血液分析技術(shù)和相關(guān)儀器

1、第四章 血液分析技術(shù)與相關(guān)儀器,,,血液分析技術(shù)與相關(guān)儀器,血液分析儀器是臨床實(shí)驗(yàn)室最常用的分析儀器，包括：血細(xì)胞分析儀血液凝固分析儀血液流變學(xué)分析儀,總目錄,第一節(jié) 血細(xì)胞分析儀第二節(jié) 血液凝固分析儀第三節(jié) 血液流變學(xué)分析儀,第一節(jié) 血細(xì)胞分析儀教學(xué)要求,掌握血細(xì)胞分析儀的概念、庫(kù)爾特原理、儀器的基本結(jié)構(gòu)。熟悉聯(lián)合檢測(cè)型血細(xì)胞分析儀器的檢測(cè)原理，網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測(cè)原理，血紅蛋白檢測(cè)原理、儀器性能評(píng)價(jià)和維護(hù)。了解

2、血細(xì)胞分析儀的分類(lèi)、性能指標(biāo)、常見(jiàn)故障和排除及進(jìn)展。,本節(jié)目錄,第一節(jié) 目錄,一、血細(xì)胞分析儀概述二、儀器分型檢測(cè)原理基本結(jié)構(gòu)三、儀器的性能指標(biāo)、評(píng)價(jià)與調(diào)校四、儀器的維護(hù)與常見(jiàn)故障五、儀器的進(jìn)展與應(yīng)用展望 思考題,一、血細(xì)胞分析儀概述,血細(xì)胞分析儀(Blood cell analyzer,BCA)是指對(duì)一定體積全血內(nèi)血細(xì)胞異質(zhì)性進(jìn)行自動(dòng)分析的臨床檢驗(yàn)常規(guī)儀器。又稱(chēng)血細(xì)胞自動(dòng)計(jì)數(shù)儀(ABCC)、血液學(xué)自動(dòng)分析儀

3、(AHA)。ABCC代表早期的低檔次BCA，AHA外延過(guò)大。,,返回本節(jié)目錄,一、血細(xì)胞分析儀概述,發(fā) 展 史 手工計(jì)數(shù)　　儀器簡(jiǎn)單計(jì)數(shù)　　兩分群　　三分群　　五分群　　五分群＋網(wǎng)織紅,返回本節(jié)目錄,一、血細(xì)胞分析儀概述,20世紀(jì)40年代末， 電阻抗法微粒子計(jì)數(shù)專(zhuān)利50年代， Coulter Model A型用于臨床60年代， 測(cè)定參數(shù)達(dá)7項(xiàng)70年代， 全血細(xì)胞計(jì)數(shù)（CBC）80年代， 雙通道、白細(xì)胞

4、2~3分群、五分群90年代以來(lái)，多功能、多參數(shù)、流水線(xiàn),返回本節(jié)目錄,二、儀器分型檢測(cè)原理基本結(jié)構(gòu),（一）血細(xì)胞分析儀分型按自動(dòng)化程度按檢測(cè)原理按對(duì)白細(xì)胞的分類(lèi)水平,返回本節(jié)目錄,二、儀器分型檢測(cè)原理基本結(jié)構(gòu),血細(xì)胞與等滲的電解質(zhì)溶液相比為相對(duì)的不良導(dǎo)體電阻值大于稀釋液的電阻值當(dāng)細(xì)胞通過(guò)檢測(cè)器微孔的孔徑感受區(qū)時(shí)，在內(nèi)外電極之間恒流源電路上，電阻值瞬間增大，產(chǎn)生一個(gè)電壓脈沖信號(hào)產(chǎn)生的脈沖信號(hào)數(shù)，等于通過(guò)的細(xì)胞數(shù)，脈沖信號(hào)幅

5、度大小與細(xì)胞體積大小成正比,(二)電阻抗法血細(xì)胞檢測(cè)原理,返回本節(jié)目錄,電 阻 抗 法 血 細(xì) 胞 檢 測(cè) 原 理,二、儀器分型檢測(cè)原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,1.白細(xì)胞的檢測(cè),二、儀器分型檢測(cè)原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,2.紅細(xì)胞和血小板的檢測(cè),紅細(xì)胞和血小板共用一個(gè)小孔管，正常人紅細(xì)胞體積和血小板體積間有一個(gè)明顯界限，血小板計(jì)數(shù)準(zhǔn)確容易,CPU對(duì)血小板和紅細(xì)胞分布圖進(jìn)行判斷,二、儀器分型檢測(cè)原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,2.紅細(xì)胞和血

6、小板的檢測(cè),,浮動(dòng)界標(biāo),二、儀器分型檢測(cè)原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,（三）聯(lián)合檢測(cè)型原理,主要體現(xiàn)在白細(xì)胞分類(lèi)，實(shí)質(zhì)是選用較特異的方法將血中含量較少的嗜酸、嗜堿性粒細(xì)胞檢出，發(fā)現(xiàn)異常細(xì)胞。共有特點(diǎn)是：均使用了鞘流技術(shù)。,二、儀器分型檢測(cè)原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,1.容量、電導(dǎo)、光散射檢測(cè)技術(shù),,,,光散射,電導(dǎo)性,電阻抗,每個(gè)細(xì)胞接受三維分析定義到三維散點(diǎn)圖的相應(yīng)位置,二、儀器分型檢測(cè)原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,體積(volume，

