大反應(yīng)速度，與光散絕對值無關(guān),干擾因素

11、,游離血紅蛋白〈1g/L,溶血到一定程度,本身會激活凝血因子甘油三酯〈7.7mmol/L膽紅素〈256.5umol/L,血栓止血臨床基礎(chǔ),血小板激活一次血栓形成,血管収縮,凝固因子激活二次血栓形成,線溶系統(tǒng)激活血栓溶解,止凝血過程,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,

12、,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,內(nèi)皮細(xì)胞,,,血管収縮,血管収縮,血管損傷(出血),,血小板,,,①,,,血小板,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,②,③,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,

13、,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,④,血液中包含的凝血因子,血凝瀑布學(xué)說,外源性凝血途徑與 PT,PT是反映外源性凝血途徑中II、V、VII、X因子水平的實驗，PT只反映凝血因子水平，并不反映凝血因子是否活化。,PT INR,為了解決這一問題，目前國際上采用給予PT試劑標(biāo)定國際敏感度指數(shù)(international sensitivity index, ISI）的方法,并進(jìn)以通過相關(guān)公式計算出:“國際標(biāo)準(zhǔn)化比值”Interna

14、tional Normalized Ratio, INR 。,PT-INR 口服抗凝藥監(jiān)測的重要指標(biāo),據(jù)了解PT存在的主要問題在于INR!由于：所以INR不好可能原因有：病人PT或PT質(zhì)控時間不對（可以通過以上幾點檢查）正常人PT時間（MNPT）不對試劑對應(yīng)儀器的ISI值不對,不適用INR的三種情況包括,INR不適用于測定口服抗凝藥初期的病人血漿，凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅹ的水平和活性在血漿中半壽期不同，所以在口服抗凝藥初期這

15、些因子的作用與口服抗凝藥穩(wěn)定后PT延長中起的作用是不同的INR不適用于肝病 凝血因子缺陷病人的血漿INR不適用于非抗凝治療 而PT延長的病人血漿。,PS,維生素K依賴凝血因子,VIIIa,XII,,XIIa,XIa,,,XI,,,IIa,,Fibrinogen,Fibrin,,,,,Ca++,Va,,,IXa,Xa,VIIa,維生素K依賴凝血因子,PC,ATIII,,IX,,II,X,,VII,,,,,,,Int

16、rinsic pathway,Extrinsic pathway,Common pathway,口服華法令治療機(jī)理和過程,華法令通過拮抗維生素K的作用從而減少和阻止維生素K依賴的凝血因子II、VII 、IX、X的合成，從而影響內(nèi)源性凝血途徑。,PT INR與華法林,抗栓機(jī)制：華法林 減少凝血酶原（II）和FX的作用更重要， 減少FVII和FIX相對較弱。華法林抗栓作用起效需要6d，主要減少凝血酶原的生成（凝血酶原有

17、較長的半壽期）。 華法林抗凝作用起效需要2d。,PT INR與華法林華法林抗栓效應(yīng)的另一個提示,血栓病人口服抗凝藥治療過渡中，肝素與華法林重疊直至PT INR延長至有效治療范圍，因為凝血酶原半壽期為60~72h，故重疊4d是必要的。,PT INR與華法林 WHO的建議,術(shù)前預(yù)防深靜脈血栓 2.0~2.5髖關(guān)節(jié)和股骨骨折術(shù)前預(yù)防 2.0~3.0深靜脈血栓或肺梗死治療 2.0~3.0短暫發(fā)作的局

18、部缺血 2.0~3.0心肌梗死 3.0~4.5動脈血栓 3.0~4.5心瓣膜置換或修復(fù) 3.0~4.5,PT INR與華法林 國內(nèi)資料,術(shù)前預(yù)防深靜脈血栓 1.5~2.5髖關(guān)節(jié)和股骨骨折術(shù)前預(yù)防 2.0~2.5深靜脈血栓或肺梗死治療 2.0~2.8短暫發(fā)作的局部缺血 2.0~2.8心肌梗死 2.5~3.0動脈血栓 2.5~3.

19、0心瓣膜置換或修復(fù) 2.5~3.0,活化部份凝血活酶時間,APTT,內(nèi)源性凝血途徑與 APTT,是反映內(nèi)源性凝血途徑中VIII、IX、XI、XII因子水平的實驗，APTT只反映因子水平，并不反映凝血因子是否活化。,肝素與APTT,普通肝素通常采用APTT監(jiān)測，以判斷療效，該值一般應(yīng)維持于正常值的1.5~2.5倍。不同設(shè)備與試劑APTT參考值略有不同。即使APTT在治療范圍內(nèi)，也可出現(xiàn)嚴(yán)重的出血并發(fā)癥。最初24~48小時內(nèi)

20、的APTT亞治療量范圍。,凝血因子VII缺陷癥（遺傳性、獲得性）,外源途徑缺陷,共同途徑缺陷,凝血因子I、II、V、X缺陷癥 （遺傳性、獲得性）,因子XIII定性實驗陽性,內(nèi)源途徑缺陷,有出血癥狀,無出血癥狀,凝血因子VIII、IX、XI缺陷癥 （遺傳性、獲得性）,凝血因子XII、PK、HMWK缺陷癥 （遺傳性、獲得性）,凝血因子XIIII缺陷癥（遺傳性、獲得性）,,

21、,,,,,,,,,,出血性疾病的診斷,凝血酶時間TT檢測原理,試劑成分：濃縮牛凝血酶濃縮緩沖液：含0.5mol/L氯化鈣試劑配制：用NCCLS II型或相同質(zhì)量的去離子水按1:5 (1+4)倍數(shù)按需稀釋濃縮緩沖液，用來溶解凝血酶，用前混勻 反應(yīng)原理：在過量的純化的牛凝血酶的存在下，樣本中的纖維蛋白原被轉(zhuǎn)化為纖維蛋白，儀器檢測凝固形成所需要的時間 類似于Fib-C檢測。凝血酶的含量低于Fib-C檢測（TT-5：3.0 UNI

22、H/mL ;Fib-C:17.5 UNIH/mL ）反應(yīng)時間取決于共同途徑的因子水平丁香園論壇資料：http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=131&id=8057748&sty=1&tpg=1&age=0,TT檢測的臨床意義,彌散性血管內(nèi)凝血（DIC）的評估 肝素抗凝治療和溶栓治療的監(jiān)測 纖維蛋白或者纖維蛋白原降解產(chǎn)物（FDP）異常監(jiān)測遺傳性、獲得性纖維蛋白原的數(shù)