慢性阻塞性肺疾病患者痰液白介素8水平研究

1、1慢性阻塞性肺疾病患者痰液白介素8水平研究【摘要】探討慢性阻塞性肺疾?。–OPD）痰中IL8水平與氣流阻塞間關(guān)系。方法對30例COPD患者、30例單純性慢性支氣管炎患者和30例健康志愿者誘導(dǎo)痰中細(xì)胞成分做染色分類，上清成分用酶聯(lián)免疫吸附試驗做白介素8（IL8）水平測定。結(jié)果痰細(xì)胞分類中，COPD組中性粒細(xì)胞、IL8水平明顯高于單純性慢支組、健康組。COPD組中中性粒細(xì)胞、IL8與1s用力呼氣容積（FEV1）占預(yù)計值百分比呈反比（P0.0

2、1）。結(jié)論慢性阻塞性肺疾病中性粒細(xì)胞、IL8表達(dá)增加與吸煙者發(fā)展為氣流阻塞有關(guān)?！娟P(guān)鍵詞】阻塞性肺疾病白介素8【Abstract】ObjectiveTodeterminetherelationshipbetweenthelevelofinterleukin8（IL8）insputumairwayobstructioninpatientswithchronicobstructivepulmonarydisease（COPD）.Method

3、sCellsininducedsputumfrom30casesofCOPD30casesofchronicbronchitis30healthyvolunteerswerestainedanalyzedmicropically.IL8influidphasewasmeasuredwithenzymelinkedimmunosbentassay.ResultsThepercentageofneutrophilsthelevelofIL8

4、insputumfromCOPDpatientsweresignificantlyhigherthanthosefromchronic311病例選擇COPD組：COPD穩(wěn)定期［3］患者30例，男16例，女14例，年齡52～65歲。1s用力呼氣容積（FEV1）占預(yù)計值百分比為48.8%9.6%。平均吸煙指數(shù)為40025。單純慢支組30例，其中男14例，女16例，年齡31～60歲。1s用力呼氣容積（FEV1）占預(yù)計值百分比為94.9%3.5

5、%。平均吸煙指數(shù)為35025。健康組：30例，其中男15例，女15例，年齡29～62歲，F(xiàn)EV1%預(yù)計值102.5%8.1%。均為非吸煙者或戒煙20年以上。以上3組受試者8周內(nèi)無呼吸道感染或氣道疾病加重，12周內(nèi)未服用糖皮質(zhì)激素類藥物。12實驗方法（1）痰標(biāo)本收集和處理：應(yīng)用誘導(dǎo)痰方法，霧化吸入3.5%的高滲鹽水10～20min，鼓勵病人漱口，用力咳出深部痰，肉眼選取0.5～1ml無唾液污染帶有白色痰栓的痰液，加入4倍量0.1%DTT，

6、37℃孵育20min，溶解痰液，再加入上等量磷酸鹽緩沖液（0.01M、pH7.4PBS）充分洗滌細(xì)胞，經(jīng)48μm濾網(wǎng)除去黏液及細(xì)胞碎渣，2000rmin離心10min，細(xì)胞沉淀用PBS調(diào)至1106后用細(xì)胞離心甩片機(jī)制備細(xì)胞涂片，2張做細(xì)胞分類用，另2張做免疫組化用?？紤]到DTT可以破壞IL8的二硫鍵，另選取1ml無唾液污染痰液，加入3ml的PBS后混勻，16000rmin離心20min，留取上清70℃保存，待測IL8用。（2）細(xì)胞計數(shù)及