7、V) 電阻抗原理測(cè)定細(xì)胞體積和數(shù)量電導(dǎo)性(conductivity，C) 高頻電磁探針，測(cè)量細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)，細(xì)胞內(nèi)核漿比例光散射(scatter，S)細(xì) 胞內(nèi)粗顆粒的光散射強(qiáng) 度要比細(xì)顆粒更強(qiáng),二、儀器分型檢測(cè)原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,2. 光散射與細(xì)胞化學(xué)聯(lián)合檢測(cè)技術(shù),這類(lèi)儀器是應(yīng)用激光散射與細(xì)胞化學(xué)染色技術(shù)對(duì)白細(xì)胞進(jìn)行分類(lèi)計(jì)數(shù)。,二、儀器分型檢測(cè)原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,,高角度前向散射光：細(xì)胞核及顆粒的信息低

8、角度前向散射光：細(xì)胞大小的信息,結(jié)合細(xì)胞化 學(xué)染色技術(shù)對(duì) 白細(xì)胞進(jìn)行分 類(lèi)計(jì)數(shù),,二、儀器分型檢測(cè)原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,3.多角度激光散射聯(lián)合檢測(cè)技術(shù),基本原理是：基于細(xì)胞大小、折射率、核形、核漿比值、以及顆粒性質(zhì)等，均可影響不同角度下的散射光強(qiáng)度不同白細(xì)胞在以上幾個(gè) 方面完全一致的幾率很 小，從而對(duì)白細(xì)胞進(jìn)行 分類(lèi),二、儀器分型檢測(cè)原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,4.電阻抗、射頻與細(xì)胞化學(xué)聯(lián)合,這類(lèi)儀器是利

9、用電阻抗、射頻這一成熟細(xì)胞計(jì)數(shù)技術(shù)結(jié)合細(xì)胞化學(xué)技術(shù)，通過(guò)4個(gè)不同的檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)白細(xì)胞、幼稚細(xì)胞進(jìn)行分類(lèi)和計(jì)數(shù)。嗜酸性粒細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)嗜堿性粒細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)淋巴、單核和粒細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)幼稚細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng),,,二、儀器分型檢測(cè)原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,白細(xì)胞分類(lèi)散射圖,聯(lián)合使用多項(xiàng)技術(shù)(流式、激光、射頻、電導(dǎo)、電阻抗、細(xì)胞化學(xué)染色)同時(shí)分析一個(gè)細(xì)胞，綜合分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，從而得出較為準(zhǔn)確的白細(xì)胞“五分群”結(jié)果。,二、儀器分型檢測(cè)原理基本結(jié)構(gòu),返

10、回本節(jié)目錄,（四）網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測(cè)原理,,網(wǎng)織紅細(xì)胞中嗜堿性物質(zhì)RNA，在活體狀態(tài)下與特殊的熒光染料結(jié)合熒光強(qiáng)度與RNA含量成正比用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè) 網(wǎng)織紅細(xì)胞大小和 RNA含量及血紅蛋 白的含量,二、儀器分型檢測(cè)原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,細(xì)胞與試劑反應(yīng)前后的變化,反應(yīng)前,反應(yīng)后,二、儀器分型檢測(cè)原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,熒光(RNA)強(qiáng)度,,,Reticulocytes,,,,PLT,RBC,,,,,,,WBC,

11、,前向散射光(細(xì)胞大小),,,血細(xì)胞分析儀網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟度分類(lèi),二、儀器分型檢測(cè)原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,（五）血紅蛋白測(cè)定原理,除干式、無(wú)創(chuàng)型外，各型BCA對(duì)血紅蛋白測(cè)定都采用光電比色原理血細(xì)胞懸液中加入溶血?jiǎng)┖?，紅細(xì)胞溶解釋放出血紅蛋白，后者與溶血?jiǎng)┲杏嘘P(guān)成分結(jié)合形成血紅蛋白衍生物，進(jìn)入血紅蛋白測(cè)試系統(tǒng)特定波長(zhǎng)(530～550nm)下進(jìn)行光電比色,二、儀器分型檢測(cè)原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,（六）儀器基本結(jié)構(gòu),機(jī)械系統(tǒng)電學(xué)系

12、統(tǒng)血細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)血紅蛋白測(cè)定系統(tǒng)計(jì)算機(jī)鍵盤(pán)控制系統(tǒng),二、儀器分型檢測(cè)原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,1.機(jī)械系統(tǒng) 包括機(jī)械裝置（如全自動(dòng)有進(jìn)樣針、分血器、稀釋器、混勻器、定量裝置等）和真空泵，以完成樣本的定量吸取、稀釋、傳送、混勻，以及將樣本移入各種參數(shù)的檢測(cè)區(qū),二、儀器分型檢測(cè)原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,2.電學(xué)系統(tǒng) 包括主電源、電壓元器件、控溫裝置、自動(dòng)真空泵電子控制系統(tǒng)，以及儀器的自動(dòng)監(jiān)控

