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文檔簡介
1、Elecsys 原理及儀器,免疫檢測技術(shù)的發(fā)展電化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)及其原理電化學(xué)發(fā)光儀器性能特點(diǎn)電化學(xué)發(fā)光技術(shù)的優(yōu)勢電化學(xué)發(fā)光檢測項(xiàng)目,免疫檢測技術(shù)的發(fā)展電化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)及其原理電化學(xué)發(fā)光儀器性能特點(diǎn)電化學(xué)發(fā)光技術(shù)的優(yōu)勢電化學(xué)發(fā)光檢測項(xiàng)目,技術(shù)創(chuàng)新領(lǐng)先的免疫檢測新技術(shù)-ECL,放免,酶免熒光免疫化學(xué)發(fā)光,電化學(xué)發(fā)光,1960‘S,1970~80‘S,2000‘S,1,抗體技術(shù)的革命,從使用多克隆抗體向使用單克隆抗體轉(zhuǎn)變2,
2、從手工操作向全自動分析儀的轉(zhuǎn)變3,從液相放射免疫技術(shù)向均相和固相免疫分析技術(shù)的轉(zhuǎn)變,1959年Berson和Yalow建立了放射免疫分析方法(RIA),大大提高了免疫測定的敏感度,這種標(biāo)記免疫測定開拓了醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)的新領(lǐng)域 。,缺點(diǎn) 半衰期短,試劑貨架期不長。標(biāo)記物不斷變化,試劑批間、批內(nèi)變化大,標(biāo)準(zhǔn)曲線不能保存。反應(yīng)時間長,操作步驟很難自動化。使用放射性核素,對人體有一定的危害性。分析的限度為 10 mol/ml 或 10 g
3、/ml。,在一定時期內(nèi)曾被采用,正在被逐步取代。,放射免疫測定法,1971年Engvall和Perlman建立了固相酶免疫測定方法(ELISA),這種非放射標(biāo)記免疫測定在臨床檢驗(yàn),特別是感染性疾病的診斷中取得了廣泛應(yīng)用。,酶免疫測定法,缺點(diǎn) 試劑制備困難。操作步驟復(fù)雜,耗時長。影響因素多,質(zhì)量控制難以保證。最后測定的是顏色的光密度,其精密度和敏感性不如發(fā)光免疫技術(shù)。,各實(shí)驗(yàn)室操作不規(guī)范,質(zhì)量難以保證。有學(xué)者認(rèn)為ELISA技術(shù)已逐
4、步走向退化,可能會逐步退出臨床實(shí)驗(yàn)室。,化學(xué)發(fā)光免疫測定法出現(xiàn)于20世紀(jì)90年代初。由于最后測定的是光子的量,不但對檢測者無害,其敏感度和精密度均優(yōu)于RIA,而且試劑較穩(wěn)定,并可進(jìn)行全自動分析。,化學(xué)發(fā)光免疫測定法,采用標(biāo)記催化酶(如辣根過氧化物酶)或化學(xué)發(fā)光分子(如魯米諾)的方法,其化學(xué)反應(yīng)一般不穩(wěn)定,為間斷的、閃爍性發(fā)光,而且在反應(yīng)過程中易發(fā)生裂變,導(dǎo)致反應(yīng)結(jié)果不穩(wěn)定。檢測時需對結(jié)合相與游離相進(jìn)行分離,操作步驟多。反應(yīng)原理相對落
5、后。,缺點(diǎn),電化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù),電化學(xué)發(fā)光免疫測定法(ECLIA)發(fā)展于 1996年,它在發(fā)光反應(yīng)中加入了電化學(xué)反應(yīng),是繼放射免疫、酶免疫、化學(xué)發(fā)光免疫測定之后的新一代標(biāo)記免疫測定技術(shù),是電化學(xué)和免疫測定相結(jié)合的產(chǎn)物。,世界公認(rèn)的 最先進(jìn) 的臨床免疫檢測技術(shù),免疫檢測技術(shù)的發(fā)展電化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)及其原理電化學(xué)發(fā)光儀器性能特點(diǎn)電化學(xué)發(fā)光技術(shù)的優(yōu)勢電化學(xué)發(fā)光檢測項(xiàng)目,Elecsys系列全自動免疫分析儀,1996年德國寶靈
