藥物血漿半衰期的測定

1、藥理學實驗方法的改進藥理學實驗方法的改進——藥物血漿半衰期的測定【摘要】目的：探討藥理學實驗方法——藥物血漿半衰期的測定的實驗方法改進。方法：通過改進實驗方法，將藥物血漿半衰期的測定的實驗中的家兔采血方法由耳緣靜脈切口取血改為耳中央小動脈取血。結果：改進后的實驗方法簡單易行，可達到準時、多次、足量采血的實驗要求，明顯提高了教學效率，使實驗結果更準確、穩(wěn)定。【關鍵詞】改進；實驗方法；藥物血漿；半衰期11材料與方法1.1材料1.1.1實驗動

2、物健康的家兔1只，雌雄不拘，體重為2～4千克。1.1.2實驗器材、藥品及試劑7號頭皮針、三通管、注射器、試管；10%水楊酸鈉溶液、10%三氯化鐵溶液、500Uml肝素鈉生理鹽水溶液；分光光度計、臺式離心機。1.2方法1.2.1實驗目的根據絕大多數藥物在體內按一級動力學消除的規(guī)律，用給藥后各時間點測出的家兔血藥濃度數據測定藥物血漿半衰期。1.2.2實驗方法1.2.2.1傳統實驗方法取試管3支，編號，各管加入10%的三氯醋酸3.5ml。取家

3、兔一只，稱重，以刀片劃破其耳緣靜脈，讓其自然滴血15~16滴（約1ml），置于1號試管中，攪拌均勻，靜置。從家兔耳緣靜脈注射10%的水楊酸鈉溶液200mgkg，待藥液全部注入后，每隔30分鐘，以刀片劃破其耳緣靜脈，讓其自然滴血各15~16滴，置于2號和3號試管中，攪拌均勻。將1、2、3號試管同時離心，速度為3000轉分，離心時間為5分鐘。將血漿蛋白沉淀分離，制成清涼的去蛋白血濾液。分別吸取三管中的上清液3ml，依次置于另三個編號的試管中

4、，每管加入10%的三氯化鐵溶液0.5ml，搖勻，若血濾液中含水楊酸，即顯紫色。以1號管為對照，用分光光度計在520nm的波長下測定給藥后各管上清液的光密度值。在半對數座標紙上，以時間為橫座標(等方格)，血藥濃度為縱座標(對數值)，將測算的濃度值作點連線，即為藥時曲線，在此線上找出血藥濃度下降一半所對應的時間即為該藥的血漿半衰期。1.2.2.2改進實驗方法取試管7支，按0～6編號，在0號管加入生理鹽水3ml，其余各管均加入生理鹽水4ml。

5、取家兔一只，稱重，將家兔固定于兔盒中。使用充滿肝素的7號頭皮針從家兔耳中央的小動脈插入，用輸液夾固定。從三通管往小動脈方向注入500Uml肝素鈉生理鹽水溶液1mlkg，致使家兔全身肝素化，以抗凝。用連接在三通管上的注射器反復抽吸3～5次后，從三通管處（動脈方向）準確抽取藥前血0.2ml于1號管中作為藥前對照管。用注射器從家兔耳緣靜脈注入10％水楊酸鈉溶液2mlkg。分別于給藥后5、10、20、40、60分鐘時，從三通管(動脈方向)準確吸

6、取血樣0.2ml于2、3、4、5、6號試管中，搖勻，靜置，記錄取到血樣的時間。因三通管內含有上次殘存血樣，所以每次取血前應用注射器反復抽吸3～5次。將各試管離心速度為3000轉分，離心時間為5分鐘。精確吸取離心后的上清液3ml分別放入另一組編好號的試管中，每管加10％三氯化鐵溶液0.2ml，搖勻，使其顯色。以0號管為對照，用分光光度計在520nm的波長下測定給藥后各管上清液的光密度值。在半對數座標紙上，以時間為橫座標(等方格)，血藥濃度

7、為縱座標(對數值)，將6次測算的濃度值作點連線，即為藥時曲線，在此線上找出血藥濃度下降一半所對應的時間即為該藥的血漿半衰期。2結果本實驗用傳統實驗方法與改進實驗方法均可達到測定藥物血漿半衰期的實驗效果，但改進后的實驗能明顯縮短實驗所需時間，減小實驗誤差，實驗結果也更準確、穩(wěn)定。3討論藥物血漿半衰期的測定實驗，是藥理學教學實驗中的一項常規(guī)實驗，但因為這個實驗對象為家兔，對學生動手操作能力要求較高。在傳統實驗中的家兔耳緣靜脈切口采血的方法容

8、易造成家兔多次采血損傷、甚至切口過深，而且采血量并不能次次都達到1ml，若用物理方法（如涂搽酒精、用手術臺燈烘烤等）促進其出血則容易延誤采血時間點，因此家兔耳緣靜脈切口采血的方法并不能達到令人滿意的效果。而用家兔耳中央小動脈采血的方法代替家兔耳緣靜脈切口采血的方法，改進后的實驗方法簡單易行，學生只需熟練掌握家兔耳緣靜脈注射的操作，也避免了反復切割家兔耳朵造成家兔多次采血損傷、切口過深、延誤采血時間點的缺點，用此法采血時只需在7號頭皮針上