13、、故障報(bào)警和排除等,二、儀器分型檢測(cè)原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,3.血細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng) 國(guó)內(nèi)常用的血細(xì)胞分析儀，使用的檢測(cè)技術(shù)可分為電阻抗檢測(cè)技術(shù)和光散射檢測(cè)技術(shù)兩大類(lèi),二、儀器分型檢測(cè)原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,電阻抗檢測(cè)技術(shù)：由檢測(cè)器、放大器、甄別器、閾值調(diào)節(jié)器、檢測(cè)計(jì)數(shù)系統(tǒng)和自動(dòng)補(bǔ)償裝置組成流式光散射檢測(cè)技術(shù)：由激光光源、檢測(cè)裝置和檢測(cè)器、放大器、甄別器、閾值調(diào)節(jié)器、檢測(cè)計(jì)數(shù)系統(tǒng)和自動(dòng)補(bǔ)償裝置組成,二、儀器分型檢測(cè)原理基本結(jié)構(gòu),

14、返回本節(jié)目錄,4.血紅蛋白測(cè)定系統(tǒng) 由光源、透鏡、濾光片、流動(dòng)比色池和光電傳感器等組成。 5.計(jì)算機(jī)和鍵盤(pán)控制系統(tǒng),二、儀器分型檢測(cè)原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,三、儀器的性能指標(biāo)、評(píng)價(jià)與調(diào)校,（一）血細(xì)胞分析儀的性能指標(biāo) 1.測(cè)試參數(shù) 2.細(xì)胞形態(tài)學(xué)分析 3.測(cè)試速度 4.樣本量 5.精密度與示值范圍 6.打印,返回本節(jié)目錄,（二）血細(xì)胞分析儀的評(píng)價(jià),ICSH公布了電子血細(xì)胞分析儀的評(píng)價(jià)方案：在細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅

15、蛋白測(cè)定方面，要評(píng)價(jià)儀器測(cè)試樣本的總變異、攜帶污染率、線(xiàn)性范圍、可比性和準(zhǔn)確性等,三、儀器的性能指標(biāo)、評(píng)價(jià)與調(diào)校,返回本節(jié)目錄,（三）血細(xì)胞分析儀的調(diào)校,出廠(chǎng)前已經(jīng)過(guò)廠(chǎng)方技術(shù)鑒定合格，但由于運(yùn)輸振動(dòng)或因故障維修后或長(zhǎng)時(shí)間停用后再啟用等原因，以及正常使用半年以上或認(rèn)為有必要時(shí)，都必須對(duì)儀器進(jìn)行調(diào)校及性能測(cè)試，這對(duì)了解儀器性能，發(fā)現(xiàn)問(wèn)題，確保檢驗(yàn)質(zhì)量有重要意義,三、儀器的性能指標(biāo)、評(píng)價(jià)與調(diào)校,返回本節(jié)目錄,四、儀器的維護(hù)與常見(jiàn)故障,（一）儀

16、器的維護(hù) 1.安裝： 潔凈的環(huán)境、穩(wěn)定的電源、可靠的接地、適宜的溫度和濕度是保證BCA正常工作的前提。,返回本節(jié)目錄,2.維護(hù)：良好的工作環(huán)境是儀器正常工作的前提，精心細(xì)致的維護(hù)是儀器處于良好工作狀態(tài)的保證。做好儀器的維護(hù)保養(yǎng)，有助于提高儀器測(cè)量的準(zhǔn)確性，減少故障的發(fā)生，延長(zhǎng)儀器的使用壽命。,四、儀器的維護(hù)與常見(jiàn)故障,返回本節(jié)目錄,檢測(cè)器的維護(hù) ①采血順利②防止纖維絲堵孔③關(guān)機(jī)前對(duì)檢測(cè)器的微孔進(jìn)行清理沖洗④計(jì)數(shù)

17、期間，及時(shí)按 “反沖”鍵，沖掉沉積變性的蛋白質(zhì)⑤定期卸下檢測(cè)器，用5%次氯酸鈉浸泡清洗,四、儀器的維護(hù)與常見(jiàn)故障,返回本節(jié)目錄,管路的維護(hù),四、儀器的維護(hù)與常見(jiàn)故障,返回本節(jié)目錄,機(jī)械傳動(dòng)部位的維護(hù),四、儀器的維護(hù)與常見(jiàn)故障,（二）常見(jiàn)故障,有自我診斷功能，有故障發(fā)生時(shí)，內(nèi)置電腦的錯(cuò)誤檢查功能顯示出“錯(cuò)誤信息”，并伴有報(bào)警聲,四、儀器的維護(hù)與常見(jiàn)故障,返回本節(jié)目錄,1.開(kāi)機(jī)時(shí)的常見(jiàn)故障2.測(cè)試過(guò)程中常見(jiàn)的錯(cuò)誤信息 其中檢測(cè)器的微孔

18、堵塞是影響檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性最常見(jiàn)的原因。根據(jù)微孔堵塞的程度，將其分為完全堵孔和不完全堵孔兩種。,四、儀器的維護(hù)與常見(jiàn)故障,返回本節(jié)目錄,,五、血細(xì)胞分析儀的進(jìn)展,儀器測(cè)試原理的不斷創(chuàng)新 白細(xì)胞分類(lèi)的改進(jìn) 紅細(xì)胞和血小板計(jì)數(shù)原理的改進(jìn) 新血細(xì)胞分析參數(shù)的出現(xiàn)各種特殊技術(shù)的應(yīng)用儀器自動(dòng)化水平的提高無(wú)創(chuàng)型全血細(xì)胞分析儀的研究,返回本節(jié)目錄,紅細(xì)胞和血小板計(jì)數(shù)原理的改進(jìn),二維激光散射法測(cè)定紅細(xì)胞和血小板,克服了電阻抗法在病理