6、曼公司推出Elecsys 2010系統(tǒng)世界上第一臺 應(yīng)用電化學(xué)發(fā)光技術(shù)的全自動免疫分析儀1998年羅氏公司收購寶靈曼公司2001年羅氏推出電化學(xué)發(fā)光免疫模塊E 170 羅氏是全球唯一 應(yīng)用電化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)制造儀器的廠商2006年羅氏推出電化學(xué)發(fā)光免疫模塊e6012007年羅氏推出電化學(xué)發(fā)光免疫模塊e411,ECL 2010 disk,E170,ECL 2010 rack,e601,Elecsys系列全自動免疫分析儀,e41
7、1 disk,e411 rack,電化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的原理三聯(lián)吡啶釕和三丙胺在電極表面發(fā)生的電化學(xué)發(fā)光反應(yīng),電化學(xué)發(fā)光原理,底物:三聯(lián)吡啶釕[Ru(bpy)2+3] N羥基琥珀酰胺酯(NHS) 三丙胺(TPA),在電極陽極表面,以上兩種電化學(xué)活性物質(zhì)同時失去電子發(fā)生氧化反應(yīng),2價的[Ru(bpy)2+3] 標(biāo)記物被氧化成3價的[Ru(bpy)3+3] 的標(biāo)記物,TPA被氧化成陽離子自由基TPA+* , TPA+* 很不穩(wěn)定,
8、自發(fā)地失去一個質(zhì)子而形成自由基TPA* ,其為強(qiáng)還原劑,將一個電子給3價的[Ru(bpy)3+3] ,使其成為激發(fā)態(tài)的Ru(bpy)2+3 ,而TPA自身被氧化成氧化產(chǎn)物。激發(fā)態(tài)的Ru(bpy)2+3衰減時發(fā)射一個波長620nm的光子,重新形成基態(tài)的Ru(bpy)2+3 。這一過程在電極表面周而復(fù)始進(jìn)行,產(chǎn)生許多光子。使得光信號增強(qiáng)。,,Sandwich Principle雙抗夾心法,? large molecular weight
9、 antigens are measured directly proportional measurement, means: low signal = low concentration high signal = high concentration e.g. TSH, CA 15-3 II – assays,雙抗夾心法 & 橋
10、聯(lián)免疫法,,Competitive Principle競爭法,? small molecular weight antigens are measured indirectly proportional measurement, means: high signal = low concentration low signal = high concentrati
11、on e.g. T4, Folate II – assays,競爭法,電化學(xué)發(fā)光免疫系統(tǒng)核心原理,電化學(xué)發(fā)光,磁性微粒子固相,親和素- 生物素間接包被,流動池檢測系統(tǒng),簡單試劑管理,先進(jìn)的定標(biāo)概念,直徑最小– 2.8um表面積大而均一磁性微粒子呈懸浮狀態(tài)使異相反應(yīng)變成類均相反應(yīng)加快反應(yīng)速度提高反應(yīng)靈敏度,磁性微粒子固相載體的優(yōu)點(diǎn),專利的鏈霉親和素-生物素包被技術(shù),適用于包被各種化合物,如多肽、脂
12、多糖等。,親和素包被微粒子高效、均一、穩(wěn)定、通用。,鏈霉親和素- 生物素間接包被的優(yōu)勢,生物素結(jié)合物與標(biāo)本液相反應(yīng)。,生物素- 親和素反應(yīng)親和力強(qiáng)。,由磁鐵將結(jié)合標(biāo)記Ag-Ab復(fù)合物的磁性微粒(結(jié)合相)吸附于電極上,游離相被緩沖液沖走;電極表面的電化學(xué)發(fā)光的信號檢測完成后,磁鐵移走并使用系統(tǒng)清潔液沖走電極表面的結(jié)合標(biāo)記Ag-Ab復(fù)合物的磁性微粒子;實(shí)現(xiàn)了結(jié)合相與游離相的全自動分離,流動池檢測系統(tǒng),簡單的試劑管理,適用于電化學(xué)發(fā)光全自
