小麥酯酶農(nóng)藥速測卡的研制和應(yīng)用.pdf

1、檢測有機磷農(nóng)藥殘留量的方法主要有：色譜法、光譜法、酶抑制法、免疫法和化學發(fā)光法等。其中酶抑制法以其快速、簡易、靈敏度高等優(yōu)點，在檢測過程中發(fā)揮著越來越重要的作用。本試驗根據(jù)酶抑制法原理，在底物篩選和小麥酯酶純化的基礎(chǔ)上，對農(nóng)藥速測卡進行試探性的研制，并對速測卡的使用方法、使用范圍以及存在的問題進行分析，取得以下結(jié)果： 1．2，6—二氯靛酚乙酸酯和固蘭B鹽都可以作為酶抑制法的底物，因為它們都可以在小麥酯酶的催化作用下直接或間接地

2、發(fā)生顯色反應(yīng)。但是，相比而言，2，6—二氯靛酚乙酸酯作為底物更具有優(yōu)越性，主要表現(xiàn)在：第一、底物和生成物都具有良好的穩(wěn)定性，不易分解而影響檢測結(jié)果的準確性；第二、酶促反應(yīng)條件比較合理，最適酶促反應(yīng)溫度為35℃，最適pH=7．0，兩者都在正常范圍內(nèi)，而不是太高或太低；第三、定量檢測主要是利用抑制率與農(nóng)藥濃度對數(shù)值的線性關(guān)系來檢測殘留量，相關(guān)系數(shù)越大，表示檢測值越接近實際值。2，6—二氯靛酚乙酸酯為底物時，R<'2>=0.991 1，要遠遠

3、大于以固蘭B鹽為底物時的R<'2>；最后，用添加農(nóng)藥法測定的回收率高，表明2，6—二氯靛酚乙酸酯為底物時，檢測限更小。 2．酶活性的高低是關(guān)系檢測方法靈敏度和穩(wěn)定性的關(guān)鍵因素之一。本試驗采用DEAE—52離子交換層析法對小麥酯酶進行分離純化。結(jié)果表明：同樣重的干純化酶粉和干原酶粉相比，前者蛋白質(zhì)含量較高，約是后者的2.86倍；并且純化后酶活性與原酶活性相比提高了近1倍。 3．本試驗采用先浸泡，再真空低溫干燥，最后粘貼