19、情況下測(cè)定MCH、MCHC結(jié)果不準(zhǔn)及血小板計(jì)數(shù)精確性較差的缺點(diǎn),五、血細(xì)胞分析儀的進(jìn)展,返回本節(jié)目錄,思 考 題,1.BCA的概念及功能是什么？2.簡(jiǎn)述電阻抗血細(xì)胞檢測(cè)原理。3.簡(jiǎn)述聯(lián)合檢測(cè)型BCA白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)的實(shí)質(zhì)和共有特點(diǎn)4.簡(jiǎn)述BCA網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測(cè)原理。5.如何對(duì)BCA進(jìn)行分類(lèi)？半自動(dòng)與全自動(dòng)BCA的主要區(qū)別？6.如何對(duì)BCA進(jìn)行評(píng)價(jià)？7.電阻抗型BCA和聯(lián)合檢測(cè)型BCA的基本結(jié)構(gòu)？8.BCA的進(jìn)展表現(xiàn)在

20、哪幾個(gè)方面？9.BCA常見(jiàn)的堵孔原因有哪些？如何處理？10.BCA保證血小板準(zhǔn)確計(jì)數(shù)的技術(shù)有哪些？,返回本節(jié)目錄,第二節(jié) 血液凝固分析儀教學(xué)要求,掌握血凝儀的檢測(cè)原理和基本結(jié)構(gòu)熟悉半自動(dòng)、全自動(dòng)血凝儀的特點(diǎn)，血凝儀的性能評(píng)價(jià)以及各種檢測(cè)方法的優(yōu)缺點(diǎn)了解血凝儀的分類(lèi)、臨床應(yīng)用、儀器的維護(hù)和進(jìn)展,本節(jié)目錄,第二節(jié) 目錄,血液凝固分析儀概述一、血凝儀分型與檢測(cè)原理二、血凝儀基本結(jié)構(gòu)與評(píng)價(jià)三、血凝儀的維護(hù)四、血凝儀臨床應(yīng)用與進(jìn)

21、展● 思考題,血液凝固分析儀概述,血液凝固分析儀（automated coayulation analyzer,ACA）是采用一定分析技術(shù)，對(duì)血栓與出血有關(guān)成分自動(dòng)檢測(cè)的臨床常規(guī)檢驗(yàn)儀器在血栓/出血實(shí)驗(yàn)室中最基本的設(shè)備就是血液凝固分析儀（簡(jiǎn)稱(chēng)血凝儀）,返回本節(jié)目錄,血液凝固分析儀概述,發(fā) 展 史1910年，Kottman發(fā)明了最早的血凝儀1950年，Schnitger和Gross發(fā)明了基于電流法的血凝儀20

22、世紀(jì)70年代前為血凝儀的初級(jí)階段,返回本節(jié)目錄,血液凝固分析儀概述,20世紀(jì)70年代，較精確的各種自動(dòng)血凝儀先后問(wèn)世，其特點(diǎn)是：?jiǎn)瓮ǖ馈⒔K點(diǎn)法的半自動(dòng)血凝儀，也稱(chēng)第一代產(chǎn)品20世紀(jì)80年代末，多通道、多種分析方法與原理的半自動(dòng)血凝儀相繼誕生，稱(chēng)之為第二代產(chǎn)品,各代血凝儀的特點(diǎn),返回本節(jié)目錄,血液凝固分析儀概述,20世紀(jì)90年代以來(lái)，多通道、多方法、多功能全自動(dòng)（即第三代）血凝儀不斷涌現(xiàn),返回本節(jié)目錄,一、血凝儀分型與檢測(cè)原理,（一）血

23、凝儀分型按自動(dòng)化程度半自動(dòng)血凝儀全自動(dòng)血凝儀全自動(dòng)血凝工作站,三者有何區(qū)別 ？,返回本節(jié)目錄,一、血凝儀分型與檢測(cè)原理,（二）血凝儀檢測(cè)原理主要檢測(cè)方法：凝固法、底物顯色法、免疫學(xué)法、干化學(xué)法等。,彼此有何不同？,返回本節(jié)目錄,一、血凝儀分型與檢測(cè)原理,,返回本節(jié)目錄,一、血凝儀分型與檢測(cè)原理,,1．凝固法原理 是通過(guò)檢測(cè)血漿在凝血激活劑作用下發(fā)生一系列物理量（光、電、超聲、機(jī)械運(yùn)動(dòng)等）的變化，再由計(jì)算機(jī)分析所得最

24、終結(jié)果，稱(chēng)生物物理法。按測(cè)量原理分為電流法、超聲分析法、光學(xué)法和磁珠法四種。,呵！是血漿凝固的變化,返回本節(jié)目錄,一、血凝儀分型與檢測(cè)原理,光學(xué)法（比濁法）：是根據(jù)血漿凝固過(guò)程中濁度的變化，導(dǎo)致光強(qiáng)度變化來(lái)測(cè)定相關(guān)因子,,有何不同？誰(shuí)優(yōu),返回本節(jié)目錄,一、血凝儀分型與檢測(cè)原理,光學(xué)法血凝儀工作流程,返回本節(jié)目錄,一、血凝儀分型與檢測(cè)原理,纖維蛋白的形成與吸光度,??？為何在50%？,返回本節(jié)目錄,一、血凝儀分型與檢測(cè)原理,雙磁路磁珠法原理