13、動免疫分析儀各種型號 Elecsys 2010 and the Modular E 1702維條形碼自動輸入全部信息試劑聯(lián)體包 成分獨(dú)立 穩(wěn)定好無需配制,打開即用自動開閉試劑瓶蓋,有效地防止揮發(fā)等,電化學(xué)發(fā)光試劑極為穩(wěn)定,兩點(diǎn)定標(biāo),節(jié)約成本二維條碼系統(tǒng),信息量大,先進(jìn)的兩點(diǎn)定標(biāo)方式,·羅氏研發(fā)部:建筑在參考標(biāo)準(zhǔn)上的 Master calibrator curve:10-12point·每批試劑:Lo
14、t-specific master calibration curve (n = 5 or 6)·客戶端:換批號兩點(diǎn)定標(biāo),免疫檢測技術(shù)的發(fā)展電化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)及其原理電化學(xué)發(fā)光儀器性能特點(diǎn)電化學(xué)發(fā)光技術(shù)的優(yōu)勢電化學(xué)發(fā)光檢測項(xiàng)目,真正的連續(xù)隨機(jī)進(jìn)樣15個試劑通道,帶有冷藏裝置試劑盒自動開/關(guān)樣本盤30個樣本位置,樣本架型 75個樣品位,可隨時插入急診條形碼和原始管樣本系統(tǒng),以及主動樣本識別功能檢測速度:90測試/
15、小時 (真實(shí)速度)主動的試劑識別功能彩色液晶觸摸屏具備液面檢測,凝塊/氣泡自動探測功能檢測結(jié)果數(shù)據(jù)自動傳送可連接中文數(shù)據(jù)系統(tǒng),Elecsys 2010分析儀系統(tǒng)規(guī)格與參數(shù),真正的連續(xù)隨機(jī)進(jìn)樣18個試劑通道,帶有冷藏裝置試劑盒自動開/關(guān)樣本盤30個樣本位置,樣本架型 75個樣品位,可隨時插入急診條形碼和原始管樣本系統(tǒng),以及主動樣本識別功能檢測速度:86測試/小時 (真實(shí)速度)主動的試劑識別功能彩色液晶觸摸屏(鍵盤
16、)具備液面檢測,凝塊/氣泡自動探測功能檢測結(jié)果數(shù)據(jù)自動傳送可連接中文數(shù)據(jù)系統(tǒng),e411分析儀系統(tǒng)規(guī)格與參數(shù),170 測試/小時25 個試劑通道, 溫控在 20°C樣本架傳送式進(jìn)入利用一次性加樣吸頭防范樣本間交叉污染同時在儀器上 1000 個吸頭和 1000 個分析杯在運(yùn)行過程中可以隨時添加吸頭和分析杯,二維條形碼識別系統(tǒng)試劑包裝100/200個測試,自動開蓋功能最大四個模塊組合在一起與全自動生化分析
17、模塊(D/P)任意組合,E170,cobas e 601,170 測試/小時25 個試劑通道, 溫控在 20°C樣本架傳送式進(jìn)入利用一次性加樣吸頭防范樣本間交叉污染同時在儀器上 1000 個吸頭和 1000 個分析杯在運(yùn)行過程中可以隨時添加吸頭和分析杯,二維條形碼識別系統(tǒng)試劑包裝100/200個測試,自動開蓋功能最大2個 e 模塊組合成 ee與生化模塊(c501)組合成 ce,cee,cce,最先進(jìn)的模塊化
18、設(shè)計(jì)理念基于智能化流程管理軟件的多模塊組合可一模塊工作,另一待機(jī),便于維修工作在需增加設(shè)備時只要添加模塊,減少重復(fù)開支生化免疫一體化聯(lián)機(jī)同一軌道連接,同一計(jì)算機(jī)控制所有模塊,e601模塊化設(shè)計(jì)理念,全新的cobas e library概念,及時得到更新信息電子版試劑說明書電子版定標(biāo)、質(zhì)控條形碼相關(guān)通知遠(yuǎn)程診斷服務(wù) 軟硬件升級遠(yuǎn)程幫助平臺系統(tǒng)信息分析 系統(tǒng)參數(shù)備份,The Core Unit,快速靈活的樣本管理功
