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文檔簡介
1、重組生產膠原蛋白的研究進展重組生產膠原蛋白的研究進展穩(wěn)定的[4]。所以生產熱穩(wěn)定性的重組膠原蛋白需要高水平的表達膠原蛋白并且有足夠的P4H活性來催化其羥基化。重組膠原蛋白已經在哺乳動物細胞[510]、昆蟲細胞[1115]、酵母[1621]、大腸桿菌[22]、轉基因煙草[2326]、小鼠[2728]和蠶[29]中得到表達。在各種重組表達系統(tǒng)中,只有哺乳動物細胞在轉染膠原蛋白基因而不轉染P4H基因的情況下,可以表達充分羥基化的膠原蛋白[11
2、15]。膠原蛋白在哺乳動物細胞中的表達水平從0.6到20mgl不等,在昆蟲細胞中最高可以達到40mgl。然而這種表達水平對大規(guī)模的商業(yè)化生產來說太低,而且細胞培養(yǎng)過程中的費用是其他細胞類型(如酵母和大腸桿菌)發(fā)酵培養(yǎng)過程花費的510倍。而在其它的重組表達系統(tǒng)中遇到的一個普遍問題是宿主細胞不能提供足夠的P4H活性來充分羥基化膠原蛋白。一種多基因表達技術已經用來共表達膠原蛋白和P4H,并且已有利用多基因表達技術以畢赤酵母為宿主細胞表達膠原蛋
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