25、：測(cè)試杯的兩側(cè)各有一組驅(qū)動(dòng)線(xiàn)圈，產(chǎn)生恒定的交替電磁場(chǎng)，使杯內(nèi)去磁小鋼珠保持等幅振蕩運(yùn)動(dòng)；凝血激活劑加入后，隨著纖維蛋白的增多，血漿黏稠度增加，小鋼珠運(yùn)動(dòng)振幅逐漸減弱，將運(yùn)動(dòng)幅度衰減到50?時(shí)確定為凝固終點(diǎn),返回本節(jié)目錄,一、血凝儀分型與檢測(cè)原理,雙磁路磁珠法原理,,與光電磁法有何不同？,,與光電磁法有何不同？,返回本節(jié)目錄,,一、血凝儀分型與檢測(cè)原理,雙磁路磁珠法與光學(xué)法原理主要區(qū)別前者是檢測(cè)血漿凝固過(guò)程中磁電信號(hào)變化后者是檢測(cè)該過(guò)

26、程中光信號(hào)的變化,返回本節(jié)目錄,一、血凝儀分型與檢測(cè)原理,2.底物顯色法原理： 實(shí)質(zhì)為光電比色原理，是通過(guò)測(cè)定產(chǎn)色底物的吸光度變化來(lái)推測(cè)所測(cè)物質(zhì)的含量和活性，也稱(chēng)生物化學(xué)法,返回本節(jié)目錄,一、血凝儀分型與檢測(cè)原理,3.免疫學(xué)法原理 以純化的被檢物質(zhì)為抗原，制備相應(yīng)的抗體，然后利用抗原抗體反應(yīng)對(duì)被檢物進(jìn)行定性或定量測(cè)定。血凝儀使用免疫比濁法,返回本節(jié)目錄,二、血凝儀的基本結(jié)構(gòu)與評(píng)價(jià),（一）血凝儀基本結(jié)構(gòu)： 1.半自動(dòng)血凝儀基本結(jié)構(gòu)

27、 主要由樣本預(yù)溫槽和試劑預(yù)溫槽、加樣器、檢測(cè)系統(tǒng)（光學(xué)、磁場(chǎng)）及微機(jī)組成,,全自動(dòng)呢 ？,返回本節(jié)目錄,二、血凝儀的基本結(jié)構(gòu)與評(píng)價(jià),2.全自動(dòng)血凝儀基本結(jié)構(gòu) 包括樣本傳送及處理裝置、試劑冷藏位、樣本及試劑分配系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)、計(jì)算機(jī)、輸出 設(shè)備及附件等,,就這么簡(jiǎn)單？,返回本節(jié)目錄,二、血凝儀的基本結(jié)構(gòu)與評(píng)價(jià),（二）血凝儀評(píng)價(jià) 1.一般性評(píng)價(jià)：①產(chǎn)品質(zhì)量50%；②價(jià)格25%；③廠(chǎng)商評(píng)估10

28、%；④擔(dān)保5%；⑤售后服務(wù)5%；⑥可接受性5%。,返回本節(jié)目錄,二、血凝儀的基本結(jié)構(gòu)與評(píng)價(jià),2.技術(shù)性能評(píng)價(jià)： 重復(fù)性測(cè)定、線(xiàn)性范圍、準(zhǔn)確性、攜帶污染率、干擾因素、可比性分析等幾方面,,攜便式血凝儀,返回本節(jié)目錄,二、血凝儀的基本結(jié)構(gòu)與評(píng)價(jià),（三）血凝儀的特點(diǎn) 1.半自動(dòng)血凝儀：①手工加樣加試劑；②操作簡(jiǎn)便；③應(yīng)用檢測(cè)方法少；④價(jià)格便宜；⑤速度慢；⑥測(cè)量精度好于手工，但低于全自動(dòng),返回本節(jié)目錄,二、血凝儀的基本結(jié)構(gòu)與

29、評(píng)價(jià),（三）血凝儀的特點(diǎn) 2.全自動(dòng)血凝儀：①自動(dòng)化程度高；②檢測(cè)方法多；③通道多，速度快；④項(xiàng)目任意組合，隨機(jī)性；⑤測(cè)量精度好，易于質(zhì)控和標(biāo)準(zhǔn)化；⑥智能化程度高，功能多；⑦價(jià)格昂貴；⑧對(duì)操作人員的素質(zhì)要求高。,返回本節(jié)目錄,三、血凝儀的維護(hù),（一）半自動(dòng)血凝儀的維護(hù) ①保持測(cè)試槽清潔，嚴(yán)禁有異物進(jìn)入；②避免陽(yáng)光直曬和遠(yuǎn)離強(qiáng)熱物體；③防止受潮和腐蝕；④儀器和加珠器都必須遠(yuǎn)離強(qiáng)電磁場(chǎng)干擾源；⑤電源電壓為220V&

30、#177;10％，最好使用穩(wěn)壓器；⑥使用一次性測(cè)試杯及鋼珠,返回本節(jié)目錄,三、血液凝固分析儀的維護(hù),（二）全自動(dòng)血凝儀的維護(hù) ①清洗或更換空氣過(guò)濾器；②檢查及清潔反應(yīng)槽；③清洗洗針池及通針；④檢查冷卻劑液面水平；⑤清潔機(jī)械運(yùn)動(dòng)導(dǎo)桿和轉(zhuǎn)動(dòng)部分并加潤(rùn)滑油；⑥及時(shí)保養(yǎng)定量裝置；⑦更換樣品及試劑針；⑧數(shù)據(jù)備份及恢復(fù)等,返回本節(jié)目錄,四、血凝儀的臨床應(yīng)用與進(jìn)展,（一）臨床應(yīng)用1.凝血系統(tǒng)的檢測(cè) 2.抗凝系統(tǒng)的檢測(cè)3.纖維

