母液配置

1、植物組織培養(yǎng)中常用的一種培養(yǎng)基是MS培養(yǎng)基。MS培養(yǎng)基的配制包括以下步驟。培養(yǎng)基母液的配制和保存MS培養(yǎng)基含有近30種營(yíng)養(yǎng)成分，為了避免每次配制培養(yǎng)基都要對(duì)這幾十種成分進(jìn)行稱量，可將培養(yǎng)基中的各種成分，按原量的20倍或200倍分別稱量，配成濃縮液，這種濃縮液叫做培養(yǎng)基母液。這樣每次使用時(shí)，取其總量的120(50mL)或1200(5mL)，加水稀釋，制成培養(yǎng)液?，F(xiàn)將制備培養(yǎng)基母液所需的各類物質(zhì)的量列出，供配制時(shí)使用。大量元素(母液Ⅰ)mg

2、／LNH4NO333000KNO338000CaCl22H2O8800MgSO47H2O7400KH2PO43400微量元素(母液Ⅱ)KI166H3BO31240MnSO44H2O4460ZnSO47H2O1720Na2MoO42H2O50CuSO45H2O5CoCl26H2O5鐵鹽(母液Ⅲ)FeSO47H2O5560Na2EDTA2H2O7460管潤(rùn)洗2次；③量取母液時(shí)，最好將各種母液按將要量取的順序?qū)懺诩埳希咳?種，劃掉1種，以免

3、出錯(cuò)。溶化瓊脂用粗天平分別稱取瓊脂9g、蒸糖30g，放入1000mL的搪瓷量杯中，再加入蒸餾水750mL，用電爐加熱，邊加熱邊用玻璃棒攪拌，直到液體呈半透明狀。然后再將配好的混合培養(yǎng)液加入到煮沸的瓊脂中，最后加蒸餾水定容至1000mL，攪拌均勻。需要注意的是，在加熱瓊脂、制備培養(yǎng)基的過(guò)程中，操作者千萬(wàn)不能離開(kāi)，否則沸騰的瓊脂外溢，就需要重新稱量、制備。此外，如果沒(méi)有搪瓷量杯，可用大燒杯代替。但要注意大燒杯底的外表面不能沾水，否則加熱時(shí)燒

4、杯容易炸裂，使溶液外溢，造成燙傷。調(diào)pH用滴管吸取物質(zhì)的量濃度為1molL的NaOH溶液，逐滴滴入溶化的培養(yǎng)基中，邊滴邊攪拌，并隨時(shí)用精密的pH試紙(54～70)測(cè)培養(yǎng)基的pH，一直到培養(yǎng)基的pH為58為止(培養(yǎng)基的pH必須嚴(yán)格控制在58)。培養(yǎng)基的分裝溶化的培養(yǎng)基應(yīng)該趁熱分裝。分裝時(shí)，先將培養(yǎng)基倒入燒杯中，然后將燒杯中的培養(yǎng)基倒入錐形瓶(50mL或100mL)中。注意不要讓培養(yǎng)基沾到瓶口和瓶壁上。錐形瓶中培養(yǎng)基的量約為錐形瓶容

5、量的15～14。每1000mL培養(yǎng)基，可分裝25～30瓶。培養(yǎng)基分裝完畢后，應(yīng)及時(shí)封蓋瓶口。用2塊硫酸紙(每塊大小約為9cm9cm)中間夾1層薄牛皮紙封蓋瓶口，并用線繩捆扎。最后在錐形瓶外壁貼上標(biāo)簽。高壓滅菌培養(yǎng)基的高壓滅菌包括以下幾個(gè)步驟。第一，碼放錐形瓶。將裝有培養(yǎng)基的錐形瓶直立于金屬小筐中，再放入高壓蒸氣滅菌鍋內(nèi)。如果沒(méi)有金屬小筐，可以在兩層錐形瓶之間放一塊玻璃板隔開(kāi)。第二，放置其他需要滅菌的物品。將其他需要滅菌的物品也放入高壓蒸