基因工程試題及答案

1、作業(yè)一：一、名詞解釋：1、基因：是遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)，是DNA（脫氧核糖核酸）分子上具有遺傳信息的特定核苷酸序列的總稱，是具有遺傳效應(yīng)的DNA分子片段。2、基因組該指單倍體細(xì)胞中包括編碼序列和非編碼序列在內(nèi)的全部DNA分子3、操縱子:原核生物的幾個功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因往往排列在一起，轉(zhuǎn)錄生成一個mRNA，然后分別翻譯成幾種不同的蛋白質(zhì)。這些蛋白可能是催化某一代謝過程的酶，或共同完成某種功能。這些結(jié)構(gòu)基因與其上游的啟動子，操縱基因共同構(gòu)成轉(zhuǎn)錄單

2、位，稱操縱子。4、啟動子:是RNA聚合酶結(jié)合位點周圍的一組轉(zhuǎn)錄控制組件，包括至少一個轉(zhuǎn)錄起始點。在真核基因中增強子和啟動子常交錯覆蓋或連續(xù)。有時，將結(jié)構(gòu)密切聯(lián)系而無法區(qū)分的啟動子、增強子樣結(jié)構(gòu)統(tǒng)稱啟動子。5、增強子:是一種能夠提高轉(zhuǎn)錄效率的順式調(diào)控元件，最早是在SV40病毒中發(fā)現(xiàn)的長約200bp的一段DNA，可使旁側(cè)的基因轉(zhuǎn)錄提高100倍，其后在多種真核生物，甚至在原核生物中都發(fā)現(xiàn)了增強子。增強子通常占100～200bp長度，也和啟動子

3、一樣由若干組件構(gòu)成，基本核心組件常為8～12bp，可以單拷貝或多拷貝串連形式存在。6、基因表達(dá)：是指細(xì)胞在生命過程中，把儲存在DNA順序中遺傳信息經(jīng)過轉(zhuǎn)錄和翻譯，轉(zhuǎn)變成具有生物活性的蛋白質(zhì)分子。二、簡答題1、說明限制性內(nèi)切核酸酶的命名原則要點。答：限制性內(nèi)切核酸酶采用三字母的命名原則即屬名種名株名的各一個首字母再加上序號.基本原則:34個字母組成方式是:屬名種名株名序號首字母:取屬名的第一個字母且斜體大寫第二字母:取種名的第一個字母斜體

4、小寫第三字母:(1)取種名的第二個字母斜體小寫(2)若種名有詞頭且已命名過限制酶則取詞頭后的第一字母代替.第四字母:若有株名株名則作為第四字母是否大小寫根據(jù)原來的情況而定但用正體.順序號:若在同一菌株中分離了幾種限制酶則按先后順序冠以IⅡⅢ…等用正體.2、什么是限制性內(nèi)切核酸酶的星號活性？受哪些因素影向？答：Ⅱ類限制酶雖然識別和切割的序列都具有特異性，但是這種特異性受特定條件的限制，即在一定環(huán)境條件下表現(xiàn)出來的特異性。條件的改變，限制酶

5、的特異性就會松動，識(3)其他的一些用途：包括用雙脫氧末端終止法進(jìn)行DNA序列分析、用于cDNA第二鏈的合成、在定點突變中用于合成第二鏈、用引物延伸法(primerextension)制備單鏈DNA探針等。5、細(xì)菌堿性磷酸酯酶和小牛腸堿性磷酸酯酶有什么不同？在基因工程中有什么用途？答：主要差別是：CIP68C時失活，而BAP68C穩(wěn)定，且耐酚抽提。應(yīng)用：(1)dsDNA的5端脫磷酸，防止DNA的自身連接。但是用CIP處理后，最好將CIP

6、除去后，再進(jìn)行連接反應(yīng)。(2)DNA和RNA脫磷酸，然后用于多核苷酸激酶進(jìn)行末端標(biāo)記。三、論述題1、如果知道某一基因的功能及其相應(yīng)的蛋白質(zhì)的氨基酸序列組成，可以通過何種方法克隆該基因答：可以通過合成核苷酸探針或設(shè)計簡并PCR引物從cDNA文庫或基因組文庫中篩選?；蛘呃孟鄳?yīng)的抗體從cDNA表達(dá)文庫中篩選相應(yīng)的克隆。作業(yè)二：一、名詞解釋：1、基因工程：在體外將外源基因進(jìn)行切割并與一定的載體連接，構(gòu)成重組DNA分子并導(dǎo)入相應(yīng)受體細(xì)胞，使外源

7、基因在受體細(xì)胞中進(jìn)行復(fù)制、表達(dá)，使目的基因大量擴(kuò)增或得到相應(yīng)基因的表達(dá)產(chǎn)物或進(jìn)行定向改造生物性狀。簡單概括，就是將外源目的基因與載體重組后再進(jìn)入宿主細(xì)胞的過程。2、載體：能載帶微量物質(zhì)共同參與某種化學(xué)或物理過程的常量物質(zhì)，在基因工程重組DNA技術(shù)中將DNA片段（目的基因）轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞的一種能自我復(fù)制的DNA分子。三種最常用的載體是細(xì)菌質(zhì)粒、噬菌體和動植物病毒。3、轉(zhuǎn)化：指將質(zhì)?；蚱渌庠碊NA導(dǎo)入處于感受態(tài)的宿主菌，并使其獲得新的表型