31、蛋白溶解系統(tǒng)檢測(cè) 4.臨床用藥的監(jiān)測(cè),返回本節(jié)目錄,四、血凝儀的臨床應(yīng)用與進(jìn)展,（二）進(jìn)展 主要體現(xiàn)在：①多方法、多功能、快速高效；②智能化程度高，軟件開(kāi)發(fā)進(jìn)一步完善；③全自動(dòng)血凝分析儀工作站；④床旁分析；⑤在臨床中的應(yīng)用日趨廣泛,返回本節(jié)目錄,思 考 題,1.血凝儀檢測(cè)原理有哪些？2.簡(jiǎn)述光學(xué)法血凝儀檢測(cè)原理。其光路結(jié)構(gòu)有何不同？3.簡(jiǎn)述雙磁路磁珠法的測(cè)定原理。4.凝固法與免疫學(xué)方法中透射比濁、散射比濁的

32、區(qū)別？5.簡(jiǎn)述全自動(dòng)血凝儀的主要特點(diǎn)及其維護(hù)與保養(yǎng)。 6.血凝儀光學(xué)法與雙磁路磁珠法的區(qū)別及優(yōu)缺點(diǎn)是什么？7.簡(jiǎn)述血凝儀的臨床應(yīng)用。8.簡(jiǎn)述血凝儀的性能評(píng)價(jià)。9.血凝儀的進(jìn)展體現(xiàn)在哪幾個(gè)方面？,返回本節(jié)目錄,第三節(jié) 血液流變學(xué)分析儀教學(xué)要求,1.掌握旋轉(zhuǎn)式黏度計(jì)和毛細(xì)管黏度計(jì)工作原理、基本結(jié)構(gòu)及黏度計(jì)性能評(píng)價(jià)2.熟悉黏度計(jì)調(diào)校與紅細(xì)胞變形儀測(cè)定原理3.了解旋轉(zhuǎn)式黏度計(jì)和毛細(xì)管黏度計(jì)性能指標(biāo)、日常維護(hù)方法及常見(jiàn)故障排除，紅

33、細(xì)胞變形儀基本結(jié)構(gòu)和評(píng)價(jià)及血液流變分析儀進(jìn)展,本節(jié)目錄,第三節(jié) 目錄,血液流變分析儀概述一、血液黏度計(jì)分類(lèi)檢測(cè)原理與基本結(jié)構(gòu)儀器評(píng)價(jià)主要技術(shù)指標(biāo)調(diào)校與維護(hù)常見(jiàn)故障及排除二、紅細(xì)胞變形測(cè)定儀分類(lèi)工作原理與基本結(jié)構(gòu)儀器評(píng)價(jià)主要技術(shù)指標(biāo)儀器的維護(hù)三、血液流變學(xué)分析儀器的進(jìn)展 思考題,血液流變分析儀概述,血液流變分析儀器（hemorheology analy-zer，HA）是對(duì)全血、血漿或血細(xì)胞流變特性

34、進(jìn)行分析的檢驗(yàn)儀器。主要有：血液黏度計(jì)、紅細(xì)胞變形測(cè)定儀、紅細(xì)胞電泳儀、粘彈儀等。本節(jié)就前兩種常用儀器做一簡(jiǎn)要介紹。,返回本節(jié)目錄,血液流變分析儀概述,發(fā) 展 史1931年Fahraeus等發(fā)現(xiàn)Fahraeus-Lindquist效應(yīng)，毛細(xì)管式血液黏度計(jì)隨之誕生1954年Michson等用微管吸吮法測(cè)定紅細(xì)胞變形性1961年Wells等研制成功了錐板旋轉(zhuǎn)式黏度計(jì)1975年Bessis等發(fā)明了激光衍射法測(cè)定儀,返回本節(jié)目錄,一

35、、血液黏度計(jì),血液黏度大小直接影響到血液循環(huán)中阻力的大小，必然影響組織血液灌流量。對(duì)血液黏度測(cè)定有十分重要的臨床意義。能否準(zhǔn)確測(cè)量血液黏度依賴(lài)于黏度計(jì)性能的好壞。,返回本節(jié)目錄,（一）黏度計(jì)的分類(lèi),1．按工作原理 分為毛細(xì)管黏度計(jì)和旋轉(zhuǎn)式黏度計(jì)。前者按結(jié)構(gòu)分為奧氏黏度計(jì)和烏氏黏度計(jì)，后者按結(jié)構(gòu)可分為筒-筒式、錐-板式、錐-錐式以及棱球式黏度計(jì)等2．按自動(dòng)化程度 分半自動(dòng)黏度計(jì)和全自動(dòng)黏度計(jì),返回本節(jié)目錄,（二）黏度計(jì)檢測(cè)原理與基本