19、能,快速靈活的樣本管理功能,免疫檢測技術(shù)的發(fā)展電化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)及其原理電化學(xué)發(fā)光儀器性能特點(diǎn)電化學(xué)發(fā)光技術(shù)的優(yōu)勢電化學(xué)發(fā)光檢測項(xiàng)目,同行業(yè)中最先進(jìn)的分析原理專利的電化學(xué)發(fā)光分析技術(shù)(ECL),最好的化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物-三聯(lián)吡啶釕分子量小,結(jié)構(gòu)簡單??梢詷?biāo)記于抗原,抗體,核酸等各種分子量,分子結(jié)構(gòu)的物質(zhì)。從而具有最齊全的檢測菜單。三聯(lián)吡啶釕為水溶性,且高度穩(wěn)定的小分子物質(zhì)。保證電化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的高效和穩(wěn)定,而且避免了本底噪聲干擾。,
20、最先進(jìn)的包被技術(shù)采用羅氏公司專利的鏈霉親和素-生物素包被技術(shù)。鏈霉親和素-生物素是最牢固和特異的結(jié)合。保證了牢固的包被效果和特異的檢測結(jié)果。,電化學(xué)發(fā)光技術(shù)的優(yōu)勢,電化學(xué)發(fā)光技術(shù)的優(yōu)勢,特殊的磁性微粒子載體以及分離技術(shù)由聚苯乙烯包被的磁性微粒子為載體,直徑僅為2.8um。同類型產(chǎn)品最小提供類均相的反應(yīng)環(huán)境,增加反應(yīng)面積,提高反應(yīng)速度;保證最終檢測結(jié)果的高靈敏度;利用磁性分離技術(shù),實(shí)現(xiàn)全自動化分析。,與其它幾種標(biāo)記免疫測定技術(shù)
21、相比,電化學(xué)發(fā)光具有更多的優(yōu)點(diǎn):1. 高靈敏度,檢測下限達(dá)pmol;2. 線形范圍寬,達(dá)7個數(shù)量級;3. 快速,出第一個結(jié)果的時間僅需數(shù)分鐘;4.
22、; 應(yīng)用范圍廣,可以同樣的靈敏度和線性范圍檢測各種物質(zhì),包括DNA;5. 試劑穩(wěn)定,無污染和衰變問題;6. 自動化程度高。,免疫檢測技術(shù)的發(fā)展電化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)及其原理電化學(xué)發(fā)光儀器性能特點(diǎn)電化學(xué)發(fā)光技術(shù)的優(yōu)勢電化學(xué)
23、發(fā)光檢測項(xiàng)目,甲狀腺項(xiàng)目腫瘤標(biāo)志物性激素類 肝炎系列心臟功能貧血診斷指標(biāo)骨質(zhì)疏松其它項(xiàng)目,Elecsys系列全自動分析儀檢測項(xiàng)目,最齊全的檢測項(xiàng)目菜單,甲 狀 腺 項(xiàng) 目,,TSH 促甲狀腺激素 (查明甲狀腺功能的初篩試驗(yàn))T3 三碘甲狀腺原氨酸(作用于靶器官的主要甲狀腺激素)T4 甲狀腺素 (
24、診斷甲亢、甲低)FT3 游離三碘甲狀腺原氨酸FT4 游離甲狀腺素TG 甲狀腺球蛋白 (甲狀腺體完整性的特殊標(biāo)志物)T-uptake 甲狀腺素結(jié)合力 (了解甲狀腺素的結(jié)合位點(diǎn)數(shù))Anti-TG 抗甲狀腺球蛋白抗體(增高見于慢性橋本甲狀腺炎等)Anti-TPO 抗甲狀腺過氧化物酶抗體,腫 瘤 標(biāo) 志 物,
25、AFP 甲胎蛋白 (原發(fā)性肝癌最特異的腫瘤標(biāo)志物)CEA 癌胚抗原 (增高多見于結(jié)腸癌患者)CA125 糖類抗原125 (最可靠的卵巢癌診斷指標(biāo))CA15-3 糖類抗原15-3(主要用于乳腺癌的監(jiān)測和篩選)CA19-9 糖類抗原19-9(胰腺癌敏感性最高的標(biāo)志物)CA72-4 糖類抗原72-4(胃 腸 道 和 卵 巢 癌 的 腫 瘤
26、標(biāo) 志 物),Cyfra21-1非小細(xì)胞肺癌抗原NSE 神經(jīng)元特異性烯醇化酶(小細(xì)胞肺癌檢出的陽性率高)PSA 前列腺特異性抗原 (前列腺癌的篩選與早期診斷)Free PSA 游離前列腺特異性抗原S100 S100蛋白質(zhì) (輔助診斷惡性黑色素瘤患者能腦損傷患者),性 激 素 類,Cortisol 皮質(zhì)醇 (
