小鼠 缺氧實驗指導(2016)

1、1實驗三實驗三實驗性缺氧實驗性缺氧【實驗目的】1.掌握各型（低張性和血液性）缺氧動物模型復制的方法，了解缺氧的分類。2.觀察不同類型缺氧時機體的變化（活動狀況、呼吸、粘膜及肝臟的顏色）及存活時間；3.觀察不同年齡和中樞興奮狀態(tài)對機體缺氧耐受性的影響，理解條件因素在缺氧發(fā)病中的重要性。4.掌握各型缺氧的發(fā)生機制及特點。5.了解常見血液性缺氧的解救措施?！緦嶒炘怼繉е碌蛷埿匀毖踝畛Ｒ姷脑虬ㄎ霘庋醴謮哼^低和外呼吸功能障礙。本實驗將小鼠

2、放置于加入鈉石灰的密閉廣口瓶內(nèi)，隨著小鼠的呼吸消耗，廣口瓶中氧氣含量逐漸降低，模擬外環(huán)境氧分壓過低引起的低張性缺氧。觀察低張性缺氧時機體的變化（活動狀況、呼吸、粘膜及肝臟的顏色）及存活時間。影響機體對缺氧耐受性的因素很多，除缺氧時間、速度、類型和程度外，還與缺氧時中樞功能狀態(tài)和年齡等因素有關(guān)。本實驗通過應用藥物改變小鼠的中樞興奮狀態(tài)及選擇不同年齡的小鼠，觀察不同條件下低張性缺氧小鼠的活動狀況和存活時間。血液性缺氧是由于血紅蛋白的數(shù)量減少

3、或性質(zhì)改變從而降低血液攜氧能力或血紅蛋白結(jié)合的氧不易釋出所引起的缺氧。本實驗將復制兩種常見血液性缺氧模型：一氧化碳中毒和亞硝酸鹽中毒引起的血液性缺氧。一氧化碳可與血紅蛋白結(jié)合，形成碳氧血紅蛋白而失去結(jié)合氧的能力，從而導致血液攜氧能力降低而引起機體缺氧。亞硝酸鈉是強氧化劑，可使血紅蛋白分子內(nèi)二價Fe2氧化成為三價Fe3而形成高鐵血紅蛋白，高鐵血紅蛋白同樣失去攜氧能力而引起血液性缺氧?！緦嶒瀸ο蟆砍赡晷∈螅ㄐ詣e、年齡、體重近似、雌雄不拘）、

4、新生小鼠【實驗藥品和器材】3.75%尼可剎米、0.25%氯丙嗪、生理鹽水、鈉石灰、5%亞硝酸鈉、1%亞甲蘭、濃硫酸、草酸。缺氧瓶帶氣壓平衡裝置、耗氧量測定裝置（圖1）、1ml注射器、5ml注射器、電子天平、紗布、濾紙、眼科剪、眼科鑷、小燒杯、酒精燈、火柴、CO發(fā)生裝置（圖2）、氣囊袋。3分組分組活動狀況活動狀況黏膜顏色黏膜顏色呼吸呼吸耗氧率耗氧率抽搐出現(xiàn)時間抽搐出現(xiàn)時間（s）存活時間存活時間（s）肝臟顏色肝臟顏色正常對照（A組）低張性缺

5、氧（B組）新生幼鼠組3.不同中樞狀態(tài)對缺氧耐受性的影響不同中樞狀態(tài)對缺氧耐受性的影響(1)取成年小鼠3只（A、B、C組），稱重并標記編號后分別作如下處理：A組小鼠腹腔注射3.75%尼可剎米溶液0.08ml10g；B組小鼠腹腔注射0.25%氯丙嗪溶液0.1ml10g；C組小鼠腹腔注射生理鹽水0.1ml10g。(2)腹腔注射結(jié)束后迅速將3只小鼠放入缺氧瓶中（每瓶均放置紗布包裹的鈉石灰5g），蓋上膠塞；(3)比較觀察3只小鼠的活動狀況、皮膚（

6、口唇）黏膜和呼吸頻率（次數(shù)10s）和深度，記錄小鼠出現(xiàn)抽搐的時間及存活時間。表二、不同中樞狀態(tài)對低張性缺氧耐受性的影響表二、不同中樞狀態(tài)對低張性缺氧耐受性的影響分組分組缺氧前活動狀況、缺氧前活動狀況、呼吸、唇色呼吸、唇色缺氧時活動狀況、缺氧時活動狀況、呼吸、唇色呼吸、唇色出現(xiàn)抽搐的時間出現(xiàn)抽搐的時間（s）存活時間存活時間（s）尼可剎米組氯丙嗪組生理鹽水組4.CO中毒性缺氧中毒性缺氧（1）取草酸3ml加入CO發(fā)生裝置試管內(nèi)，再加入濃硫酸2