36、結(jié)構(gòu),1.毛細(xì)管黏度計(jì) 檢測(cè)原理：按泊肅葉（Poiseuille）定律設(shè)計(jì)，即一定體積的牛頓液體，在恒定的壓力驅(qū)動(dòng)下，流過(guò)一定管徑的毛細(xì)管所需的時(shí)間與黏度成正比。血漿比黏度（ratio of viscosity）： 血漿比黏度=血漿時(shí)間/蒸餾水時(shí)間,返回本節(jié)目錄,（二）黏度計(jì)檢測(cè)原理與基本結(jié)構(gòu),毛細(xì)管黏度計(jì)基本結(jié)構(gòu)： 包括毛細(xì)管、儲(chǔ)液池、控溫裝置、計(jì)時(shí)裝置等。,毛細(xì)管黏度計(jì),返回本節(jié)目錄,（二）黏度計(jì)檢測(cè)

37、原理與基本結(jié)構(gòu),2．旋轉(zhuǎn)式黏度計(jì) 2.1工作原理：以牛頓的粘滯定律為理論依據(jù)，主要有以外園筒轉(zhuǎn)動(dòng)或以?xún)?nèi)園筒轉(zhuǎn)動(dòng)的筒-筒式旋轉(zhuǎn)黏度計(jì)（又稱(chēng)Couette黏度計(jì)）和以園錐體轉(zhuǎn)動(dòng)或以圓形平板轉(zhuǎn)動(dòng)的錐板式（又稱(chēng)Weissenberg黏度計(jì)）黏度計(jì)。,返回本節(jié)目錄,（二）黏度計(jì)檢測(cè)原理與基本結(jié)構(gòu),2.2錐板式黏度計(jì)工作原理：是同軸錐板構(gòu)型，平板與錐體間充滿(mǎn)被測(cè)樣本，調(diào)速電機(jī)與圓形平板同速旋轉(zhuǎn)，錐體與平板及馬達(dá)間均無(wú)直接聯(lián)系。當(dāng)圓形平板以某一

38、恒定角速度旋轉(zhuǎn)時(shí)，轉(zhuǎn)動(dòng)的力矩通過(guò)被測(cè)樣本傳遞到錐體；樣本越粘稠，傳入的力矩越大。當(dāng)此力矩作用于錐體時(shí)，立即被力矩傳感裝置所俘獲，并將其轉(zhuǎn)換為電信號(hào)，其信號(hào)大小與樣本黏度成正比。,返回本節(jié)目錄,錐-板式粘度計(jì),（二）黏度計(jì)檢測(cè)原理與基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,（二）黏度計(jì)檢測(cè)原理與基本結(jié)構(gòu),2.3基本結(jié)構(gòu)： 樣本傳感器 轉(zhuǎn)速控制與調(diào)節(jié)系統(tǒng) 力矩測(cè)量系統(tǒng) 恒溫系統(tǒng),返回本節(jié)目錄,（三）黏度計(jì)的評(píng)價(jià),1.毛細(xì)管黏度計(jì)的特點(diǎn) 1.1價(jià)格低

39、廉、操作簡(jiǎn)便、速度快、易于普及 1.2 測(cè)定牛頓流體黏度結(jié)果可靠，是血漿、血清樣本測(cè)定的參考方法,返回本節(jié)目錄,（三）黏度計(jì)的評(píng)價(jià),1.3不能直接檢測(cè)某剪切率下的表觀黏度1.4不利于研究RBC、WBC的變形性和血液的粘彈性等難，以反映全血等非牛頓流體的黏度特性,返回本節(jié)目錄,（三）黏度計(jì)的評(píng)價(jià),,（三）儀器的評(píng)價(jià)與鑒定,,2.旋轉(zhuǎn)式黏度計(jì)的特點(diǎn)2.1能提供所需不同角速度下的剪切率2.2被測(cè)液體中各流層的剪切率一致，使液體在剪切率

40、一致的條件下做單純的定向流動(dòng),返回本節(jié)目錄,（三）黏度計(jì)的評(píng)價(jià),2.3可以定量了解全血、血漿的流變特性，RBC與WBC的聚集性、變形性等2.4操作使用較為簡(jiǎn)單，是目前血液流變學(xué)研究和應(yīng)用較為理想的儀器2.5價(jià)格較貴，操作要求更精細(xì),返回本節(jié)目錄,（三）黏度計(jì)的評(píng)價(jià),3．儀器性能評(píng)價(jià) 3.1 準(zhǔn)確度：以國(guó)家計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)油為準(zhǔn)，在剪切率（1～200）s-1范圍內(nèi)分別用低黏度油（約2mPa.s）和高黏度油（約20mPa.s）測(cè)定其黏度，要

41、求實(shí)際測(cè)定值與真值的相對(duì)偏差＜3%,一、血液黏度計(jì),,很重要哦！,返回本節(jié)目錄,（三）黏度計(jì)的評(píng)價(jià),3.2 分辨率：是指黏度計(jì)所能識(shí)別出的血液表觀黏度最小變化量。取比容在0.40～0.45全血測(cè)試高剪切率200s-1狀態(tài)下，能反映出比容相差0.02時(shí)的血液表觀黏度的變化在低剪切率5s-1以下?tīng)顟B(tài)，能反映出比容相差0.01時(shí)的血液表觀黏度的變化,返回本節(jié)目錄,（三）黏度計(jì)的評(píng)價(jià),3.3 重復(fù)性：取比容在0.40～0.45血樣，測(cè)量

