擬除蟲菊酯降解菌的分離、鑒定、降解性能及系統(tǒng)發(fā)育分析.pdf

1、目前生產(chǎn)上廣泛使用的農(nóng)藥按化學(xué)結(jié)構(gòu)類型可以分為有機磷類、有機氯類、擬除蟲菊酯類和氨基甲酸酯類。就目前的使用情況而言，擬除蟲菊酯為殺蟲劑中的第二大類，約占世界殺蟲劑市場的20％，在我國的使用面積已占?xì)⑾x劑總施用面積的1/3以上。隨著擬除蟲菊酯類農(nóng)藥使用的日益廣泛和使用時間的延長，有關(guān)菊酯類農(nóng)藥的殘留問題及其危害也日益暴露出來，利用微生物降解這類農(nóng)藥已成為近年來研究討論比較熱的問題。 本實驗從山東大成農(nóng)藥股份有限公司污水曝氣池中分離

2、到D2細(xì)菌，其能以氯氰菊酯為唯一碳源生長，且能夠?qū)⑵浣到獾模?jīng)鑒定為革登菌屬(Gor幽nia sp．)，有明顯的桿球變化周期，培養(yǎng)初期為長桿狀，隨著時間增加逐漸變短，老齡培養(yǎng)物為球形或卵圓形。所有的生理生化性質(zhì)均與革登菌吻合。用氣相色譜法對D2的降解性能分析表明：4天對氯氰菊酯的降解率為25％，7天降解率為42％，8天降解率為52.3％。當(dāng)接種量為30％時，D2的降解效果最好，8天內(nèi)降解率可以達(dá)到73.7％；pH=7、30℃時該菌的降解

3、效果最好，外加碳源能夠明顯促進(jìn)菌株的降解能力。 D2可以利用對硝基苯酚(P-nitrophenol)、甲基對硫磷(methylparathion)、硫丹(endosulfan)、甲氰菊酯(fenpropathrin)、甲胺磷(methamidophos)作為碳源和能源進(jìn)行生長；最大耐受度分別為：氯氰菊酯1200mg/L，甲氰菊酯800mg/L，對硝基苯酚200mg/L，硫丹300mg/L，甲胺磷150mg/L。菌株：D2對各種常

4、用的抗生素類藥物敏感，當(dāng)菌體被釋放到自然環(huán)境中進(jìn)行生物修復(fù)時，不會同時攜帶耐藥因子在土著菌間傳播。 D2的16S rDNA序列有1482個堿基，GenBank中的注冊號為DQ787430：gyrB序列有1287個堿基，注冊號為DQ913892。分別以這兩個基因作為進(jìn)化時鐘來構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹，并對建樹結(jié)果進(jìn)行評估，結(jié)果表明：16S rDNA應(yīng)主要用于菌株的鑒定，而gyrB/GYB更適合于系統(tǒng)發(fā)育分析，能夠更好的反映出屬內(nèi)種間的進(jìn)化關(guān)