抗hbv核酶的研究進展_1

1、抗HBVHBV核酶的研究進展核酶的研究進展乙型肝炎病毒是引起乙型肝炎的病原體。在我國HBV感覺率達10%，而傳統(tǒng)的抗病毒藥物遠期療效均不顯著，尋找新型抗HBV藥物成為迫切需要。核酶是一類具有生物催化功能的RNA，可定點切割RNA靶分子，從而達到有效阻斷基因表達的目的[1]。通過合理的設計及操作，核酶可阻斷HBV的復制及表達。所以在基因治療領域倍受重視。1核酶的類型及設計到目前為止，人們發(fā)現(xiàn)的核酶共有六種類型。即Ⅰ類內含子、RNaseP、

2、錘頭狀核酶、發(fā)夾狀核酶、丁型肝炎核酶和VS核酶。通過對這六類核酶組成及結構的研究，人們已經開始利用錘頭狀、發(fā)夾狀核酶的特點，人工合成所需要的核酶。WEizsacker[2]、湯華[3]。竺來發(fā)等人[4]所設計針對HBV的核酶，均采用這種傳統(tǒng)方式。Hselh等[5]則就HDV核酶研究對乙型肝炎病毒的阻斷作用。對于核酶的合成，有兩種方法。①是用DNARNA合成儀直接合成。②先合成核酶的雙鏈或單鏈模板，然后用T4DNA連接酶將其整合并克隆至合

3、適的表達載體，讓其表達出核酶。這是理設計的核酶，催化效率也低于天然核酶。根據(jù)RNA分子進行技術提出進行體外篩選方法，在抗HIV中已有報道，對抗HBV也是一種可行的方法。②多位點核酶的聯(lián)合作用，針對靶RNA分子的不同位點進行多位點破壞，進一步提高核酶的剪切率，這樣既可防止HBV的變異引起變異逃避，也可減少空間構型的影響。許多設計都采用了這種思路，如Weizsacker所用三個核酶的串聯(lián)作用。③與定向技術相結合，如用HBV外膜蛋白包裝含有H

4、DV核酶的弱毒株，可使其定向作用于靶器官肝臟。日本學者山田修平設計抗HCV的核酶時，使用唾液粘蛋白定向等等。④核酶與反義技術相結合。核酶與RNA誘餌相結合，這種方法在抗HIV核酶中已有許多研究，如Homman等人的報道，抑制效率可提高4～7倍[8]。目前的研究現(xiàn)狀抗HBV核酶的研究是核酶應用研究的一個熱點。竺來發(fā)等人設計針對HBcAgmRNA編碼序列的核酶。在Mg存在下，將137nt的核酸準確地水解得到97nt和40nt兩個片段，可有效