42、11次，取后10次測(cè)定值計(jì)算CV值在高剪切率時(shí)，血液表觀黏度CV＜3%在低剪切率時(shí)，血液表觀黏度CV＜5%,返回本節(jié)目錄,（三）黏度計(jì)的評(píng)價(jià),3.4 靈敏度與量程：測(cè)力傳感器應(yīng)具有10mPa靈敏度才能測(cè)定1s-1的血液黏度恒定剪切應(yīng)力的黏度計(jì)，這一控制范圍包括100mPa～1000mPa,,太重要了！,返回本節(jié)目錄,（四）黏度計(jì)主要技術(shù)指標(biāo),1.性能指標(biāo) ①黏度測(cè)試范圍②剪切率變化范圍③黏度值重復(fù)性CV＜3％④準(zhǔn)確度

43、7;3%等 2.測(cè)試參數(shù) ①血漿黏度②全血黏度③血沉④紅細(xì)胞壓積等,返回本節(jié)目錄,（五）黏度計(jì)的調(diào)校與維護(hù),1．毛細(xì)管黏度計(jì)的調(diào)校與維護(hù)1.1 儀器調(diào)校：用重蒸餾水在37℃時(shí)測(cè)得時(shí)間比D=(t- t。)/ t。，要求D≤1%1.2 儀器維護(hù)：①殘留液處理，②毛細(xì)管污染處理③溫度控制,返回本節(jié)目錄,（五）黏度計(jì)的調(diào)校與維護(hù),2.旋轉(zhuǎn)式黏度計(jì)的調(diào)校與維護(hù)2.1 儀器調(diào)校：用國(guó)家計(jì)量單位所標(biāo)定的標(biāo)準(zhǔn)牛頓油，按儀器說(shuō)明進(jìn)行標(biāo)定。

44、日常工作中也可以用重蒸餾水檢測(cè)儀器，看水的黏度是否為0.69mPa.s（37℃）2.2 儀器維護(hù)：電壓穩(wěn)定、機(jī)芯防塵、及時(shí)清洗測(cè)試頭和剪血板及剪血錐,返回本節(jié)目錄,（六）操作中常見(jiàn)故障及排除,1.“不能測(cè)試”的常見(jiàn)原因及處理辦法2.“突然停機(jī)”的常見(jiàn)原因及處理 3.測(cè)試數(shù)據(jù)與平時(shí)相差太大4.“自動(dòng)沖洗儀不進(jìn)水” 和“不排水”,返回本節(jié)目錄,二、紅細(xì)胞變形測(cè)定儀,（一）紅細(xì)胞變形測(cè)定儀分類(lèi) 大致分為兩類(lèi)：一類(lèi)是測(cè)

45、定或評(píng)價(jià)紅細(xì)胞群體變形能力的方法，如：黏度測(cè)量法、激光衍射法等。另一類(lèi)是測(cè)定單個(gè)紅細(xì)胞變形性和膜的力學(xué)性質(zhì)的方法，如微管吸吮法、表面附著或纖維攔截法等。,返回本節(jié)目錄,二、紅細(xì)胞變形測(cè)定儀,（二）儀器的工作原理與基本結(jié)構(gòu)1.黏度測(cè)量法的工作原理與基本結(jié)構(gòu)工作原理：用旋轉(zhuǎn)式黏度計(jì)測(cè)量同一剪切率（100s-1或200s-1 ）下的全血黏度和血漿黏度，然后按下式計(jì)算紅細(xì)胞剛性指數(shù)： TK=（1-ηb-0.4/ηp）/HCT基

46、本結(jié)構(gòu)：同前旋轉(zhuǎn)式黏度計(jì),返回本節(jié)目錄,二、紅細(xì)胞變形測(cè)定儀,2.錐板式激光衍射法工作原理與基本結(jié)構(gòu) 2.1 工作原理：根據(jù)紅細(xì)胞被激光照射時(shí)發(fā)生衍射，產(chǎn)生反映細(xì)胞幾何狀態(tài)的衍射圖像，當(dāng)有剪切應(yīng)力作用于紅細(xì)胞時(shí)，紅細(xì)胞發(fā)生形變，衍射圖也隨之變化，測(cè)定該作用力前后紅細(xì)胞形變率的大小來(lái)反映其變形性,返回本節(jié)目錄,二、紅細(xì)胞變形測(cè)定儀,2.2 基本結(jié)構(gòu)：主要由能提供可變剪切場(chǎng)的透明錐板結(jié)構(gòu)、光路系統(tǒng)（包括激光器和三棱鏡）、攝像系統(tǒng)、控溫

47、裝置、光電轉(zhuǎn)換器、處理器及顯示打印裝置組成,返回本節(jié)目錄,二、紅細(xì)胞變形測(cè)定儀,（三）儀器評(píng)價(jià)：各種方法均有優(yōu)缺點(diǎn)，應(yīng)將幾種方法配合使用，才能真正全面反映血細(xì)胞的流變特性 （四）主要技術(shù)指標(biāo)：性能指標(biāo)、測(cè)試參數(shù)及功能（五）儀器的維護(hù)：電壓穩(wěn)定、遠(yuǎn)離磁場(chǎng)、防止受潮、及時(shí)清洗、合理抗凝,返回本節(jié)目錄,三、血液流變學(xué)分析儀器的進(jìn)展,近年來(lái)，血液流變學(xué)有較大的進(jìn)步和發(fā)展，體現(xiàn)在：新技術(shù)不斷涌現(xiàn)、儀器自動(dòng)化程度提高、功能多、隨機(jī)性、臨