27、最主要的糖皮質(zhì)類固醇)Estradiol 雌二醇 (生物活性最強(qiáng)的雌激素)FSH 促卵泡生成激素LH 促黃體生成激素HCG+β 人絨毛膜促性腺激素 + β 亞單位HCG STAT 總HCG (2010及e411),Progesterone 孕酮Prolactin 泌乳素Testosterone
28、 睪酮DHEA-S 硫酸脫氫雄甾酮(輔助診斷多毛癥和女子男性化)SHBG 性激素結(jié)合球蛋白,,協(xié)同調(diào)節(jié)和刺激性腺的發(fā)育和功能,肝 炎 系 列,HBsAg II 乙肝表面抗原(檢測HBV感染的首選標(biāo)志物)Anti-HBs 乙肝表面抗體HBeAg 乙肝e抗原 (陽性提示大量病毒存在)Anti-Hbe
29、 乙肝e抗體Anti-HBc 乙肝核心抗體Anti-HBc IgM 乙肝核心抗體IgM HBsAg Confirmatory 乙肝表面抗原確證實(shí)驗(yàn)Anti-HAV 甲肝抗體Anti-HAV IgM 甲肝抗體IgM,,心 臟 功 能,,CK-MB 肌酸肌酶同功酶(診斷心肌缺血性損傷的重要指標(biāo))Digoxin
30、 地高辛Digitoxin 洋地黃Myoglobin 肌紅蛋白 (診斷急性心肌梗死的的重要指標(biāo))Troponin T 肌鈣蛋白T (心肌損傷特異的標(biāo)志)pro-BNP 腦利鈉肽前體(反映心衰的標(biāo)志物),貧 血 診 斷 指 標(biāo),Ferritin 鐵蛋白B12
31、 維生素B12 (輔助診斷巨幼細(xì)胞性貧血)Folate 葉酸 (輔助診斷巨幼細(xì)胞性貧血)RBC Folate 紅細(xì)胞內(nèi)葉酸 (真實(shí)反映組織中葉酸的含量),骨 質(zhì) 疏 松,,Β-CrossLaps β-膠原降解產(chǎn)物N-Osteocalcin N端骨鈣素PTH 甲狀旁腺激素P1NP
32、總I 型膠原氨基端延長肽,其 它 項(xiàng) 目,IgE 免疫球蛋白E HIV combi 艾滋病抗原抗體聯(lián)合試驗(yàn)ACTH 促腎上腺皮質(zhì)激素INSULIN 胰島素C-PEPTIDE C肽,Elecsys Rubella lgG Elecsys Rubella
33、lgMElecsys Toxo lgGElecsys Toxo lgMElecsys CMV lgG Elecsys CMV lgM,TORCH,用于孕婦的產(chǎn)前檢查,1、Elecsys? Anti-HCV 2、21三體(唐氏綜合癥)評估項(xiàng)目及軟件 Elecsys PAPP-A Elecsys free HCG 用于輔助診斷懷孕頭三個月的胎兒
34、是否有患唐氏綜合癥的危險 3、Elecsys? IL -6 能更早的反映患者的急性炎癥,如膿血癥 4、Elecsys? Anti-CCP 有利風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的診斷5、Elecsys? Vitamin D 反映的是骨代謝狀況6、Elecsys? TSHR-Ab 檢測人體甲狀腺組織中是否存在抗TSH受體的抗體,臨床上可 用于鑒別診斷甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)癥等疾病7、Elecsys? sCD40L 反映心血管疾
35、病中血小板,凝血細(xì)胞的聚集能力,血栓癥發(fā)病的 危險性 8、Elecsys? PLGF 檢測正常妊娠及妊娠高血壓綜合征(妊高征)患者血清胎盤生長因子 (PlGF)的水平;妊娠過程中,PlGF對胎盤血管的形成有重要調(diào)節(jié)作用,PlGF的下降與妊 高征發(fā)病有關(guān). 9、Elecsys? sFLT1 可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體1,子癇前期患者胎盤組織中sFlt-1蛋白 過度表達(dá),可引起循環(huán)
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